Что такое клик кляк: Механизм клик-кляк, преимущества и недостатки клик-кляк

by Posted on

Содержание

Механизм клик-кляк, преимущества и недостатки клик-кляк

Диван – основной элемент гостевой комнаты с XVI века. Его грациозность, элегантная обивка, интересная конструкция выдают явный, определенный характер, стиль и вкусовые качества хозяина. Достаточно лишь зайти в помещение, где принимают гостей, и сразу станет ясно, чем руководствовался владелец при покупке. Как правило, перед его приобретением, домочадцы задаются вопросами:

  • Где будет расположена зона мягкого уголка?
  • Какой размер выбрать?
  • Как быстро и просто трансформируется место для сна и отдыха?
  • Удобно ли спать на нем?

Все вышеперечисленные вопросы зависят от дизайнерских идей, габаритов жилища и, несомненно, от количества проживающих в доме. Если существует необходимость в экономии, но желание стильного решения нашего времени переполняют, значит – удачный выбор ложится на диваны клик-кляк, «дельфин», «еврокнижки».

Мини кушетки с фиксацией сидя, лежа и полулежа

Данные модели похожи между собой, однако у них есть некоторые отличия. Забавные диваны клик-кляк от производителя – модифицированные ложе с усовершенствованным механизмом трансформации «книжка». Конечно, такие софы значительно привлекательней и гармоничней смотрятся в интерьере. Их современность, минимализм с итальянскими нотками хай-тек придутся по вкусу каждому.

Мягкое, полноценное спальное место с веселым названием клик-кляк – лучший вариант для узкой, вытянутой жилплощади. Это настоящий диван-трансформер, который способен изменять положение боковых частей сидения, спинки в подголовник или комфортный подлокотник. Легкий щелчок говорит о том, что механизм сработал успешно.

Преимущества мини-кровати

Высокая спинка и пушистое сиденье отдают должное расслаблению и получению, в некоторой степени, релаксации. Ко всему прочему, под сиденьем дивана имеется большой, просторный ящик для бельевых принадлежностей. Естественно, присутствие оригинальных подушек вызывают своеобразное чувство уюта и завершают всю задумку декора.

Мелкие недостатки

Но, как и у «книжки», клик-кляк имеет точь-в-точь одинаковые минусы: затираются обои при частом раскладывании и человек, спящий рядом со стенкой, обязан «перелетать» своего союзника по сновидениям. Поэтому, при установке гарнитура стоит учесть отступ от стеновых панелей не более 20 см, предупредив своего соседа по ночлегу о том, что его подушка может периодически слетать на пол и ему надо быть осторожным при попытке встать с дивана-кровати.

Механизм Клик-Кляк. Описание и принцип действия механизма трансформации диванов Клик Кляк

Механизм клик-кляк – модернизированная разновидность «книжки». Отличие заключается в металлическом каркасе и дополнительном регулировании подлокотников.

Преимущества и недостатки

Диваны с механизмом раскладки клик-кляк обладают рядом достоинств:

  1. Внешний вид. Мебель сочетается с любым дизайном интерьера.
  2. Многофункциональность. Механизм поддерживает 3 варианта трансформации. При желании диван превращается в полулежачее кресло или спальную кровать. Подлокотники в разложенном состоянии заменяют подушку. Внутреннее пространство служит местом хранения постельных принадлежностей. Резиновые накладки на ножках сохранят напольное покрытие.
  3. Прочность. Стальная рама выдерживает большие ударные нагрузки.
  4. Компактность. Малогабаритное изделие подходит в помещениях, где важен каждый метр площади.
  5. Ортопедические свойства. Плоскость не нарушает осанку во время сна.
  6. Долговечность. Наполнитель не продавливается в течении срока эксплуатации.
  7. Удобство складывания/раскладывания. Не требуется больших физических усилий.

К недостаткам относится невозможность установки дивана вплотную к стене. В противном случае для откидывания спинки придется отодвигать мебель.


Способ раскладывания

Рассмотрим инструкцию по раскладыванию механизма клик-кляк:

  • поднимите сиденье вверх до характерного щелчка, чтобы спинка вышла из фиксации и приняла горизонтальное положение;
  • для промежуточной трансформации приподнимите спинку еще раз. Угол между спинкой и сиденьем составит 135 градусов. В полусидячем положении можно комфортно расслабиться;
  • чтобы опустить подлокотники, потяните их на себя до характерного щелчка.

Складывание происходит в обратном порядке.

По форме конструкции бывают: прямыми, угловыми, с ящиком для белья, с регулировкой подлокотников, с верхними ручками. В качестве материалов обивки применяются ткани, обладающие плотной структурой.

Обслуживание механизма клик-кляк подразумевает регулярное смазывание трущихся частей, включая клепки. Подходящим средством является техническое масло высокой густоты. Для продления эстетичной внешности, модели снабжаются чехлами, которые выполняют защитную и декоративную функцию.

Диваны клик-кляк – оптимальное решение для любого интерьера. Широкая цветовая гамма дополнит дизайн. Мебель впишется как в просторную гостиную, так и в маленькую детскую комнату.

Механизм Клик Кляк NSM усиленный — VGS-366 (комплект: правый и левый)

Описание

Усиленный механизм Клик Кляк малый NSM —  трехпозиционный механизм (замок) трансформации для диванов типа книжка. Стандартные универсальные размеры (представлены на фото) подходят для большинства современных диванов. Не подходят для диванов IKEA Бединге/Beddinge — узнать почему. Необходим для самостоятельного ремонта дивана книжки, включая диван Дудинка фабрики «Москва». Данный диванный механизм складывания меняет положение спинки дивана в трех положениях: для сна (угол 180°), для отдыха (угол 120°), для сидения (угол 100°). Подходит для всей серии механизмов «Банкетка». Высокое качество и надежность (толщина металла запчасти — 3.1 мм) механизма клик-кляк гарантируют долгую службу вашего дивана.  При правильной эксплуатации срок службы 7 лет. Купить петли замок clic-clac механизм трансформации клик кляк titan по выгодной цене. 

Стоимость указана за комплект: правый и левый элемент.

Мы заботливо упакуем ваш заказ и доставим в любую точку России.

Наша компания заботится о каждом клиенте, именно поэтому для нас очень важна быстрая и качественная доставка наших товаров в любую точку страны. Мы ценим ваше время и понимаем, как это важно – получить заказанный товар в ожидаемые сроки. Вы всегда имеете возможность выбрать удобный способ доставки заказа. Мы работаем со службой доставки  СДЭК, Почтой России, транспортной компанией «Деловые Линии», «КИТ» и другие.

Слабые места других механизмов это слабая пружинка и лепесток, который изначально находится под углом и со временем изгибается и выводит из-строя весь механизм. 

Модель клик-кляк VGS-366 имеет аналогичные размеры, больший вес и усиленную конструкцию, что гарантирует долгую службу вашего дивана.

Правильная эксплуатация механизма, это, прежде всего своевременная (1 раз в 3 месяца) подтяжка крепежных болтов, которые ослабли и смазка трущихся деталей, например, солидолом, маслом для швейных машинок или моторным маслом. И самое главное, не позволять детям висеть и садится на спинку, когда диван собран для сидения. Эти рекомендации позволят избежать перекосов, скрипов, деформаций и гарантируют долгую службу вашего любимого дивана.

Рекомендация: при установке проверить на одновременное срабатывание двух замком. При отсутствии одновременного срабатывания провести регулировку при помощи крепления механизма к коробу (подиуму) и подтянуть весь крепеж к рамкам и к коробу (подиуму).

 

Только зарегистрированные клиенты, купившие данный товар, могут публиковать отзывы.

Как выбрать диван клик кляк

Выбирая новый диван, Вы наверняка задумывались о том, какой же его вид является самым популярным, ведь это изделие позволяет привнести комфорт и уют не только в гостиную, но и в спальню и даже кухню. Выбор мягкой мебели на современном рынке настолько велик, что может ввести в недоумение каждого: раскладные, выдвижные, модульные, угловые диваны, кушетки, а о разновидностях расцветок и обивочного материала даже не стоит и упоминать. Но все это разнообразие приближает Вас к выбору идеальной модели, которая будет полностью соответствовать всем Вашим желаниям. В этой статье мы поговорим о таком диване, как клик кляк, его особенностях и как его правильно разложить.

Что такое диван клик кляк

Изделия с такой конструкцией сейчас находятся на пике популярности, поскольку в ней идеально сочетаются функциональность и стиль. Создали такой вид мебели специалисты во Франции, придумав конструкцию, которая отличается своей надежностью, легкостью в использовании и простотой. Такие черты и сделали такой предмет мебели популярным и во многих гостиных вместо габаритных моделей красуется компактный и комфортный диван клик кляк.

Такой механизм является улучшенной и осовремененной версией механизма “книжка”, но с тем отличием, что книжка имеет всего два положения, а клик кляк — три:

  1. Лежа. Диван превращается в большое и комфортное спальное место.
  2. Сидя. Традиционно расположенный диван. Удобное место для отдыха перед телевизором, чтения книги и беседы с друзьями.
  3. Полусидя. Спинку дивана можно расположить под углом 45 градусов, что обеспечивает удобное расположение для спины и шеи, и способствует отдыху мышц в этих участках.

Существуют также изделия, которые позволяют изменять положение боковых частей, выбирая самое комфортное. Это делает возможным менять позицию подлокотников в положении сидя и приподнимать подголовник, если Вы превратили диван в спальное место, что делает его использование еще более удобным.

Как разложить диван клик кляк

Рассмотрим, как раскладывается диван клик кляк. Разлаживание его происходит очень легко: чтобы изменить положение и превратить диван в кровать, нужно приподнять сидение вверх до того момента, пока Вы не услышите характерный щелчок — это будет означать, что сиденье зафиксировалось в выбранном положении. Затем его нужно опустить. Рекомендуется оставлять лишнее пространство за мебелью, когда она находится в сложенном положение — это позволит не передвигать его постоянно, если Вы будете его часто раскладывать. Ширина спального места клик кляк ничем не уступает обычной кровати.

Как же собрать диван клик кляк, спросите Вы. Также просто, как и разложить. Все действия нужно произвести в обратном порядке. Главное — это не делать резких движений, а действовать плавно и мягко. Таким образом вы сможете продлить срок эксплуатации этого предмета мебели.

В случае, если Вы хотите расположить изделие в положении сидя, нужно не опускать спинку до самого конца, а дождавшись щелчка, зафиксировать его в нужном положении. Такой наклон спинки способствует полной релаксации и является подходящим положением для позвоночника. Механизм клик кляк соединяет в себе самые нужные положения для полноценного отдыха.

Советы по правильному использованию дивана клик кляк

Чтобы Ваша мебель прослужила Вам верой и правдой долгие годы и сохранила все свои функции, за ним, как и за любым другим механизмом, нужно ухаживать:

  1. Хорошо смазывайте механизм трансформации, ведь часто именно он приводит к поломке дивана.
  2. Используйте только масла фабричного производства и не забывайте обрабатывать каждую из шин.
  3. Если вдруг произошла поломка в механизме и его нужно заменить, то рекомендовано заменять все части — это позволит изделию прослужить дольше.
  4. Старайтесь следить за диваном в процессе складывания, прислушивайтесь к его звукам. Характерный щелчок должен быть слышим с двух сторон, если он доносится только с одной, то механизм работает неисправно. На это нужно обращать внимание, так как неисправность одной стороны означает, что она не способна выдержать нужные нагрузки.
  5. При трансформации старайтесь действовать аккуратно и плавно. При правильном использовании такая мебель прослужит Вам дольше.

Преимущества дивана клик кляк

Поклонники дивана с механизмом клик кляк отмечают такие его преимущества:

  1. Вы можете выбрать одно из трех положений, что делает это изделие практичным для использования.
  2. При условиях правильного использования мебели, эта софа сможет прослужить более 10 лет.
  3. Клик кляк предоставляет ровное и комфортное спальное место, на котором могут разместиться два человека.
  4. Наличие удобной ниши для хранения постельного белья и других вещей.
  5. Этот предмет мебели легок в уходе. Чехлы на диван и подушки можно без труда постирать в стиральной машине.
  6. Прочный каркас, изготовленный из стали, обеспечивает надежную конструкцию.

Как правильно выбрать диван клик кляк

  1. Осмотрев мебель внешне, обязательно проверьте его на практике. Посидите на нем и даже прилягте. Консультанты не должны Вам противоречить, ведь Вы пытаетесь найти модель, которая будет отвечать всем Вашим запросам и комфорт является одним из самых важных из них.
  2. Упругое сиденье и плотная обивка сразу говорят о хорошем качестве предмета мебели. У софы должна быть удобная опора для головы и место для сидения должно иметь небольшой наклон.
  3. Проверьте механизм трансформации, разложив и сложив диван несколько раз. Разложив его в спальное место, полежите на кровати и проверьте ее ровность.
  4. Задняя часть должна быть изготовлена из ткани высокого качества. Можно приобрести дополнительные чехлы.
  5. Хорошей обивкой считается тефлоновая, но она относительно дорогостоящая. Такая обивка почти не загрязняется, да и следы от пролитых напитков ей не страшны. Самыми популярными тканями для обивочного материала считают: кожу и ее хороший заменитель, жаккард, гобелен, велюр, флок и шинил.
  6. Перед покупкой измерьте место, которое Вы планируете использовать для дивана и в магазине измерьте саму модель.
  7. Посмотрите варианты, которые предлагают в интернете и выберете понравившийся дизайн.
  8. Цвет и дизайн Вашей софы стоит выбирать отталкиваясь от общей цветовой гаммы и стиля комнаты.

Какой диван выбрать, решать только Вам. Но мы надеемся, что наша статья смогла Вас убедить, что вариант клик кляк сможет стать отличным выбором.

плюсы и минусы, как раскладывается, особенности

Диваны с механизмом клик-кляк – практичны и комфортны в применении. Именно поэтому они востребованы среди потребителей. Механическая конструкция оснащена фурнитурой, которая обеспечивает удобство трансформации. При этом цена на мягкую мебель остается доступной.

Механизм клик-кляк получил свое наименование благодаря щелчкам, которые он производит при трансформации. Его придумал французский специалист, который хотел создать упрощенную конструкцию комфортную в эксплуатации. В дальнейшем мебель с механизмом клик-кляк начала вытеснять обиходе габаритные модели.

Как раскладывается диван с механизмом клик кляк

Конструкция обеспечивает несколько положений спинки:

  • «кровать», которая представляет собой комфортное место для сна;
  • «диван» для расслабленного отдыха;
  • «релакс» для снятия накопившейся усталости, когда спинка закреплена под углом 45 градусов.

Отдельные изделия предполагают изменения положений подголовника и подлокотника, что делает их еще удобнее в эксплуатации. Мебель с этим механизмом комфортная и отлично подходит к разным дизайнерским решениям в интерьере. Перед первым раскладыванием специалисты рекомендуют изучить инструкцию по использованию изделия. Правильное обращение обеспечит долгую службу, которая подарит владельцу исключительно положительные эмоции.

Преимущества и недостатки механизма клик-кляк

Диваны с механизмом клик-кляк не только удобны в использовании. Такая мебель имеет и иные преимущества:

  1. Современное дизайнерское оформление. Это обеспечивает привлекательный внешний вид, который подойдет для любой обстановки.
  2. Продолжительный период эксплуатации. Базовые детали изделий изготовлены из прочного материала, поэтому они выдерживают нагрузки многие годы.
  3. Простая трансформация. Разложить диван можно без чрезмерных усилий.
  4. Ровная поверхность для сна. Трансформированный диван является комфортным место для сна без перепадов на поверхности, которое отлично подходит для отдыха.
  5. Изделие обеспечено специализированным каркасом с пружинными блоками и повышенными ортопедическими свойствами
  6. В сложенном состоянии мебель можно с легкостью установить в желаемом месте. Стандартное размещение около стены не требуется.
  7. В мебели с механизмом клик-кляк предусмотрены специальные ящики для хранения.

Среди недостатков таких изделий выделяют особенности установки: между стеной и спинкой дивана требуется немного пространства. Это необходимо для того, чтобы раскладывать и складывать его. Иначе трансформация потребует сдвинуть изделие, что также неудобно. Помимо того, отмечают, что в разложенном состоянии мебель клик-кляк достаточно громоздкая.

Особенности эксплуатации механизма клик кляк

Устройство механизма клик-кляк напоминает популярную «книжку», когда конструкция закреплена к каркасу из стали болтами либо шурупами. Сегодня существуют модификации, которые снабжены специальными фиксирующими устройствами для того чтобы регулировать положение подлокотников. Сейчас процедура трансформации мебели с механизмом клик-кляк происходит по следующей схеме:

  1. Сидение необходимо слегка приподнять за край и подтянуть вверх до щелчка.
  2. Затем нижнюю часть следует вернуть на место. В этот момент спинку вытянуть за сидение в горизонтальное положение.
  3. В результате образуется ровное место для сна.
  4. Если требуется, то спинку можно приподнять и установить в полусидящее положение.

Важно помнить, что механизм клик-кляк приходит в негодность при неправильном использовании: неполном защелкивании затвора. Потому процедуру раскладывания изделия требуется проводить без чрезмерных усилий.

Виды мягкой мебели с механизмом клик-кляк

Диваны и кресла, оснащенные конструкцией клик-кляк выпускают в нескольких вариациях:

  1. Прямые.

Самый популярный вид. Их могут применять как односпальное изделие-трансформер. Для этого типа характерен простое оформление и конструкция, а также широкий размерный ряд.

  1. Угловые.

В сложенном состоянии это крупногабаритное изделие для отдыха. В разложенном виде это полноценное место для сна двух человек.

  1. Со специальными ящиками для белья.

Такая модель позволяет решить сразу несколько проблем. Владелец получает не только место для сна, но и организованное пространство для хранения вещей.

  1. С регулируемыми подлокотниками.

Это современная модель, позволяющая обеспечить повышенный комфорт. Боковые детали этого изделия могут двигаться под наклоном и в высоту.

Диваны клик-кляк – распространенные модели, которые востребованы среди потребителей. Популярность таких изделий обусловлена особенностями. Конструкция проста в использовании, имеет доступную стоимость и комфортна в эксплуатации. А множество разновидностей помогут каждому желающему подобрать подходящий вариант.

Диван клик-кляк — принципы работы механизма

Такой предмет мебели, как диван давно уже стал неотъемлемой частью интерьера каждой квартиры. В одних он занимает почетное место в гостиной, в других он заменяет собой кровать, а в третьих стоит на просторной кухне, служа своеобразным уголком уюта или домашнего чаепития. Современные технологии производства мебели уже шагнули далеко вперед, что привело к масштабному изобилию выбора, среди которого несложно растеряться. В статье мы расскажем о наиболее востребованной и популярной разновидности дивана: с механизмом под несколько забавным названием “клик-кляк”. Что он из себя представляет, о каких его особенностях следует знать до покупки, и, наконец — как выбрать диван, чтобы он служил верой и правдой не один год?

Диван с механизмом “клик-кляк”

Огромное количество среднестатистических граждан выбирают диван в свою квартиру, исходя из его внешнего вида, стоимости и размера. Данный подход не совсем правильный. Чтобы купить действительно хороший и удобный диван, следует точно определиться с функциями, которые от него ожидаются.

Диваны “клик-кляк”: главные недостатки и преимущества

Модели диванов с механизмом “клик-кляк” считаются вполне доступными в своем ценовом сегменте, их большой выбор радует глаз, позволяя воплотить в реальность свои предпочтения в интерьере квартиры, но вот стать полноценной заменой двуспальной кровати они вряд ли смогут. Из этого следуют следующие минусы диванов “клик-кляк”:

  • требуют много пространства около стены для раскладывания;
  • продольная полоса посередине дивана в разложенном состоянии не позволяет почувствовать себя спящим на кровати;
  • при интенсивной эксплуатации могут несколько расшататься крепежные детали, что приводит к характерному щелкающему звуку при раскладывании дивана.

На этом все недостатки заканчиваются, и становится ясно: каждый из немногочисленных “минусов” модели дивана с механизмом “клик-кляк” напрямую связан с ее раскладыванием. Это значит, что такая модель не является лучшим выбором в качестве спального места или же замены двуспальной кровати.

Если говорить о преимуществах таких диванов, то их количество значительным образом перевешивает недостатки. К неизменным плюсам такой мебели относятся:

  • Колоссальная возможность выбора дизайна, размеров, расцветок и форм.
  • Очень длительный срок службы за счет использования производителями металлических деталей и креплений. Диваны с механизмом “клик-кляк” — чуть ли не единственные, способные эксплуатироваться более 10 лет.
  • Если не учитывать продольную складку на разложенном диване посередине, получается вполне себе ровное и просторное спальное место, без дополнительных неровностей.
  • Разные размеры позволяют подобрать диван как для небольших комнат, так и для офисных помещений. Большим преимуществом обладают съемные или регулируемые подлокотники.
  • Вместительный ящик для белья — неизменная особенность любого дивана с механизмом “клик-кляк”. В него свободно поместятся не только постельные принадлежности, но и другие объемные вещи.

Такой диван можно поставить в гостиную, на кухню или в детскую

Пожалуй, такие диваны можно смело отнести к наиболее простым способам раскладывания. Оно занимает не больше минуты, не требуя никаких дополнительных усилий в виде вытаскивания подушек и предварительного поднимания поверхностей.

Принцип работы механизма “клик-кляк”

Принцип раскладывания дивана “клик-кляк” известен всем своей простотой и представляет собой следующую очередность действий:

  1. Чтобы разложить диван, надо взяться за низ его сиденья (желательно посередине) и приподнять вверх до характерного щелчка.
  2. Затем сиденье нужно потянуть вперед. Оно послушно потянет за собой спинку дивана, образуя просторное спальное место.
  3. Большинство моделей дают возможность фиксации спинки под углом 45 градусов. Для этого достаточно поднять спинку разложенного дивана до щелчка. На таком, “полуразложенном” варианте очень удобно подремать перед телевизором или почитать книжку.

Кроме размера, расцветки и типа раскладывания существуют еще немаловажные принципы выбора дивана для своей квартиры. Это материалы изготовления и обивки. Ведь именно от них напрямую зависят длительность эксплуатации мебели и ее стоимость.

Материалы каркаса и обивки: какой выбрать?

Наиболее выносливым и практичным выбором станет совмещенный вариант: металлический каркас с днищем и ящиком из МДФ. Модели, в которых в составе указан материал ДСП лучше исключить из своего внимания вообще, даже несмотря на их доступную стоимость, срок эксплуатации никогда не превышает 3 лет. Практичным решением стане покупка дивана, днище которого выполнено в виде решетки из древесины (дуб, береза, бук): это обеспечит вентиляцию, что положительно влияет на сохранность мебели и здоровье ее владельцев.

Каркас дивана с механизмом “клик-кляк”

Очень важную роль в сохранности внешнего вида дивана играет материал обивки. Если присмотреться к нынешним каталогам мебельных производителей, то можно увидеть, что для каждого варианта используется отдельная ткань. Наиболее популярными являются:

  • Гобелен. Этот материал заслуженно относится к наиболее прочным. Он на 80% состоит из натурального хлопка, что защищает его от внешних воздействий. Минусами такой обивки считаются грубоватая шероховатость поверхности и довольно высокая цена.
  • Флок. Ткань с бархатистой на ощупь поверхностью, на 1/3 состоящая из натурального хлопка. Это предотвращает обивку от быстрого изнашивания и даже делает ее устойчивой к острым коготкам домашних питомцев.
  • Жаккард. В составе такой обивки хлопка меньше, чем у гобелена или флока, ее главная особенность: ручная работа, что объясняет высокую стоимость ткани. Устойчивая к изнашиванию и повреждениям, такая обивка дольше всех сохраняет свой первозданный вид, тем самым радуя владельцев мебели не один год.

Модель с жаккардовой обивкой

Рекомендации по выбору дивана “клик-кляк”

Бесспорно, покупаемая модель должна нравиться своим дизайном и удачно гармонировать с интерьером комнаты или даже всей квартиры. Но все же, как бы сильно не нравилась та или иная модель или же какой бы привлекательной не казалась ее стоимость, непосредственно перед покупкой всегда следует придерживаться данных рекомендаций:

  • Не нужно стесняться пристально проверять диван в торговом зале или во время доставки: разложите его пару раз, пройдитесь руками по каркасу и обивке — в механизме не должно быть никаких заеданий, а на корпусе недопустимы занозы, торчащие нитки и выглядывающий наружу набивочный материал.
  • Продавец может нахваливать наличие ортопедического матраса, умолчав при этом о значительном влиянии данной особенности дивана на его стоимость. Диван с механизмом “клик-кляк” нельзя назвать отличной альтернативой двуспальной кровати, поэтому переплачивать за особенный матрас нет смысла.
  • Если диван покупается на кухню, то можно обойтись и без подлокотников: они занимают собой значительное количество места, не представляя из себя особо важной роли в практическом смысле.

Диваны с механизмом “клик-кляк” нельзя отнести к новинкам современного производства мебели: они были невероятно популярны еще во времена СССР. На данный момент прежним остался лишь механизм раскладывания и его название, а все остальное: каркас, обивка и внешний вид подверглись изменениям. Сегодня эти модели не утратили своей популярности и по-прежнему радуют владельцев своей практичностью, красотой дизайна и долгим сроком эксплуатации.

Механизм трансформации «Клик-кляк»

В последнее время этот механизм трансформации для диванов «Клик-Клак» все больше и больше завоевывает сердца покупателей.   

Во-первых, это короб для белья, на который и устанавливается вторая и основная часть дивана – металлокаркас. На металлокаркас же в свою очередь настилаются мягкие элементы. Это может быть как пенополиуретан, так и пружинный блок. Завершающей составляющей является съемный чехол, который при загрязнении можно сдать в химчистку.

По ссылке можно посмотреть: Все диваны Клик-Кляк

По большому счету — это усовершенствованный механизм трансформации «Книжка».

В чем же его модернизация? Основная модификация — это металлокаркас. Рама металлическая с перемычками из березовых лат. Они придают дополнительную упругость спальному месту. С металлическим каркасом у мебельных инженеров появилось больше возможности для создания более удобной и практичной мебели. Появилось три рабочих положения: положение «сидя», положение «лежа» и промежуточное положение «релакс», в котором спинка дивана наполовину опущена. В таком положении Вам будет приятно расслабиться, приняв полулежащее положение. 

Дополнительный комфорт и удобство создадут четыре независимых друг от друга «уха». «Ушами» мы будем называть подлокотники дивана. Каждое «ухо» независимо от соседнего имеет четыре положения. От горизонтального – до почти вертикального. Если все «уши» мы полостью расправим до горизонтального положения, то получим достаточно большое спальное место. И так же наоборот: если «уши» полностью поднимем, то диван займет совсем немного места. Если один подлокотник немного приподнять, то он послужит Вам подголовником.

 

 

Достаточно интересными являются кресла. Они имеют точно такой же механизм, чехол и короб, как и у дивана, только меньших размеров. Такие же «уши» и ящик для белья. Раскладываются они так же, как и диваны.

 

 

 

<- все механизмы трансформации дивановЦ

определение кляпа по The Free Dictionary

Моя идея заключалась в том, чтобы как-нибудь ночью освободиться вместе с королем, затем заткнуть рот и связать нашего хозяина, переодеться с ним, превратить его в незнакомца, привязать его к цепи рабов, завладеть имуществом, маршировать Камелоту, и… «Без нескольких минут семь», — ответил герцог (подстраивая действие под слова), — «Я поднимаю корку пирога; я нахожу в нем два пониарда, веревочную лестницу и Я направляю один из пониардов в грудь Ла Рами и говорю ему: «Друг мой, мне очень жаль, но если ты пошевелишься, если ты хоть раз вскрикнешь, ты мертв!» Затем он перекатился. и заткнул ему между зубами кляп из того же материала, закрепив его полоской, намотанной на затылок жертвы.Когда я внезапно проснулся, я обнаружил, что рядом с собой полдюжины могущественных мужчин, кляп уже во рту, а через мгновение мои руки и ноги были надежно связаны. Он открыл рот, чтобы ответить отшельнику, когда рот был остановлен. и голос, задушенный сильным, мягким кляпом, внезапно обернулся вокруг его головы, как жгут. Кляп во рту не давал мне ответить, и я мог только лежать там, беспомощно кипя, пока он греб мимо острова, и его голос медленно пропадал. Годфри почувствовал, как пальцы Кристиана развязывают повязку и вытаскивают кляп.Он с изумлением посмотрел на двух респектабельных незнакомцев и еле слышно произнес: «Что это значит?» Двое респектабельных незнакомцев оглянулись и сказали: «Это именно тот вопрос, который мы собирались задать ВАМ». Любой конец его собственной линейки выступал из его выпуклых щек — середина была скрыта усами — и кляп удерживался на месте безжалостным Он хотел признаться офицеру и, отказавшись, издал такие жалкие крики, что тот сказал ему, что, если он продолжит оглушать его таким образом, ему следует заткнуть ему рот кляпом.Она часто завидовала мне и говорила, что во всем виноват взлом и кляп в Лондоне, что ее рот не так совершенен, как мой; и тогда старый сэр Оливер говорил: «Вот, вот! Мы ей заткнем рот!» и, изменив положение, поставил ногу на шею волка. Выньте кляп из ее рта и отпустите ее руки, — громко скомандовал он.

Сборка нестандартных боковых цепей протеогликанов для исследования их функции в живых клетках

Материалы

SDS, PrimeSTAR ™ HS, ДНК-полимеразы, эндонуклеаза рестрикции и другие ферменты генной инженерии были приобретены у Takara, Inc.(Далянь, Китай). Хондроитиназа ABC (EC 4.2.2.4), гепариназа I (EC 4.2.2.7) II и III (EC 4.2.2.8), HA из Streptococcus equi (15–30 кДа), Hep из слизистой оболочки кишечника свиней, HS из почек крупного рогатого скота , фосфатидилинозитол-специфическая фосфолипаза C из Bacillus cereus и авидин из яичных белков были получены от Sigma. CS-A из китового хряща и DS из свиной кожи были получены от Seikagaku Corp. (Токио, Япония). Биотин-LC-гидразид EZ-Link ™ и тетраацилированный N -азидоацетилглюкозамин (GlcNAz) были получены от Thermo Fisher Scientific.Новая GAG-эндолиаза (HCLase) из морской бактерии Vibrio sp. FC509 был приготовлен в нашей лаборатории 46 . Мышиное моноклональное антитело против GPC3 (αGCN) также было приготовлено в нашей лаборатории 47 . Вторичное козье антимышиное (IgG) антитело, конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP), было приобретено у Proteintech Group (Rosemont, USA). Кроличьи антитела против Wnt3a, кроличьи антитела против Shh, кроличьи антитела против FZD-7, вторичные антитела крысы против кроличьих (IgG), конъюгированные с Alexa Flour (IgG), конъюгированные с FITC козьи антимышиные (IgG) вторичные антитела, FITC-конъюгированный стрептавидин, Cyanine3 азид и TRITC-конъюгированный стрептавидин были получены от Abcam (Шанхай, Китай).Все остальные химические вещества и реагенты были самого высокого качества.

Клеточные линии и плазмиды

Клетки

NIh4T3 и 293T культивировали в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM), с добавлением 10% фетальной телячьей сыворотки (FBS). L-клетки, постоянно трансфицированные Wnt3a-pLNCx или пустым вектором (pLNCx) в качестве контроля, получали из Американской коллекции типовых культур и культивировали в среде DMEM, содержащей 10% FBS. Для сбора контроля или КМ Wnt3a клетки выращивали при высокой плотности в течение 4 дней.Все клеточные линии поддерживали при 37 ° C в увлажненной атмосфере с 5% CO 2 . Shh CM был получен путем трансфекции вектора экспрессии Shh в клетки 293T. Среду, содержащую 2% сыворотки, собирали на шестой день после трансфекции.

Экспрессионные векторы для GPC3, GPC3ΔGAG и Shh были описаны ранее 25,28 . Аминокислотные последовательности GPC3 от F494 до C499 и от G508 до G513 были одинарно или дважды мутированы в последовательность LCTPSR, специфически распознаваемую hFGE, для преобразования Cys в fGly, были созданы три мутанта: GPC3-S495C и GPC3-S509C с одной альдегидной меткой. на Cys495 или Cys509, соответственно, и GPC3-O, несущий две альдегидные метки на обоих сайтах.Эти три мутанта GPC3 индивидуально вставляли в вектор экспрессии pCMV6XL4. Полноразмерный ген hFGE был синтезирован и вставлен в вектор экспрессии pcDNA3.1a (+) компанией Genewiz, Inc. (Сучжоу, Китай).

Вестерн-блоттинг

Трансфицированные клетки 293T лизировали в течение 30 мин на льду с использованием буфера для лизиса, содержащего 100 мкМ Mes, 0,1% SDS, 0,01% Triton X-100 и ингибиторы протеаз (2 мМ фенилметилсульфонилфторид, 10 мкг / мл леупептина. , и 10 мкг / мл апротинина) (pH 5.5). Затем к клеточному лизату добавляли меченные гидразидом олигосахариды GAG (HaGAG) и инкубировали при комнатной температуре в течение 4 часов. Пробы белков разделяли электрофорезом в SDS-полиакриламидном геле (PAGE) на 8% геле и затем переносили на поливинилидендифторидную (PVDF) мембрану (Millipore, США). Мембраны блокировали блокирующим буфером (50 мМ Tris-HCl, 150 мМ NaCl, 0,1% Tween 20 и 5% обезжиренное молоко, pH 8,0) в течение 1 ч при комнатной температуре, а затем инкубировали с 1 мкг / мл αGCN в течение ночи при температуре окружающей среды. 4 ° С.После инкубации с конъюгированным с HRP вторичным антителом против IgG мыши в течение 1 ч полосы белка детектировали с использованием реагентов с усиленной хемилюминесценцией (Proteintech Group, Inc.). Эффективность конъюгации сахаридных цепей с коровыми белками определяли путем анализа относительной интенсивности соответствующих полос с использованием программного обеспечения ImageJ (Национальные институты здравоохранения).

Для подтверждения связывания олигосахаридов HaGAG с мутантами GPC3, экспрессируемыми на поверхности клетки, клетки 293T трансфицировали мутантом GPC3 и вектором экспрессии hFGE (2: 1 вес / вес).Через два дня после трансфекции в среду добавляли олигосахаридные цепи HaGAG (конечная концентрация 1 мкМ) (pH доведен до 6,0) на 4 часа. Затем клетки лизировали буфером для лизиса и анализировали с помощью WB, как описано выше. Чтобы лучше показать конъюгацию олигосахаридов HaGAG с коровыми белками GPC3, мы использовали DEAE-сефарозу для концентрирования отрицательно заряженных PG с цепями HS в клеточном лизате. Вкратце, шарики DEAE-сефарозы добавляли к клеточному лизату и инкубировали при 4 ° C в течение 4 часов, шарики промывали 0.2 M NaCl в 50 мМ NaH 2 PO 4 –Na 2 HPO 4 (pH 6,0), а затем связанный материал элюировали 2 M NaCl в 50 мМ NaH 2 PO 4 –Na 2 HPO 4 (pH 6,0). Для выделения GPC3 с клеточной поверхности клетки дважды промывали фосфатно-солевым буфером (PBS), затем инкубировали с фосфатидилинозитол-специфической фосфолипазой C в течение 1 ч при 37 ° C, и после центрифугирования супернатант, содержащий GPC3 с поверхности клеток, собирали и анализировали с помощью WB. как описано выше.

Оценка включения олигосахаридных цепей HaGAG в живые клетки

Клетки высевали на обработанные поли-l-лизином покровные стекла и трансфицировали вектором GPC3-O или контрольным вектором и вектором hFGE. Через два дня после трансфекции олигосахаридные цепи bioHaGAG добавляли к среде DMEM (pH доводили до 6,0) и инкубировали в течение 4 часов. Затем клетки фиксировали 4% параформальдегидом в PBS в течение 20 мин и блокировали 5% обезжиренным сухим молоком в PBS (блокирующий буфер) в течение еще одного часа.После блокирования цепи GPC3 и bioHaGAG на поверхности клетки были обнаружены с использованием αGCN с FITC-конъюгированным вторичным антителом против IgG мыши и TRITC-конъюгированным стрептавидином, соответственно. Клетки промывали трижды PBS после каждого этапа. Для оценки конъюгации между bioHaHS и AhGPC3 клетки HEK 293T высевали на 24-луночные планшеты и котрансфицировали GPC3-O или контрольным вектором и вектором hFGE. Через два дня после трансфекции клетки инкубировали с или без bioHaGAG в течение 4 часов в среде DMEM (pH доведен до 6.0). Клетки суспендировали, собирали, промывали, блокировали 5% обезжиренным сухим молоком в PBS и инкубировали со стрептавидином, конъюгированным с FITC, в течение 1 ч на льду в темноте. Наконец, клетки дважды промывали PBS и анализировали на проточном цитометре Backman FC500. Каждый эксперимент проводился трижды в трех повторностях.

Анализ репортера Wnt3a

Клетки высевали на 24-луночные планшеты и котрансфицировали указанными векторами экспрессии, репортерной плазмидой люциферазы, управляемой промотором TOPFLASH, который содержал несколько TCF / β-катенин-чувствительных элементов 48 , и вектор экспрессии β-галактозидазы.Трансфекцию проводили с использованием Lipofectamine 3000 (Invitrogen). Через 24 часа после трансфекции в среду добавляли олигосахариды HaGAG или олигосахариды GAG без гидразидных меток (pH доводили до 6,0) в течение 4 часов и клетки инкубировали еще 24 часа с L или Wnt3a CM. Наконец, клетки лизировали и измеряли активность люциферазы в соответствии с протоколом системы анализа репортерных генов neolite (PerkinElmer). Эффективность трансфекции нормализовали путем измерения активности β-галактозидазы.Каждый эксперимент проводился не менее трех раз в трех повторностях.

Анализ связывания между собранными GPC3 и Wnt3a

Клетки HEK 293T высевали на шестилуночные планшеты и котрансфицировали вектором GPC3-O или контрольным вектором и вектором hFGE (2: 1 вес / вес). Через день после трансфекции к новой среде добавляли олигосахариды HaHS (pH доводили до 6,0) до конечной концентрации 1 мкМ. После инкубации в течение ночи клетки лизировали с использованием буфера для лизиса RIPA, содержащего ингибиторы протеаз (2 мМ фенилметилсульфонилфторид, 10 мкг / мл лейпептина, 10 мкг / мл апротинина) в течение 30 минут на льду.Для анализа связывания 96-луночный планшет покрывали mAb GPC3 (aGCN) (0,4 мкг / лунку) при 4 ° C в течение ночи. После блокирования блокирующим буфером (5% обезжиренное молоко в PBS) в каждую лунку добавляли соответственно разбавленные лизаты клеток и инкубировали при комнатной температуре в течение 2 часов, а затем планшеты инкубировали с L или Wnt3a CM при комнатной температуре в течение еще 2 часов. . Затем каждую лунку трижды промывали PBST (забуференный фосфатом физиологический раствор с Tween 20) для удаления любого неспецифического связывания. Наконец, связанный Wnt3a детектировали с использованием кроличьих антител против Wnt3a с последующей инкубацией с конъюгированным с HRP козьим антителом против кроличьего IgG и 3,3 ‘, 5,5 -тетраметилбензидином (TMB) в качестве субстрата.

Анализ Hh-репортера

Клетки NIh4T3 помещали в шестилуночные планшеты и котрансфицировали вектором Hh-репортером, вектором экспрессии β-галактозидазы и указанными векторами экспрессии с использованием липофектамина 3000 (Invitrogen). Через 24 часа после трансфекции клетки переносили в 24-луночные планшеты при 50% конфлюэнтности, и на следующий день в среду добавляли олигосахариды HaGAG или олигосахариды GAG без гидразиновых меток (pH доводили до 6,0) до конечной концентрации 1 мкМ и инкубировали при 37 ° C в течение 4 часов.Затем добавляли Shh CM или контрольную CM и клетки инкубировали еще 48 часов. Наконец, клетки лизировали, и активность люциферазы измеряли и нормализовали с помощью соответствующей активности β-галактозидазы. Каждый эксперимент проводился не менее трех раз в трех повторностях.

Связывание факторов роста с поверхностью клетки

Клетки высевали на обработанные поли-1-лизином покровные стекла и трансфицировали вектором GPC3-O или контрольным вектором и вектором hFGE. Через два дня после трансфекции в среду добавляли олигосахариды bioHaGAG (pH доводили до 6.0) в течение 4 ч. Затем клетки инкубировали с ледяной DMEM, содержащей 20 мМ HEPES pH 7,4 и 0,1% бычий сывороточный альбумин, в течение 1 ч при 4 ° C. Затем клетки обрабатывали Wnt3a, или Shh, или контрольным CM в течение еще одного часа при той же температуре. Для оценки связывания с клеточной поверхностью несвязанный лиганд удаляли трехкратной промывкой ледяным PBS и клетки фиксировали 4% параформальдегидом в PBS в течение 20 минут. Для иммуноокрашивания клетки блокировали 5% обезжиренным сухим молоком в PBS (блокирующий буфер) в течение еще одного часа.После блокирования олигосахариды Wnt3a, GPC3, Shh и bioHaGAG были обнаружены кроличьими антителами против Wnt3a и крысиными антителами против кроликов, конъюгированными с Alexa Flour 405, антителами αGCN и вторичными антителами против IgG мыши, конъюгированными с FITC. кроличьи антитела против Shh и крысиные антитела против кроликов, конъюгированные с Alexa Flour 405, и стрептавидин, конъюгированный с TRITC, соответственно. Клетки промывали трижды PBS после каждого этапа инкубации для удаления неспецифических взаимодействий. Анализ изображений был выполнен с использованием программы ImageJ (Национальные институты здравоохранения), как сообщалось ранее 49 .Короче говоря, маска, которая была построена путем ручного выделения клеток на изображении для измерения интенсивности флуоресценции. Средняя интенсивность флуоресценции других областей клетки была получена путем измерения нескольких репрезентативных областей путем перемещения маски. Интенсивности флуоресценции, соответствующие Wnt3a или Shh, вычисляли после вычитания фоновой флуоресценции. Интенсивность окрашивания Wnt3a или Shh, связанного с поверхностью указанных клеток, показана в виде относительных значений по сравнению с таковой для клеток, экспрессирующих GPC3 дикого типа.

Анализ взаимодействия для GPC3 и FZD-7

Клетки HEK 293T высевали на 10-см планшеты и котрансфицировали вектором GPC3-O или контрольным вектором, вектором hFGE и вектором FZD-7 (2: 1: 2 мас. / Мас. / Мас.). Через день после трансфекции GlcNAz добавляли в супернатант культуры до конечной концентрации 40 мкМ. Через двадцать четыре часа цепи alkyneHaHS DP14 и GlcNAz были добавлены в новую среду (pH доведен до 6,0) при конечных концентрациях 1 мкМ и 40 мкМ соответственно. После инкубации в течение ночи проводили щелчок-реакцию следующим образом: клетки инкубировали с PBS, содержащим 250 мМ трис (бензилтриазолилметил) амин, 50 мМ CuSO 4 и 500 мМ натриевую соль 1-аскорбиновой кислоты (SA) в течение 2 часов. при комнатной температуре 50 .Затем клетки лизировали с использованием буфера для лизиса RIPA, содержащего ингибиторы протеаз (2 мМ фенилметилсульфонилфторид, 10 мкг / мл лейпептина, 10 мкг / мл апротинина) в течение 30 минут на льду.

Для анализа связывания 96-луночный планшет покрывали mAb GPC3 (aGCN) (0,4 мкг / лунку) при 4 ° C в течение ночи. После блокирования блокирующим буфером (5% обезжиренное молоко в PBS) в каждую лунку добавляли соответствующие разбавленные лизаты клеток и инкубировали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем каждую лунку трижды промывали PBST, содержащим 1 М NaCl, для удаления любого неспецифического связывания.Наконец, связанный FZD-7 детектировали с использованием кроличьего антитела против FZD-7, после чего следовала инкубация с конъюгированным с HRP крысиным антителом против кроличьего IgG и TMB в качестве субстрата.

Для анализа WB образцы белка разделяли с помощью SDS-PAGE на 8% геле и переносили на PVDF-мембрану. Мембраны блокировали блокирующим буфером в течение 1 ч при комнатной температуре, а затем инкубировали с кроличьими антителами αGCN или FZD-7 в течение ночи при 4 ° C. После инкубации с соответствующими вторичными антителами HRP в течение 1 ч полосы белка детектировали с использованием реагентов с усиленной хемилюминесценцией (Proteintech Group, Inc.).

Статистика

Статистический анализ проводился с использованием Origin 8.0. Каждый эксперимент проводился не менее трех раз по трижды. Планки погрешностей представляют собой средние значения трех повторностей ± стандартное отклонение. Для сравнения статистических различий между двумя группами был проведен тест Стьюдента t (двусторонний) после сравнения дисперсий набора данных с помощью F-критерия.

Сводка отчетов

Дополнительная информация о дизайне исследования доступна в Сводке отчетов по исследованиям природы, связанной с этой статьей.

Анализ

GAG-специфической эндогликозидазы с использованием 35S-меченных протеогликанов: R&D Systems

Cheryl M. Ethen, Miranda Machacek, Brittany Prather, & Zhengliang L. Wu

РЕФЕРАТ

Гликозаминогликаны (ГАГ) представляют собой линейные аминополисахариды, обнаруженные во внеклеточном матриксе и на клеточной мембране. Они включают гепарансульфат (HS), гепарин, хондроитинсульфат (CS), дерматансульфат, кератансульфат и гиалуронан (HA). Большинство ГАГ существуют как компоненты функциональных протеогликанов (PG).ГАГ играют роль во многих клеточных событиях, включая рост, миграцию и передачу сигналов посредством взаимодействия с различными факторами роста, цитокинами и другими белками внеклеточного матрикса. Регуляция синтеза и деградации ГАГ важна для этих связанных клеточных событий. У млекопитающих деградация GAG осуществляется GAG-специфическими эндогликозидазами. Например, HS разлагается гепараназой (HSPE), HA разлагается молекулой адгезии сперматозоидов 1 (SPAM1) и гиалуронидазой 1 (HYAL1), а CS разлагается гиалуронидазой 4 (HYAL4).Эти ферменты являются ключом к нашему пониманию деградации ГАГ и последующих клеточных событий. Однако, в отличие от бактериальных GAG-специфических лиаз, продукты этих ферментов не поглощают УФ-излучение, что создает большие проблемы для изучения этих ферментов.

Здесь мы описываем новый ферментативный анализ GAG-эндогликозидаз млекопитающих с использованием 35 S-меченных рекомбинантных PG. PG, которые содержат субстраты GAG, сначала радиоактивно метят 35 S с использованием рекомбинантных сульфотрансфераз, а затем меченые субстраты обрабатывают эндогликозидазами GAG.Реакции разделяют с помощью SDS-PAGE. Гели сушат и получают радиоизображения. Этот метод позволяет визуально наблюдать за развитием ферментативной реакции. Учитывая высокую чувствительность метки радиоизотопов, можно определить нанограммовые уровни разложения ГАГ. Например, HSPE анализируют с использованием рекомбинантного синдекана-4 в качестве субстрата, HYAL4 человека анализируют с использованием серглицина в качестве субстрата, а бычий SPAM1 анализируют с использованием рекомбинантного серглицина и нейрокана в качестве субстратов.

ВВЕДЕНИЕ

  • ГАГ представляют собой линейные аминополисахариды, которые обычно ковалентно присоединены к белковой единице PG, присутствующей во внеклеточном матриксе и на клеточных мембранах. ГАГ включают CS, HS, гепарин, дерматансульфат, кератансульфат и HA.
  • ГАГ взаимодействуют с факторами роста, цитокинами и белками внеклеточного матрикса для регулирования роста клеток, миграции и передачи сигналов и, как известно, участвуют в многочисленных заболеваниях, включая мукополисахаридозы, макулярную дистрофию роговицы, остеоартрит, наследственные множественные экзостозы и инфекцию простого герпеса.
    • Синтез и разложение
  • GAG имеют решающее значение для правильного функционирования клеток. GAG разлагаются GAG-специфическими эндогликозидазами, такими как HSPE, SPAM1 и HYAL4.
  • HSPE является основной эндогликозидазой, которая расщепляет HS in vivo , позволяя перестраивать внеклеточный матрикс для движения клеток. Во многих линиях раковых клеток повышенный метастатический потенциал соответствует повышенной активности HPSE, таким образом, HPSE является потенциальной мишенью для лечения рака.
  • SPAM1, также называемый PH-20, представляет собой гиалуронидазу, которая расщепляет HA, главный структурный гликозаминогликан, обнаруженный во внеклеточном матриксе и базальных мембранах, во время оплодотворения.SPAM1 также переваривает протеогликаны CS.
  • HYAL4 переваривает CS; однако, в отличие от других членов семейства гиалуронидаз, он имеет незначительную активность в отношении HA.
Аналитическая реакция
Процедуры анализа
ШАГ 1. Добавьте PAP 35 S и сульфотрансферазу к образцу в буфере для мечения сульфотрансферазы при 37 ºC в течение 20 минут для мечения протеогликана.
ШАГ 2. Добавьте интересующую эндогликозидазу к образцу в буфере для переваривания при 37 ºC в течение 20 минут для переваривания протеогликана.
ШАГ 3. Отделите образцы с помощью SDS-PAGE в течение 30 минут.
ШАГ 4. Высушите гель и экспонируйте на рентгеновской пленке.
ШАГ 5. Вырежьте горячие точки на геле и посчитайте их сцинтилляционным счетчиком.

Буфер для электрофореза: 40 мМ Трис, pH 8,0, 40 мМ уксусная кислота, 1 мМ ЭДТА

Анализ HPSE
РИСУНОК 1. ( A ) 10 мкг рекомбинантного человеческого синдекана-4 (№ по каталогу 2918-SD) сульфатировали с использованием 0.По 5 мкг каждого из рекомбинантного человеческого HS3ST1 (№ по каталогу 5968-ST), рекомбинантного человеческого NDST1 (№ по каталогу 5967-ST) или рекомбинантного человеческого HS6ST1 (№ по каталогу 5057-ST). Впоследствии 2 мкг 35 S-меченного Syndecan-4 переваривали 1 мкг HPSE. И непереваренные, и переваренные образцы разделяли с помощью SDS-PAGE. Синдекан-4, меченный HS3ST1, был выбран для использования в последующих анализах HPSE. ( B ) Увеличивающееся количество 35 S-меченного Syndecan-4 инкубировали с 1 мкг HPSE.( C ) Радиоактивность горячих точек, соответствующих высвободившемуся HS на (B), была нанесена на график в зависимости от ввода Синедана-4. Была получена прямая линия, предполагающая реакцию первого порядка скорости. ( D ) 0,2 мкг 35 S-меченного Syndecan-4 расщепляли возрастающими количествами HPSE. ( E ) Процент высвобожденной радиоактивности в ( D ) наносили на график в зависимости от ввода HPSE. Приблизительно 10 нг HPSE достаточно для высвобождения 50% HS, меченного 35 S, из Syndecan-4.

Буфер для мечения сульфотрансферазы: 12,5 мМ MES, 0,25% Triton ® X-100, 1,25 мМ MgCl 2 , 1,25 мМ MnCl 2 , 0,625 мМ CaCl 2 , pH 7,0
Буфер для расщепления HPSE: 50 мМ цитрат, 0,1% Triton X-100, 0,6 мМ MgCl 2 , 0,6 мМ MnCl 2 , 0,8 мМ CaCl 2 , 0,2 мг / мл БСА, pH 4,0

Анализ SPAM1
РИСУНОК 2. ( A ) 1 мкг рекомбинантного мышиного серглицина сульфатировали с использованием 0,5 мкг рекомбинантного мышиного CHST3 (Каталожный № 5356-ST), а затем расщепляли возрастающими количествами рекомбинантного бычьего SPAM1 (Каталожный № 6436-GH). ( B ) Процент высвобожденной радиоактивности в ( A ) наносили на график в зависимости от ввода SPAM1. ( C ) 1 мкг рекомбинантного мышиного нейрокана (№ по каталогу 5800-NC) сульфатировали с использованием 0,5 мкг CHST3, а затем переваривали с увеличивающимся количеством SPAM1.( D ) Процент высвобожденной радиоактивности в ( C ) наносили на график в зависимости от ввода SPAM1. Приблизительно 1,5 нг SPAM1 достаточно для высвобождения 50% меченного 35 S CS из серглицина и нейрокана.

Буфер для разложения SPAM1: 100 мМ NaOAc, pH 5,5

Анализ HYAL4
РИСУНОК 3. ( A ) 1 мкг серглицина, меченного 35 S, расщепляли возрастающими количествами рекомбинантного человеческого HYAL4 (Каталожный № 6904-GH).( B ) Процент высвобожденной радиоактивности в ( A ) наносили на график в зависимости от ввода HYAL4. Примерно 50 нг HYAL4 достаточно для высвобождения 50% 35 S-меченного CS из серглицина.

Буфер для разложения HYAL4: 100 мМ NaOAc, pH 4,5

ВЫВОДЫ

  • 35 S-меченные протеогликаны являются хорошими субстратами для GAG-специфичных эндогликозидаз.
  • Все изученные GAG-специфические эндогликозидазы следовали типичной кинетике Михаэлиса-Ментен.
  • Используя этот новый ферментативный анализ, было показано, что HYAL4 разлагает хондроитинсульфат.

Только для исследовательских целей. Не использовать в диагностических процедурах.

Нажмите здесь, чтобы загрузить PDF-файл (6 МБ)

Экспериментальное исследование контроля рвотного рефлекса с помощью закиси азота

Anesth Prog. Июль-август 1988 года; 35 (4): 155–157.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Рвотные движения представляют собой проблему управления во время стоматологических процедур.В контролируемом двойном слепом эксперименте на людях-добровольцах оценивалась эффективность закиси азота для подавления рвоты, вызванной экспериментом. Способность субъектов переносить небную и ротоглоточную стимуляцию оценивали путем измерения расстояния между анатомической небной и ротоглоточной структурой, которые вызывают рвоту. Было замечено, что при ингаляции N 2 O / O 2 субъекты переносили значительно более интрузивную (более глубокую) стимуляцию ротоглотки, чем в контрольных условиях.

Полный текст

Полный текст доступен в виде отсканированной копии оригинальной печатной версии. Получите копию для печати (файл PDF) полной статьи (387K) или щелкните изображение страницы ниже, чтобы просмотреть страницу за страницей. Ссылки на PubMed также доступны для Избранные ссылки .

Избранные ссылки

Эти ссылки находятся в PubMed. Это может быть не полный список ссылок из этой статьи.

  • Конни Ди-джей, Тедеско, Лос-Анджелес.Проблема рвоты при протезировании. Часть I: описание и причины. J Prosthet Dent. 1983 Май; 49 (5): 601–606. [PubMed] [Google Scholar]
  • Конни Ди-джей, Тедеско, Лос-Анджелес. Проблема рвоты при протезировании. Часть II: Ведение пациентов. J Prosthet Dent. 1983 июн; 49 (6): 757–761. [PubMed] [Google Scholar]
  • Райт С.М. Рентгенологическая анатомия пациентов, у которых рвут зубными протезами. J Prosthet Dent. 1981 Февраль; 45 (2): 127–133. [PubMed] [Google Scholar]
  • Дэвис DJ. Решение проблемы рвоты при съемном протезировании.J Mo Dent Assoc. 1982 Май-июнь; 62 (3): 34–37. [PubMed] [Google Scholar]
  • Kramer RB, Braham RL. Лечение хронического или истерического рвотного синдрома. ASDC J Dent Child. 1977, март-апрель; 44 (2): 111–116. [PubMed] [Google Scholar]
  • Райт С.М. Медицинский анамнез, социальные привычки и индивидуальный опыт пациентов, которым давятся зубные протезы. J Prosthet Dent. 1981 Май; 45 (5): 474–478. [PubMed] [Google Scholar]
  • GRACE LE, HACKNEY RD, DOBBS EC. Клиническая оценка триметобензамида (Тиган) как противозачаточного средства.Oral Surg Oral Med Oral Pathol. 1963 апр; 16: 422–425. [PubMed] [Google Scholar]
  • Розен М. Контроль рвоты путем внушения и седации закисью азота — отчет о болезни. J Dent Assoc S Afr. 1981 сентябрь; 36 (9): 619–621. [PubMed] [Google Scholar]
  • Клепак Р.К., Хауге Г., Доулинг Дж. Лечение гиперактивного рвотного рефлекса: два случая. J Behav Ther Exp Psychiatry. 1982 июн; 13 (2): 141–144. [PubMed] [Google Scholar]

Здесь представлены статьи из журнала Anesthesia Progress, любезно предоставленные Американским стоматологическим обществом анестезиологов

GAG-DB, Новый интерфейс трехмерного ландшафта гликозаминогликанов — Centre de recherches sur лесные макромолекулы

Гликозаминогликаны (ГАГ) представляют собой сложные линейные полисахариды.GAG-DB — это тщательно подобранная база данных, которая классифицирует трехмерные характеристики шести GAG млекопитающих (хондроитинсульфат, дерматансульфат, гепарин, гепарансульфат, гиалуронан и кератансульфат) и их олигосахаридов в комплексе с белками. GAG-DB предоставляет подробную информацию о GAG, связанных с ними белковых лигандах и особенности их взаимодействия с использованием нескольких приложений с открытым доступом. Связывание охватывает взаимодействия между моносахаридами и моносахаридными единицами белка и оценку четвертичной структуры.Щелкните заголовок для получения дополнительной информации.

Резюме:
«Гликозаминогликаны (ГАГ) — сложные линейные полисахариды. GAG-DB — это тщательно подобранная база данных, которая классифицирует трехмерные характеристики шести GAG млекопитающих (хондроитинсульфат, дерматансульфат, гепарин, гепарансульфат, гиалуронан и кератансульфат) и их олигосахаридов в комплексе с белками. Записи представляют собой структуры GAG и комплексов GAG-белок, определенные методами дифракции рентгеновских лучей на монокристаллах, волоконной рентгеновской дифрактометрией, спектроскопией ЯМР в растворе и данные рассеяния, часто связанные с молекулярным моделированием.Мы разработали архитектуру базы данных и инструменты навигации для запросов к базе данных с идентификаторами Protein Data Bank (PDB), UniProtKB и GlyTouCan (универсальный репозиторий гликанов). Особое внимание было уделено описанию связанных гликановых лигандов с использованием простого графического представления и числового формата для перекрестных ссылок на другие базы данных в гликологических и функциональных данных. GAG-DB предоставляет подробную информацию о GAG, связанных с ними белковых лигандах и особенности их взаимодействия с использованием нескольких приложений с открытым доступом.Связывание охватывает взаимодействия между моносахаридами и моносахаридными единицами белка и оценку четвертичной структуры. GAG-DB находится в свободном доступе »

Статья доступна здесь, а GAG-DB находится в свободном доступе здесь.

07 октября 2021 г. номинал admin_polynat

03 сентября 2021 номинал admin_polynat

27 августа 2021 г. номинал admin_polynat

Warner & Kaine выступила спонсором двухпартийного законодательства о безвозвратной отмене правила о глобальном затыке

ВАШИНГТОН — Через день после того, как президент Трамп издал указ о восстановлении правила глобального затыкания, США.Сенатор-сенатор Марк Уорнер и Тим Кейн (оба D-VA) присоединились к сенаторам Jeanne Shaheen (D-NH), Susan Collins (R-ME) и 39 другим сенаторам, чтобы представить Global Health, Empowerment, and Rights ( HER) Закон , который навсегда отменяет вредную политику.

Глобальное правило кляпов, также известное как Политика Мехико, запрещает иностранным неправительственным организациям, получающим помощь США, использовать свои собственные средства для предоставления услуг по прерыванию беременности или предоставления информации об абортах в рамках комплексных услуг по планированию семьи.Правило Global Gag Rule вынуждает медицинские клиники, работающие за границей, выбирать между предоставлением ограниченных услуг в области репродуктивного здоровья при принятии иностранной помощи США или отказом от этих ресурсов для предоставления женщинам комплексных услуг в области планирования семьи и репродуктивного здоровья.

В дополнение к восстановлению этой политики, которая не действовала во время администрации Обамы, исполнительный указ, изданный вчера, расширил политику администрации Буша, чтобы распространяться на все программы, подпадающие под глобальную помощь в области здравоохранения в Государственном департаменте США. Агентство международного развития (USAID) и Министерство здравоохранения и социальных служб.Существующий федеральный закон уже запрещает использование налоговых долларов США для оплаты абортов, а Закон о глобальном здравоохранении, расширении возможностей и правах (HER) сохранит это ограничение, позволяя иностранным группам помощи предоставлять женщинам информацию о полном спектре их услуг. варианты планирования семьи с использованием других источников финансирования.

«Глобальное правило кляпов — это недальновидная политика, оказывающая разрушительное воздействие на здоровье и благополучие женщин во всем мире. Ограничивая возможности иностранных НПО действовать даже за счет собственных средств, политика может привести к закрытию программ, снижению эффективности, а исследования даже показывают, что она имеет тенденцию к увеличению количества абортов », — сказал Сен.Уорнер . «Я горжусь тем, что присоединяюсь к сенаторам по обе стороны прохода в их усилиях, направленных на окончательное прекращение этой идеологической политики раз и навсегда».

«Заставлять иностранные клиники выбирать между предоставлением важнейших медицинских услуг женщинам в их общинах и столь необходимой помощью США — неправильно», — сказал сенатор Кейн , сенатор . «Пора навсегда отменить эту пагубную политику, которая подвергает опасности миллионы женщин во всем мире».

Закон о глобальном здравоохранении, расширении возможностей и правах (HER) будет:

  • Обеспечить, чтобы правомочные иностранные НПО могли продолжать работать в U.С. поддерживает программы здравоохранения за рубежом, особенно те, которые предоставляют юридические медицинские услуги женщинам, включая консультации, направления к специалистам и услуги по легальному прерыванию беременности, за счет собственных средств за пределами США;
  • Гарантировать, что иностранные НПО не будут вынуждены жертвовать своим правом на свободу слова ради участия в программах, поддерживаемых США за рубежом;
  • Помогите расширить доступ к программам здравоохранения для женщин во всем мире, чтобы улучшить здоровье и результаты развития целых семей, сообществ и развивающихся стран.

Сенсоры Уорнер и Кейн являются активными сторонниками федеральных программ, направленных на поддержку планирования семьи и здоровья женщин.

###

Pansy Ass Ceramics в галерее DAIS, Торонто — ARTnews.com

Вид инсталляции «Керамика Панси Асс: GAG», 2017 г., в галерее DAIS, Торонто.

ПРЕДОСТАВЛЕНЫ ХУДОЖНИКОВ

«Картинки с выставки» — это изображения одного примечательного шоу каждый будний день.

Сегодняшняя выставка: «Керамика Pansy Ass: GAG» будет представлена ​​в галерее DAIS в Торонто сегодня, 21 марта. Персональная выставка представляет недавние работы дуэта, состоящего из Энди Уокера и Криса Аарона.

Ниже описание дуэта с выставки:

Gag — это коллекция произведений искусства, вдохновленных миром фетишей и гей-культурой. «Давление» — это жаргонный термин, который в основном использовался геями в начале и середине 90-х годов, когда что-то настолько жестокое, что вы не можете не хотеть заткнуть рот от перегрузки крайней жестокости.В сериале мы углубляемся в тему рвотной игры как фетиша или чего-то, что доставляет нам удовольствие, являясь символом молчания стольких ЛГБТ-сообществ по всему миру.

Вид инсталляции «Pansy Ass Ceramics: GAG», 2017, в галерее DAIS, Торонто.

ПРЕДОСТАВЛЕНЫ ХУДОЖНИКОВ

Инсталляция «Pansy Ass Ceramics: GAG», 2017 г., в галерее DAIS, Торонто.

ПРЕДОСТАВЛЕНЫ ХУДОЖНИКОВ

Вид инсталляции «Pansy Ass Ceramics: GAG», 2017, в галерее DAIS, Торонто.

ПРЕДОСТАВЛЕНЫ ХУДОЖНИКОВ

Вид инсталляции «Pansy Ass Ceramics: GAG», 2017, в галерее DAIS, Торонто.

ПРЕДОСТАВЛЕНЫ ХУДОЖНИКОВ

Вид инсталляции «Pansy Ass Ceramics: GAG», 2017, в галерее DAIS, Торонто.

ПРЕДОСТАВЛЕНЫ ХУДОЖНИКОВ

Вид инсталляции «Pansy Ass Ceramics: GAG», 2017, в галерее DAIS, Торонто.

ПРЕДОСТАВЛЕНЫ ХУДОЖНИКОВ

Вид инсталляции «Pansy Ass Ceramics: GAG», 2017, в галерее DAIS, Торонто.

ПРЕДОСТАВЛЕНЫ ХУДОЖНИКОВ

Вид инсталляции «Pansy Ass Ceramics: GAG», 2017, в галерее DAIS, Торонто.

ПРЕДОСТАВЛЕНЫ ХУДОЖНИКОВ

Вид инсталляции «Pansy Ass Ceramics: GAG», 2017, в галерее DAIS, Торонто.

ПРЕДОСТАВЛЕНЫ ХУДОЖНИКОВ

Вид инсталляции «Pansy Ass Ceramics: GAG», 2017, в галерее DAIS, Торонто.

ПРЕДОСТАВЛЕНЫ ХУДОЖНИКОВ

Вид инсталляции «Pansy Ass Ceramics: GAG», 2017, в галерее DAIS, Торонто.

ПРЕДОСТАВЛЕНЫ ХУДОЖНИКОВ

Вид инсталляции «Pansy Ass Ceramics: GAG», 2017, в галерее DAIS, Торонто.

ПРЕДОСТАВЛЕНЫ ХУДОЖНИКОВ

Вид инсталляции «Pansy Ass Ceramics: GAG», 2017, в галерее DAIS, Торонто.

ПРЕДОСТАВЛЕНЫ ХУДОЖНИКОВ

Вид инсталляции «Pansy Ass Ceramics: GAG», 2017, в галерее DAIS, Торонто.

ПРЕДОСТАВЛЕНЫ ХУДОЖНИКОВ

Вид инсталляции «Pansy Ass Ceramics: GAG», 2017, в галерее DAIS, Торонто.

Published by alexxlab

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *