Гост 379 53: Кирпич силикатный (с Изменением N 5) – РТС-тендер

by Posted on

Содержание

Кирпич силикатный

Особенности силикатного кирпича

Воспользовавшись Единой Справкой Строителя, вы грамотно сможете купить силикатный кирпич в Екатеринбурге.

Для этого необходимо выбрать какой кирпич Вам нужен, оформить заявку. И получить предложения от различных поставщиков силикатного кирпича

Из чего сделан силикатный кирпич?

Основное сырье для производства силикатного кирпича — это песок, известь и вода. Основной компонент состава такого вида кирпича — это песок. Он составляет до 90 % от общей массы. Таким образом, заводы по производству кирпича, как правило, располагаются вблизи песчаных карьеров, которые являются частью предприятий.

Размер и вес силикатного кирпича:

В соответствии с ГОСТ 379-53 силикатный кирпич имеет стандартные размеры 250X120X65 мм. Объемный вес составляет 1800-1850 кг/м3.

Качество:

Качество силикатного кирпича во многом зависит от полноты гашения извести. Гашение извести в отпрессованных заготовках при автоклавной (гидротермальной) обработке приводит к их разрушению. Этим, в первую очередь, и обусловлены требования по использованию кальциевой извести при изготовлении такого кирпича. Магнезиальная же известь, которая обжигается обычным способом, из-за продолжительного периода гашения приводит к частичному снижению марочности кирпича или его полному разрушению.

Преимущества силикатного кирпича

Отличные строительно-эксплуатационные характеристики силикатного кирпича позволяют строить из него здания и сооружения разнообразного назначения без какого-либо оштукатуривания или отделки.

Архитектурная выразительность таких зданий и сооружений в значительной степени определяется декоративными характеристиками специально производимого облицовочного силикатного кирпича.

Облицовочный силикатный кирпич должен обладать высокой прочностью, точностью геометрических размеров, плотностью и морозостойкостью.

Цена силикатного облицовочного кирпича

Наиболее низким по цене, распространенным и перспективным является силикатный кирпич объемного окрашивания. Качественно окрашенный кирпич не будет давать выцветов при воздействии попеременного увлажнения и высушивания, замораживания и оттаивания.

Историческая справка

В России производство силикатного кирпича началось еще в 1890 г. В 1914 г. на заводах выпускалось 154 млн. единиц. Затем производство начало стабильно расти и к концу 20-х годов составило 400 млн. единиц, а в 1940-м достигло одного миллиарда.

Характеристики силикатного кирпича

 

Силикатные товары являются синтетическими конгломератами на базе известково-кремнеземистого вязкого материала, который получают в результате автоклавной термообработки при нагнетании горячего пара. Кирпич белый силикатный – это автоклавное изделие, категория бетона из силиката и мелкодисперсного заполнителя. В его состав входят известь и песок в соотношении 9:1, а также незначительная часть добавок. Он используется для возведения малоэтажных домов и надстройки этажей.

 

Характеристики силикатного кирпича

 

 

  • По назначению – конструкционные, требующие последующего оштукатуривания или облицовывания, и лицевые с расшивными швами, выполняющие роль конструкционного и облицовочного изделия.
  • По геометрическим параметрам – полнотелые и пустотелые.
  • По прочности – на серии 75…300.
  • По морозоустойчивости – на категории F15… F50.
  • По водопоглощению.


Этот строительный материал отличается экологической чистотой. Кирпич силикатный по техническим характеристикам существенно превосходит глиняный. Для его изготовления необходимо около 16 ч., а глиняного – около недели. При этом на 50% ниже трудоемкость, затраты топлива и цена. Но изделия из силиката уступают по водо-, огне- и морозоустойчивости, химической стойкости, они более плотные (1400…1600 кг/м3) и теплопроводные (0,6…0,7 Вт/(м∙С)). При систематическом увлажнении его прочность уменьшается.

 


Требования к технико-эксплуатационным характеристикам изделия варьируют в зависимости от сферы его использования, предопределяемой строительными стандартами.


В зависимости от марки кирпич силикатный полнотелый имеет различные технические характеристики, определяющиеся его плотностью в пределах 1600..1900 кг/м3, у пустотелого – в диапазоне 1000..1450 кг/м3. Этот параметр влияет на уровень влагопроводности материала. В стандартах в основном приводятся значения прочности материала в сухом состоянии и только в Англии – в водонасыщенном.


Водопоглощение является ключевым параметром качества такой продукции, оно зависит от внутреннего строения, пористости, зерновой текстуры смеси, степени формовочной увлажненности и пр. В соответствии с ГОСТ 379–79 этот параметр у кирпича составляет более 6%. При увеличении уровня насыщенности водой его прочность уменьшается. На коэффициент размягчения данного изделия влияет макроструктурный состав, внутренняя структура и минеральный состав цементирующего материала, как правило, он превышает 0,8 ед.

 


Морозостойкость кирпича силикатного прямо пропорциональна его долговечности. Достаточный уровень этого показателя составляет 15…50 циклов заморозки при −15°С и размораживание в воде при +20°С в соответствии с климатическим поясом и классом помещений его использования. На сегодня в связи с внедрением инновационных технологий в производстве силикатного кирпича начали добавлять больше дисперсных фракций с целью увеличения прочностных характеристик, в результате чего в микрокапиллярах структуры влага не замерзает, что существенно увеличивает морозостойкость продукции.


Атмосфероустойчивость показывает, как изменяется кладка силикатного кирпича под действием влаги, повышенной температуры, карбонизации, заморозки и размораживания. Многочисленные исследования показывают, что существенных деформаций в цементирующей связке не наблюдается, а по прохождении этапа карбонизации гидратированные силикаты Ca трансформируются в карбонаты и кремниевые кислоты, которые являются устойчивыми элементами, закрепляющими зерна компонентов. Следовательно, кирпич силикатный, произведенный из ингредиентов разного минерального состава с применением тонкодисперстного известково-кремнеземистого составляющего, обладает достаточной атмосфероустойчивостью.

 

 


Жаростойкость изделия показывает изменчивую динамику в зависимости от температурного диапазона. Так, нагревание его на протяжении 6 часов показало, что от 0 до 200°С его прочность возрастает, потом постепенно снижается и при 600°С равна первоначальному значению. При 800°С она стремительно падает в результате распада цементирующих гидросиликатов Са.


Теплопроводность кирпичей в высушенном виде 0,35…0,7 Вт/(м∙С) находится в состоянии прямой зависимости от плотности и существенно не изменяется при наличии в материале пустот.

 

Состав и размеры

 

 

 

 

Главный составляющий элемент в кирпичном производстве – песок, из-за него такие предприятия расположены, в большей степени, близ песчаных месторождений. Внешние геометрические особенности песочных зерен важны для формовки раствора и прочности готовой продукции. Песчинки бывают выровненными, корродированными и регенерированными. В кирпичном изготовлении гранулометрия песчинок играет ключевую роль.

 


При соединении 3-х песчаных фракций (крупной, промежуточной и мелкой) в соотношении 4:2:1 получается высокопористостый материал; при 16:4:1 скважность существенно снижается, при 162:16:1 – выходит максимально уплотненной. Первичная обработка песка при поступлении в производство состоит в просеивании от примесей, обуславливающих брак готовой продукции и поломку оборудования.


Известь представляет собой второй компонент кирпича силикатного полуторного, выполняющий вяжущую роль. По химсоставу она состоит из оксида кальция с включением оксида магния. На предприятиях используется негашеная известь.


При изготовлении данной продукции вода применяется на всех производственных этапах: гашении, формировании смеси, прессовании и запаривании сырца, выработке технологического пара.


В процессе образования сырьевой массы правильное дозирование является ключевым фактором. От него зависит вес кирпича силикатного, механические и физико-технические свойства. Качественные характеристики готовой продукции соответствуют условиям ГОСТ 30108–94 «Материалы и изделия строительные.

протокол сертификационных испытаний кирпич, камни, блоки и плиты перегородочные силикатные

%PDF-1.7 % 2 0 obj > endobj 4 0 obj > stream

  • application/pdf
  • протокол сертификационных испытаний кирпич, камни, блоки и плиты перегородочные силикатные
    • 2019-04-09T04:12:14+05:00HP Scan2020-03-23T14:53:34+05:00HP Scan Extended Applicationuuid:5c5f8f45-5d4c-4e52-8139-9db32adac786uuid:ab6186a2-4b73-4d50-91a0-7ac0b8efa16a endstream endobj 53 0 obj > stream q 594.72 0 0 840.96 0.00 0.00 cm 1 g /Im1 Do Q endstream endobj 54 0 obj > stream

    Технические свойства силикатного кирпича

    Прочность при сжатии и изгибе

    В зависимости от предела прочности на сжатие силикатный кирпич подразделяют на марки 75, 100, 125, 150 и 200.

    Марка кирпича определяется его средним пределом прочности при сжатии, который составляет обычно 7,5 — 35 МПа. В стандартах ряда стран (Россия, Канада, США), наряду с этим, также регламентируют предел прочности кирпича при изгибе. Пустотелые камни средней плотностью 1000 и 1200 кг/м3 могут иметь марки 50 и 25. В большинстве стандартов предусмотрено определение прочности кирпича в воздушно-сухом состоянии и лишь в английском стандарте — в водонасыщенном.

    В стандартах приведены средняя прочность кирпича данной марки и минимальные значения предела прочности отдельных кирпичей пробы, составляющие 75-80% среднего значения.

    Водопоглощение — это один из важных показателей качества силикатного кирпича и является функцией его пористости, которая зависит от зернового состава смеси, ее формовочной влажности, удельного давления при уплотнении. По ГОСТ 379 — 79 водопоглощение силикатного кирпича должно быть не менее 6%.

    При насыщении водой прочность силикатного кирпича снижается по сравнению с его прочностью в воздушно-сухом состоянии так же, как и у других строительных материалов, и это, снижение обусловлено теми же причинами. Коэффициент размягчения силикатного кирпича при этом зависит от его макроструктуры, от микроструктуры цементирующего вещества и составляет обычно не менее 0,8.

    Влагопроводность

    Она характеризуется коэффициентом влагопроводности b, который зависит от средней плотности кирпича. При рср., примерно равной 1800 кг/м3, и различной влажности имеет следующие значения:

    Таблица 1.

    W, %0,9258111416,518,5
    b*10-5, кг\м203,66,98,710,214,5307

    Морозостойкость

    В нашей стране морозостойкость кирпича, особенно лицевого, является наряду с прочностью важнейшим показателем его долговечности. По ГОСТ 379 — 79 установлены четыре марки кирпича по морозостойкости. Морозостойкость рядового кирпича должна составлять не менее 15 циклов замораживания при температуре — 15°С и оттаивания в воде при температуре 15-20°С, а лицевого — 25, 35, 50 циклов в зависимости от климатического пояса, частей и категорий зданий, в которых его применяют.

    Снижение прочности после испытания на морозостойкость по сравнению с водонасыщенными контрольными образцами не должно превышать 20% для лицевого и 35% для рядового кирпича первой категории и соответственно 15 и 20% для кирпича высшей категории качества.

    Требования по морозостойкости к кирпичу марок 150 и выше предъявляются только в том случае, если его применяют для облицовки зданий. При этом кирпич должен пройти 25 циклов испытаний без снижения прочности более чем на 20%. По польскому стандарту силикатный кирпич всех видов должен выдерживать не менее 20 циклов замораживания и оттаивания без признаков разрушения. В стандартах Англии, США и Канады для облицовки наружных частей зданий, подвергающихся увлажнению и замораживанию, предусматривается кирпич повышенной прочности (21-35 МПа), но его морозостойкость не нормируется.

    Морозостойкость силикатного кирпича зависит в основном от морозостойкости цементирующего вещества, которая в свою очередь определяется его плотностью, микроструктурой и минеральным составом новообразований. По данным П. Г. Комохова, коэффициент морозостойкости цементного камня из прессованного известково-кремнеземистого вяжущего автоклавной обработки колеблется после 100 циклов от 0,86 до 0,94. При этом с увеличением удельной поверхности кварца с 1200 до 2500 см2/г коэффициент морозостойкости несколько возрастает, а при дальнейшем увеличении дисперсности кварца он снижается.

    В настоящее время в связи с применением механических захватов для съема и укладки сырца в сырьевую широту стали вводить значительно большее количество дисперсных фракций для повышения его плотности и прочности. Вследствие этого в структуре вырабатываемого сейчас силикатного кирпича заметную роль играют уже микрокапилляры, в которых вода не замерзает, что значительно повышает его морозостойкость.

    Морозостойкость силикатных образцов зависит от вида гидросиликатов кальция., цементирующих зёрна песка (низкоосновных, высокоосновных или их смеси). После 100 циклов испытаний коэффициент морозостойкости образцов, предварительно прошедших испытания на атмосферостойкость, равнялся для низкоосновной связки 0,81, высокоосновной — 1,26 и их смеси — 1,65.

    Изучалась также морозостойкость силикатных образцов, изготовленных на основе песков различного минерального состава. Были использованы наиболее распространенные пески: мелкий кварцевый, чистый и с примесью 10% каолинитовой или монтмориллонитовой глины, полевошпатовый, смесь 50% полевошпатового и 50% мелкого кварцевого, крупный кварцевый, содержащий до 8% полевых шпатов.
    Кремнеземистая часть вяжущего состояла из тех же, но размолотых пород. Соотношения между активной окисью кальция и кремнеземом в вяжущем назначали исходя из расчета получения цементирующей связки с преобладанием низко- или высокоосновных гидросиликатов кальция или их смеси. Количество вяжущего во всех случаях было постоянным. Однако, морозостойкость силикатных образцов после 100 циклов замораживания и оттаивания зависит не только от типа цементирующей связки, но и от минерального состава песка. Влияние минерального состава песка особенно сказывается при наличии связки из низкоосновных гидросиликатов кальция, когда в смесь введено 10% каолинитовой или монтмориллонитовой глины. Коэффициент морозостойкости при этом падает до 0,82. При повышении основности связки коэффициент морозостойкости составов, наоборот, повышается до 1,5, что свидетельствует о продолжающейся реакции между компонентами в процессе испытаний.

    Из приведенных данных видно, что хорошо изготовленный силикатный кирпич требуемого состава является достаточно морозостойким материалом.

    Атмосферостойкость

    Под атмосферостойкостью обычно понимают изменение свойств материала в результате воздействия на него комплекса факторов: переменного увлажнения и высушивания, карбонизации, замораживания и оттаивания.

    Н. Н. Смирнов исследовал микроструктуру свежеизготовленных и пролежавших в кладке 10 лет образцов силикатного кирпича Кореневского, Краснопресненского, Люберецкого и Мытищинского заводов. Он установил, что в общем случае чешуйки новообразований за 10 лет частично замещаются вторичным кальцитом в результате карбонизации гидросиликатов кальция.

    Гаррисон и Бесси испытывали в течение многих лет силикатный кирпич разных классов прочности, зарытый в грунт полностью или наполовину, а также лежащий в лотках с водой и на бетонных плитах, уложенных на поверхность земли. Они установили, что внешний вид кирпичей, лежавших 30 лет в земле с дренирующим и не дренирующим грунтом, мало изменился, но их поверхность размягчилась, а у кирпичей, частично зарытых в землю, открытая часть осталась без повреждений, хотя в некоторых случаях поверхность покрылась мхом.

    Состояние кирпичей, находившихся 30 лет на бетонных плитах, зависело от их класса, Так, оказались без повреждений или имели незначительные повреждения 95% кирпичей класса 4-5 (28-35 МПа), 65% .кирпичей класса 3 (21 МПа) и 25% кирпичей класса 2 (14 МПа). Все кирпичи класса 1 (7 МПа) имели повреждения уже через 16 лет. Все кирпичи, лежавшие 30 лет на земле в лотках с водой, получили повреждения, и чем ниже класс кирпича, тем раньше они появлялись: у кирпичей класса 1 — через 8 лет, класса 2 — через 19 лет; класса 3 — через 22 года и для классов 4-5 — через 30 лет.
    Прочность кирпичей, пролежавших в земле 20 лет, уменьшилась примерно, вдвое. При этом наибольшее снижение прочности наблюдалось у кирпичей, находившихся в недренирующем глинистом грунте, а наименьшее — у кирпичей, наполовину зарытых в землю (стоймя). За 20 лет в зависимости от условий пребывания в грунте карбонизировалось 70-80% гидросиликатов кальция, причем в основном карбонизация произошла в первые 3 года. Таким образом, даже при таких исключительно жестких испытаниях силикатный кирпич классов 3 и 4 оказался достаточно стойким.

    Общеизвестно, что прочность силикатного кирпича после остывания повышается. Именно поэтому по ранее действовавшему ОСТ 5419 предусматривалось определять его прочность не ранее чем через две недели после изготовления. Были проведены испытания кирпича на образцах, отобранных от большого, числа партий (в общей сложности 3 млн. шт.). По 10 кирпичей из каждой пробы раскалывали пополам, половинки разных кирпичей складывали попарно в определенной последовательности и испытывали сразу, а остальные укладывали на стеллажи и испытывали в той же последовательности через 15 сут. При этом было установлено, что прочность кирпича за это время возросла в среднем на 10,6%, влажность его уменьшилась с 9,6 до 3,5%, а содержание свободной окиси кальция снизилось на 25% первоначального. Таким образом, повышение прочности силикатного кирпича через 15 сут. после изготовления можно объяснить совместным влиянием его высыхания и частичной карбонизации свободной извести.

    Термографическими и рентгеноскопическими исследованиями установлено, что после испытания образцов в климатической камере заметных изменений в цементирующей связке не отмечается, а после карбонизации гидросиликаты кальция превращаются в карбонаты и гель кремнекислоты, являющиеся стойкими образованиями, цементирующими зерна песка.

    Таким образом, можно считать, что силикатный кирпич, изготовленный из песков различного минерального состава с использованием тонкомолотого известково-кремнеземистого вяжущего, является вполне атмосферостойким материалом.

    Стойкость в воде и агрессивных средах

    Стойкость силикатного кирпича определяется степенью взаимодействия цементирующего его вещества с агрессивными средами, так как кварцевый песок стоек к большинству сред. Различают газовые и жидкие среды, в которых стойкость силикатного кирпича зависит от их состава. Из этих данных следует, что силикатный кирпич нестоек против действия кислот, которые разлагают гидросиликаты и карбонаты кальция, цементирующие зерна песка, а также против содержащихся в воздухе агрессивных газов, паров и пыли при относительной влажности воздуха более 65%. Необходимо отметить, что приведенные ориентировочные данные относятся к силикатному кирпичу по ГОСТ 379 — 53, требования к качеству которого значительно ниже, чем по ГОСТ 379 — 79.

    Образцы силикатного кирпича подвергали воздействию проточной и не- проточной дистиллированной и артезианской воды в течение более 2 лет. В основном коэффициент стойкости образцов падает в первые 6 мес., а затем остается без изменения. Более высокий коэффициент стойкости — у образцов, содержащих 5% молотого песка, а более низкий — у образцов, в состав которых введено 5% молотой глины. Образцы, содержащие 1,5% молотого песка, занимают промежуточное положение: их коэффициент стойкости составляет примерно 0,8, что следует признать достаточно высоким для рядового силикатного кирпича.

    Аналогичные образцы подвергали воздействию сильно минерализованных грунтовых вод, содержащих комплекс солей, а также 5%-ного раствора Na2SO4 и 2,5%-ного раствора MgSO4.
    Каждые 3 мес. определяли прочность и коэффициент стойкости образцов, находившихся в различных растворах. В растворе Na2SO4 прочность образцов снижается в основном в течение 9 мес., а к 12 мес. она стабилизируется и в дальнейшем не меняется. В отличие от этого прочность образцов, находившихся в растворе MgSO4, падает все время, и они начинают интенсивно разрушаться уже по истечении 15 мес.

    Как правило, коэффициент стойкости образцов, содержащих 5% молотого песка, составляет в грунтовых водах и растворе Na2SO4 примерно 0,9, содержащих 1,5% молотого песка — 0,8, тогда как у образцов, в состав которых введено 5% молотой глины, в грунтовой воде и 5%-ном растворе Na2SO4 он достигает 0,7. Следовательно, образцы с молотой глиной нельзя признать достаточно стойкими к воздействию агрессивных растворов, а также мягкой и жесткой воды.

    Таким образом, силикатный кирпич, в состав которого введено 5% молотого песка, обладает высокой стойкостью к минерализованным грунтовым водам, за исключением растворов MgSO4.

    Жаростойкость

    К. Г. Дементьев, нагревавший силикатный кирпич при различной температуре в течение 6ч, установил, что до 200°С его прочность увеличивается, затем начинает постепенно падать и при 600°С достигает первоначальной. При 800°С она резко снижается вследствие разложения цементирующих кирпич гидросиликатов кальция.

    Повышение прочности кирпича при его прокаливании до 200°С сопровождается увеличением содержания растворимой SiO2, что свидетельствует о дальнейшем протекании реакции между известью и кремнеземом.

    Основываясь на данных исследований и опыте эксплуатации силикатного кирпича в дымоходах и дымовых трубах разрешается применять силикатный кирпич марки 150 для кладки дымовых каналов в стенах, в том числе от газовых приборов, для разделок, огнезащитной изоляции и облицовки; марки 150 с морозостойкостью Мрз35 — для кладки дымовых труб выше чердачного перекрытия.

    Теплопроводность

    Теплопроводность сухих силикатных кирпичей и камней колеблется от 0,35 до 0,7 Вт/(м °С) и находится в линейной зависимости от их средней плотности, практически не завися от числа и расположения пустот.

    Испытания в климатической камере фрагментов стен, выложенных из силикатных кирпичей и камней различной пустотности, показали, что теплопроводность стен зависит только от плотности последних. Теплоэффективные стены получаются лишь при использовании многопустотных силикатных кирпичей и камней плотностью не выше 1450 кг/м3 и аккуратном ведении кладки (тонкий слой нежирного раствора плотностью не более 1800 кг/м3, не заполняющего пустоты в кирпиче).

    Основные сведения о производстве силикатного кирпича

    Введение.

    Кирпич является самым древним строительным материалом. Хотя вплоть до нашего времени широчайшее распространение имел во многих странах необожженный кирпич-сырец, часто с добавлением в глину резанной соломы, применение в строительстве обожженного кирпича также восходит к глубокой древности (постройки в Египте, 3-2-е тысячелетие до н.э.).

    В наше время более 80% всего кирпича производят предприятия круглогодичного действия, среди которых имеются крупные механизированные заводы, производительностью свыше 200млн.шт. в год.

    В настоящее время появилось множество специальных красителей для отделки фасадов, это позволяет придать силикатному кирпичу любой цвет и оттенок. Широкое распространение получила отделка стен колотым силикатным кирпичом.

    Разновидностями силикатного кирпича являются известково-шлаковый и известково-зольный кирпич. Отличаются они от обычного силикатного кирпича меньшей плотностью и лучшими теплоизоляционными свойствами. Для их приготовления вместо кварцевого песка используют шлаки или золу.

    В данной работе производство силикатного кирпича будет рассматриваться на примере Белгородского комбината строительных материалов (БКСМ) или АО «Стройматериалы». Основными видами продукции являются: кирпич силикатный, известь строительная, мел молотый, газо-силикатные блоки, газо-бетонные плиты, мастика.

    Основными цехами завода являются: силикатный цех, горный цех, мелоизвестковый цех, цех технического мела, цех герметик. В качестве топлива используется природный газ, теплота сгорания которого равна 7986 ккал/м3.

    Силикатный кирпич относится к группе автоклавных вяжущих материалов. Силикатный кирпич применяют для кладки стен и столбов в гражданском и промышленном строительстве, но его нельзя применять для кладки фундаментов, печей, труб и других частей конструкций, подвергающихся воздействию высоких температур, сточных и грунтовых вод, содержащих активную углекислоту. Силикатный кирпич является экологически чистым продуктом. По технико-

    экономическим показателям он значительно превосходит глиняный кирпич. На

    его производство затрачивается 15-18 часов, в то время как на производство

    глиняного кирпича – 5-6 дней и больше. В два раза снижаются трудоемкость и

    расход топлива, а стоимость — на 15-40%. Однако у силикатного кирпича

    меньше огнестойкость, химическая стойкость, морозостойкость,

    водостойкость, несколько больше плотность и теплопроводность. В условиях

    постоянного увлажнения прочность силикатного кирпича снижается. Силикатный

    кирпич производится нескольких размеров:

    o 250*120*65мм

    o 250*120*88мм, и других видов.

    В качестве способа производства рекомендуется силосный способ. По

    сравнению с барабанным, этот способ более экономичен, а технология

    производства более проста. Далее будет подробнее

    обоснован силосный способ производства.

    Прочность при сжатии и изгибе.

    В зависимости от предела прочности на сжатие силикатный кирпич

    подразделяют на марки 75, 100, 125, 150 и 200.

    Марка кирпича определяется его средним пределом прочности при сжатии,

    который составляет обычно 7,5 – 35 МПа. В стандартах ряда стран (Россия,

    Канада, США), наряду с этим, также регламентируют предел прочности кирпича

    при изгибе.

    Водопоглощение – это один из важных показателей качества силикатного

    кирпича и является функцией его пористости, которая зависит от зернового

    состава смеси, ее формовочной влажности, удельного давления при уплотнении.

    По ГОСТ 379 – 79 водопоглощение силикатного кирпича должно быть не менее

    6%.

    Влагопроводность.

    Она характеризуется коэффициентом влагопроводности [pic], который

    зависит от средней плотности кирпича.

    Морозостойкость.

    В нашей стране морозостойкость кирпича, особенно лицевого, является

    наряду с прочностью важнейшим показателем его долговечности. По ГОСТ’ 379 –

    79 установлены четыре марки кирпича по морозостойкости. Морозостойкость

    рядового кирпича должна составлять не менее 15 циклов замораживания при

    температуре – 150С и оттаивания в воде при температуре 15 – 200С, а

    лицевого – 25, 35, 50 циклов в зависимости от климатического пояса, частей

    и категорий зданий, в которых его применяют.

    Стойкость в воде и агрессивных средах.

    Стойкость силикатного кирпича определяется степенью взаимодействия

    цементирующего его вещества с агрессивными средами, так как кварцевый песок

    стоек к большинству сред. Различают газовые и жидкие среды, в которых

    стойкость силикатного кирпича зависит от их состава. Из этих данных

    следует, что силикатный кирпич нестоек против действия кислот, которые

    разлагают гидросиликаты и карбонаты кальция, цементирующие зерна песка, а

    также против содержащихся в воздухе агрессивных газов, паров и пыли при

    относительной влажности воздуха более 65%. Необходимо отметить, что

    приведенные ориентировочные данные относятся к силикатному кирпичу по ГОСТ

    379 – 53, требования к качеству которого значительно ниже, чем по ГОСТ 379

    – 79.

    Жаростойкость.

    К. Г. Дементьев, нагревавший силикатный кирпич при различной

    температуре в течение 6ч, установил, что до 200’С его прочность

    увеличивается, затем начинает постепенно падать и при 600’С достигает

    первоначальной. При 800’С она резко снижается вследствие разложения

    цементирующих кирпич гидросиликатов кальция.

    Повышение прочности кирпича при его прокаливании до 200’С

    сопровождается увеличением содержания растворимой SiO2, что свидетельствует

    о дальнейшем протекании реакции между известью и кремнеземом.

    Основываясь на данных исследований и опыте эксплуатации силикатного

    кирпича в дымоходах и дымовых трубах разрешается применять силикатный

    кирпич марки 150 для кладки дымовых каналов в стенах, в том числе от

    газовых приборов, для разделок, огнезащитной изоляции и облицовки; марки

    Библиотека технической документации

    ОбозначениеДата введенияСтатус
    ГОСТ 310.6-85 Цементы. Метод определения водоотделения01.01.1986Введен впервые
    Область применения: Стандарт распространяется на цементы, для которых установлены требования по водоотделению, и устанавливает метод определения этого показателя. Чем заменён:
    ГОСТ 310.6-2020 Цементы. Метод определения водоотделения01.04.2021Принят
    Область применения: Настоящий стандарт распространяется на цементы, для которых установлены требования по водоотделению, и устанавливает метод определения этого показателя. <BR> <P ALIGN=»justify»> Заменяет собой:
    ГОСТ 379-69 Кирпич силикатный01.07.1970Заменен
    Область применения: Стандарт распространяется на силикатный лицевой и рядовой кирпич, применяемый для кладки наружных и внутренних стен надземных частей зданий и сооружений различного назначения. Заменяет собой:
    ГОСТ 379-79 Кирпич и камни силикатные. Технические условия01.01.1981Заменен
    Область применения: Стандарт распространяется на силикатные рядовые и лицевые кирпич и камни, изготовляемые способом прессования увлажненной смеси из песка и других мелких заполнителей, извести и других вяжущих с применением добавок или без них и последующим твердением под действием пара в автоклаве. Заменяет собой:
    ГОСТ 379-95 Кирпич и камни силикатные. Технические условия01.07.1996Заменен
    Область применения: Стандарт распространяется на силикатный кирпич и камни, изготовляемые способом прессования увлажненной смеси из кремнеземистых материалов и извести или других известесодержащих вяжущих с применением пигментов и без них с последующим твердением под действием насыщенного пара в автоклаве. Заменяет собой:
    ГОСТ 379-2015 Кирпич, камни, блоки и плиты перегородочные силикатные. Общие технические условия01.10.2015Взамен
    Область применения: Стандарт распространяется на силикатные кирпич, камни, блоки и перегородочные плиты, изготовляемые способом прессования увлажненной смеси из кремнеземистых материалов и извести или других известесодержащих компонентов с применением пигментов, легких заполнителей и без них и последующим твердением в условиях гидротермальной обработки в автоклаве. Силикатные изделия применяют для кладки и облицовки несущих, самонесущих и ненесущих стен и других элементов жилых, общественных и производственных зданий и сооружений. Заменяет собой:
    ГОСТ 530-54 Кирпич глиняный обыкновенный01.01.1955Заменен
    Область применения: Стандарт распространяется на кирпич глиняный обыкновенный пластического и полусухого прессования, изготовленный из глин с добавками или без них и обожженный. Заменяет собой:
    • ГОСТ 530-41 «Кирпич глиняный обыкновенный»
    • ГОСТ 5158-49 «Кирпич глиняный обыкновенный сухого прессования»
    ГОСТ 530-71 Кирпич глиняный обыкновенный01.07.1972Заменен
    Область применения: Стандарт распространяется на кирпич глиняный обыкновенный сплошной и пустотелый пластического и полусухого прессования, изготовленный из глины с добавками или без них, и обожженный. Заменяет собой:
    ГОСТ 530-80 Кирпич и камни керамические. Технические условия01.01.1982Заменен
    Область применения: Стандарт распространяется на керамические кирпич и камни, изготовляемые из глинистых и кремнеземистых (трепела, диатомита) пород, лессов и промышленных отходов (угледобычи, углеобогащения, зол, шламов и др.) с минеральными и органическими добавками или без них. Керамические кирпич и камни следует применять для кладки наружных и внутренних стен и других элементов зданий и сооружений, а также для изготовления стеновых панелей и блоков. Заменяет собой:
    ГОСТ 530-95 Кирпич и камни керамические. Технические условия01.07.1996Заменен
    Область применения: Стандарт распространяется на керамические кирпич и камни, изготовляемые способом полусухого прессования или пластического формования из глинистых и кремнеземистых (трепел, диатомит) осадочных пород и промышленных отходов (угледобычи и углеобогащения зол) и обожженные в печах. Заменяет собой:
    ГОСТ 530-2007 Кирпич и камень керамические. Общие технические условия01.03.2008Заменен
    Область применения: Стандарт распространяется на кирпич и камень керамические, применяемые для кладки и облицовки несущих и самонесущих стен и других элементов зданий и сооружений, и устанавливает технические требования, правила приемки, методы испытаний изделий. Полнотелый кирпич применяют также для кладки фундаментов, наружной части дымовых труб, промышленных и бытовых печей. Изделия могут применяться в других строительных конструкциях с учетом технических характеристик, установленных в стандарте. Заменяет собой:
    ГОСТ 530-2012 Кирпич и камень керамические. Общие технические условия01.07.2013Действует
    Область применения: Стандарт распространяется на кирпич и камень керамические, применяемые для кладки и облицовки несущих, самонесущих и ненесущих стен и других элементов зданий и сооружений, а также клинкерный кирпич, применяемый для кладки фундаментов, сводов, стен, подверженных большой нагрузке, и кирпич для наружной кладки дымовых труб, промышленных и бытовых печей. Заменяет собой:
    ГОСТ 862.1-85 Изделия паркетные. Паркет штучный. Технические условия01.01.1986Взамен
    Область применения: Стандарт распространяется на штучный паркет, предназначенный для устройства полов в соответствующих помещениях жилых, общественных, а также вспомогательных зданий промышленных и сельскохозяйственных предприятий. Заменяет собой:
    • ГОСТ 862.1-76 «Паркет штучный. Технические условия»
    ГОСТ 862.2-85 Изделия паркетные. Паркет мозаичный. Технические условия01.01.1986Действует
    Область применения: Стандарт распространяется на мозаичный паркет, предназначенный для устройства полов в жилых зданиях. Заменяет собой:
    • ГОСТ 862.2-76 «Паркет мозаичный. Технические условия»
    ГОСТ 862.3-86 Изделия паркетные. Доски паркетные. Технические условия01.07.1986Действует
    Область применения: Стандарт распространяется на паркетные доски, предназначенные для устройства полов в жилых зданиях. Заменяет собой:
    • ГОСТ 862.3-77 «Паркетные доски. Технические условия»
    ГОСТ 862.4-87 Изделия паркетные. Щиты паркетные. Технические условия01.07.1987Действует
    Область применения: Стандарт распространяется на паркетные щиты, предназначенные для устройства полов в жилых и общественных зданиях. Заменяет собой:
    • ГОСТ 862.4-77 «Паркетные щиты. Технические условия»
    ГОСТ 965-89 Портландцементы белые. Технические условия01.01.1990Действует
    Область применения: Стандарт распространяется на белые портландцементы общестроительного назначения, изготовленные на основе белого портландцементного клинкера. Стандарт не распространяется на белый портландцемент для производства асбестоцементных изделий. Заменяет собой:
    ГОСТ 969-91 Цементы глиноземистые и высокоглиноземистые. Технические условия01.01.1992Заменен
    Область применения: Стандарт распространяется на глиноземистые и высокоглиноземистые цементы, предназначенные для изготовления быстротвердеющих строительных и жаростойких растворов и бетонов. Заменяет собой:
    ГОСТ 969-2019 Цементы глиноземистые и высокоглиноземистые. Технические условия01.06.2020Взамен
    Область применения: Стандарт распространяется на глиноземистые, высокоглиноземистые и особочистые высокоглиноземистые цементы, предназначенные для изготовления быстротвердеющих и жаростойких бетонов и строительных растворов и устанавливает требования к ним. Заменяет собой:
    ГОСТ 1581-91 Портландцементы тампонажные. Технические условия01.01.1992Заменен
    Область применения: Стандарт распространяется на тампонажные портландцементы, изготовляемые на основе портландцементного клинкера и предназначаемые для цементирования нефтяных, газовых и других скважин. Заменяет собой:
    ГОСТ 1581-96 Портландцементы тампонажные. Технические условия01.10.1998Взамен
    Область применения: Стандарт распространяется на тампонажные портландцементы изготовляемые на основе портландцементного клинкера и предназначенные для цементирования нефтяных, газовых и других скважин. Заменяет собой:
    ГОСТ 1581-2019 Портландцементы тампонажные. Технические условия01.03.2021Принят
    Область применения: Стандарт распространяется на тампонажные портландцементы, предназначенные для цементирования нефтяных, газовых и других скважин. Заменяет собой:
    ГОСТ 2551-64 Материалы рулонные кровельные и гидроизоляционные. Упаковка, маркировка, транспортирование и хранение01.01.1966Заменен
    Заменяет собой:
    • ГОСТ 2551-51 «Материалы кровельные рулонные. Правила приемки, упаковки, маркировки, паспортизации, хранения и транспортирования»
    ГОСТ 2551-75 Материалы рулонные кровельные и гидроизоляционные. Упаковка, маркировка, хранение и транспортирование01.01.1977Заменен
    Область применения: Стандарт распространяется на рулонные кровельные и гидроизоляционные материалы и устанавливает правила их упаковки, маркировки, транспортирования и хранения. Заменяет собой:
    ГОСТ 2678-65 Материалы рулонные кровельные и гидроизоляционные. Методы испытаний01.07.1967Заменен
    Область применения: Стандарт устанавливает методы испытаний рулонных кровельных и гидроизоляционных основных материалов — битумных и дегтевых. Заменяет собой:
    • ГОСТ 2678-53 «Материалы рулонные кровельные и гидроизоляционные. Методы испытаний»
    ГОСТ 2678-94 Материалы рулонные кровельные и гидроизоляционные. Методы испытаний01.01.1996Взамен
    Область применения: Стандарт распространяется на рулонные кровельные и гидроизоляционные битумные, битумно-полимерные и полимерные материалы и устанавливает методы испытаний. Заменяет собой:
    ГОСТ 2694-67 Изделия теплоизоляционные пенодиатомитовые, диатомитовые и трепельные01.07.1968Заменен
    Область применения: Стандарт распространяется на пенодиатомитовые, диатомитовые и трепельные изделия, изготовляемые путем формования из диатомита или трепела с выгорающими или порообразующими добавками и обжига. Изделия теплоизоляционные пенодиатомитовые, диатомитовые и трепельные изготовляют в виде кирпичей блоков, полуцилиндров (скорлуп) и сегментов. Теплоизоляционные пенодиатомитовые, диатомитовые и трепельные изделия применяют для теплоизоляции сооружений а также промышленного оборудования и трубопроводов при температуре изолируемых поверхностей до 900 °С. Заменяет собой:
    • ГОСТ 2694-52 «Изделия теплоизоляционные диатомовые (трепельные)»
    ГОСТ 2694-78 Изделия пенодиатомитовые и диатомитовые теплоизоляционные. Технические условия01.07.1979Взамен
    Область применения: Стандарт распространяется на пенодиатомитовый кирпич и диатомитовые изделия (кирпич, полуцилиндры и сегменты), получаемые формованием, сушкой и обжигом диатомита с породообразующими или выгорающими добавками. Изделия предназначены для тепловой изоляции сооружений, а также промышленного оборудования и трубопроводов при температуре изолируемых поверхностей не более 900 град. С. Заменяет собой:
    ГОСТ 2697-64 Пергамин кровельный. Технические требования01.07.1967Заменен
    Область применения: Стандарт распространяется на кровельный пергамин, получаемый путем пропитки кровельного картона мягкими нефтяными битумами. Заменяет собой:
    ГОСТ 2697-83 Пергамин кровельный. Технические условия01.01.1985Взамен
    Область применения: Стандарт распространяется на кровельный пергамин — беспокровный рулонный материал, получаемый пропиткой кровельного картона марки 350 нефтяными битумами. Заменяет собой:
    • ГОСТ 2697-75 «Пергамин кровельный. Технические требования» (ИУС 2-84)
    ГОСТ 2889-67 Мастика битумная кровельная (горячая)01.01.1968Заменен
    Область применения: Стандарт распространяется на битумную кровельную (горячую) мастику, представляющую собой многокомпонентную однородную массу, состоящую из нефтяного битума (или смеси битумов), наполнителей и антисептика. Заменяет собой:
    • ГОСТ 2889-51 «Мастика битумная кровельная (горячая)»
    ГОСТ 2889-80 Мастика битумная кровельная горячая. Технические условия01.01.1982Взамен
    Область применения: Стандарт распространяется на битумную кровельную горячую мастику, представляющую собой однородную массу, состоящую из битумного вяжущего и наполнителя и используемую в горячем состоянии. Заменяет собой:

    Стойкость кирпича в воде и агрессивных средах

    Стойкость силикатного кирпича определяется степенью взаимодействия цементирующего его вещества с агрессивными средами, так как кварцевый песок стоек к большинству сред. Различают газовые и жидкие среды, в которых стойкость силикатного кирпича зависит от их состава. Из этих данных следует, что силикатный кирпич нестоек против действия кислот, которые разлагают гидросиликаты и карбонаты кальция, цементирующие зерна песка, а также против содержащихся в воздухе агрессивных газов, паров и пыли при относительной влажности воздуха более 65%. Необходимо отметить, что приведенные ориентировочные данные относятся к силикатному кирпичу по ГОСТ 379 – 53, требования к качеству которого значительно ниже, чем по ГОСТ 379 – 79.

    Образцы силикатного кирпича подвергали воздействию проточной и непроточной дистиллированной и артезианской воды в течение более 2 лет. В основном коэффициент стойкости образцов падает в первые 6 мес., а затем остается без изменения. Более высокий коэффициент стойкости – у образцов, содержащих 5% молотого песка, а более низкий – у образцов, в состав которых введено 5% молотой глины. Образцы, содержащие 1,5% молотого песка, занимают промежуточное положение: их коэффициент стойкости составляет примерно 0,8, что следует признать достаточно высоким для рядового силикатного кирпича.

    Аналогичные образцы подвергали воздействию сильно минерализован-ных грунтовых вод, содержащих комплекс солей, а также 5%-ного раствора Na2SO4 и 2,5%-ного раствора MgSO4.

    Каждые 3 мес. определяли прочность и коэффициент стойкости образцов, находившихся в различных растворах. В растворе Na2SO4 прочность образцов снижается в основном в течение 9 мес., а к 12 мес. она стабилизируется и в дальнейшем не меняется. В отличие от этого прочность образцов, находившихся в растворе MgSO4, падает все время, и они начинают интенсивно разрушаться уже по истечении 15 мес.
    Как правило, коэффициент стойкости образцов, содержащих 5% молотого песка, составляет в грунтовых водах и растворе Na2SO4 примерно 0,9, содержащих 1,5% молотого песка – 0,8, тогда как у образцов, в состав которых введено 5% молотой глины, в грунтовой воде и 5%-ном растворе Na2SO4 он достигает 0,7. Следовательно, образцы с молотой глиной нельзя признать достаточно стойкими к воздействию агрессивных растворов, а также мягкой и жесткой воды.

    Таким образом, силикатный кирпич, в состав которого введено 5% молотого песка, обладает высокой стойкостью к минерализованным грунтовым водам, за исключением растворов MgSO4.

    Горячекатаные трубы СЧ50 бесшовные

    Горячекатаные бесшовные трубы СЧ50 широко распространены и могут быть найдены под землей и в жилых стенах, лабораториях, коммерческих и промышленных сооружениях. Трубы транспортируют жидкости, включая воду, природный газ, отходы и воздух. Для производства стальных труб существуют три производственных метода. Трубы бесшовные производятся с использованием пресс-формы.
    Производство горячекатаных бесшовных труб
    Тип бесшовные
    Размер от 3/4 ″ до 38 ″
    Толщина стенки СЧ50
    Стандарты API 5L, ASTM A53, ASTMA106, EN10216, EN10217, EN10219, EN10210, DIN1629, DIN1616, DIN 87175, ГОСТ , ГОСТ 8732
    Материал Труба бесшовная: ГР.В, X42, X52, X46, P195TR1, P195TR2, P235TR1, P235TR2, S275JRH, ST37, ST44, ST52, P265TR2.
    Обработка поверхности Черная окраска, антикоррозийный лак, антикоррозийное масло, горячее цинкование, покрытие 3PE, эпоксидное покрытие.
    Упаковка Пластиковая заглушка, полиэтиленовый пакет, стальные полосы в комплекте
    Области применения Нефть, химия, энергия, газ, металлургия, судостроение, строительство и т. Д.
    Мин. Заказ 5 тонн
    Основной рынок Таиланд, Вьетнам, Индия, ОАЭ, Польша, Малайксия, Шри Ланка, Алжир, Мошико и т. Д.
    Срок поставки 10 после получения предоплаты
    Сертификат API, CE, CCS и ISO9001: 2000
    Производительность 200000 тонн в год

    Химический состав бесшовных горячекатаных труб СЧ50:

    Стандарты Марка С Si Мн P≤ S≤ Cu≤
    ГБ / т 10 0.07-0,14 0,17-0,37 0,35–0,65 0,035 0,035 0,25
    20 0,17–0,24 0,17-0,37 0,35–0,65 0,035 0,035 0,25
    35 0,32–0,39 0,17-0,37 0,50–0,80 0,035 0,035 0,25
    45 0,42–0,50 0.17-0,37 0,50–0,80 0,035 0,035 0,25
    16 млн 0,12–0,20 0,20-0,55 1,20–1,60 0,045 0,045 0,25
    DIN Ст35 ≤0,18 0,15–0,35 0,35–0,65 0,035 0,035 0,25
    Ст45 ≤0,25 0.15-0,35 0,50–0,80 0,035 0,035 0,25
    Ст55 0,33–0,41 0,15–0,35 0,50–0,80 0,035 0,035 0,25
    Ст52 ≤0,20 ≤0,55 ≤1,50 0,035 0,035 0,25
    ASTM A53 СК45 0,42–0,50 0.17-0,37 0,50–0,80 0,035 0,035 0,25
    ASTM A106 A ≤0,25/ ≤0,95 0,05 0,045 0,4
    B ≤0,30

    ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОПТИМАЛЬНОГО РЕЖИМА СТЕРИЛИЗАЦИИ КОНСЕРВОВ ПЕРЕПЕЛКИ С ПРИМЕНЕНИЕМ ГИДРОКОЛОИДОВ

    Силва, Ф.В. М., Гиббс П. А. (2012). Требования к термической пастеризации для инактивации сальмонеллы в пищевых продуктах. Food Research International, 45 (2), 695–699. DOI: 10.1016 / j.foodres.2011.06.018

    Фади А., Мохаммад Дж. (2012). Влияние сохранения температуры на выживаемость бактерий в мясе птицы. Доступно по адресу: http://repository.sustech.edu/handle/123456789/1654

    Ли, Дж. Дж., Ким, Д. Х., Лим, Дж. Дж., Ким, Д. Г. и др. al. (2011). Эффекты стерилизации вирусом птичьего гриппа и вирусом болезни Ньюкасла в мышцах и органах курицы в зависимости от времени автоклавирования.Корейский журнал ветеринарного общественного здравоохранения, 35 (4), 270–274. Доступно по адресу: http://agris.fao.org/agris-search/search.do?recordID=KR2012004468

    Ястреба, Ю. А., Положышникова Л. А., Пасычный В. Н. (2015). Технология мясных консервов с использованием альхината натрыя. Науковый вісник Львовского национального университета ветеринарной медицины та биотехнологий имени С.З. Гжицкого, 17 (4 (64)).

    Прянышников, В. В. (2010).Инновации технологий производства консервов из мяса птицы. Птица и птицепродукту, 5, 21–22.

    Пасичный В. М., Сабадаш П. М. (2005). Выкорыстання гидроколоидов у выращивания консервив с мясом птицы. Харчова промысловица, 4, 61–63.

    Страшинский И., Фурсик О., Пасичный В., Марынин А., Гончаров Г. (2016). Влияние функционального состава пищи на свойства мясных фаршовых систем. Восточноевропейский журнал корпоративных технологий, 6 (11 (84)), 53–58.DOI: 10.15587 / 1729-4061.2016.86957

    ГОСТ 30425-97. Консервы. Метод определения промышленной стерильности. Доступно на: http://www.internet-law.ru/gosts/gost/9107/

    Пасичный В. М., Тимошенко И. В. (2014). Оптимизация технологических процессов халузи. Киев: НУХТ, 67.

    VEB MLW Инструкция по эксплуатации REOTEST 2 — цилиндрический и конусо-пластиночный ротационный вискозиметр (1979). MLW, 50. Доступно по адресу: http: // www.pochva.com/?content=3&book_id=1311

    Кто такие «призрачные» депутаты? Свидетельство французского парламента

    Автор

    Abstract

    В данной статье исследуются характеристики «призрачных» депутатов Национального собрания Франции, то есть депутатов, которые не имеют официально зарегистрированной активности в течение целого года. Используя обширный набор данных, дающий различную информацию обо всех депутатах с 1959 по 2012 год, результаты показывают, что типичный призрачный депутат — это старик с низким уровнем образования, член большой партии, не поддерживающей правительство, и избранный в юрисдикция с низким уровнем политической конкуренции.Однако с годами личные характеристики все меньше и меньше коррелируют с результатами. Наконец, призрачные депутаты сталкиваются с большими трудностями при переизбрании, но наказываются только в первом туре, а во втором туре избиратели учитывают исключительно национальные факторы.

    Рекомендуемое цитирование

  • Гавой, Николя, 2018. « Кто такие« призрачные »депутаты? Свидетельства французского парламента », Европейский журнал политической экономии, Elsevier, vol. 53 (C), страницы 134-148.
    • Рукоятка: RePEc: eee: poleco: v: 53: y: 2018: i: c: p: 134-148
    DOI: 10.1016 / j.ejpoleco.2017.07.007

    Скачать полный текст от издателя

    Поскольку доступ к этому документу ограничен, вы можете поискать другую версию ниже или найти другую версию.

    Другие версии этой позиции:

    Ссылки на IDEAS

    1. Christian Staat & Colin R. Kuehnhanss, 2017. « Внешние доходы, избирательные системы и законодательные меры в Европейском парламенте », Журнал исследований общего рынка, Wiley Blackwell, vol.55 (2), страницы 368-386, март.
    2. Николь В. Крейн и В. Марк Крейн, 2013. « Законодательные собрания ,» Главы, в: Уильям Ф. Шугарт II, Лаура Раззолини и Майкл Рексулак (ред.), Элгар, спутник общественного выбора, второе издание, глава 9, страницы 143-152, Эдвард Элгар Паблишинг.
    3. Беслей, Тимоти и Кейс, Энн, 1995. « Поведение действующего президента: подача голосов, установление налогов и конкуренция за критерии критериев «, Американский экономический обзор, Американская экономическая ассоциация, т.85 (1), страницы 25-45, март.
    4. Томас Брэндл, 2016 г. « Влияют ли институты на выбор граждан в политике? ,» Журнал экономических обзоров, Wiley Blackwell, vol. 30 (2), страницы 205-227, апрель.
    5. Арнольд, Феликс и Каудер, Бьорн и Потрафке, Никлас, 2014. « Внешние заработки, отсутствие и деятельность: свидетельства парламентариев Германии ,» Европейский журнал политической экономии, Elsevier, vol. 36 (C), страницы 147-157.
    6. Роберт ван Геффен, 2016.« Влияние карьерного роста на деятельность депутатов Европарламента ,» Журнал исследований общего рынка, Wiley Blackwell, vol. 54 (4), страницы 1017-1032, июль.
    7. Роджер Конглтон и Юнцзин Чжан, 2013 г. « Все дело в компетентности? Человеческий капитал президентов США и экономические показатели », Конституционная политическая экономия, Springer, vol. 24 (2), страницы 108-124, июнь.
    8. Gavoille, Nicolas & Verschelde, Marijn, 2017. « Электоральная конкуренция и политический отбор: анализ деятельности французских депутатов 1958–2012 гг. », Европейский экономический обзор, Elsevier, vol.92 (C), страницы 180-195.
    9. Йоханнес Беккер, Андреас Пайхль и Йоханнес Ринке, 2009. « Внешние доходы политиков и конкуренция на выборах ,» Общественный выбор, Springer, т. 140 (3), страницы 379-394, сентябрь.
      • Becker, Johannes & Peichl, Andreas & Rincke, Johannes, 2008. « Внешние доходы политиков и конкуренция на выборах ,» Документы для обсуждения по экономике 2206, Мюнхенский университет, факультет экономики.
      • Беккер, Йоханнес и Пайхл, Андреас и Ринке, Йоханнес, 2008.» Внешние доходы политиков и электоральная конкуренция ,» Документы для обсуждения FiFo — Finanzwissenschaftliche Diskussionsbeiträge 08-3, Кельнский университет, Институт общественной экономики FiFo.
    10. Фабио Падовано и Николя Гавой, 2017. « Законодательные циклы в полупрезидентской системе ,» Журнал институциональной и теоретической экономики (JITE), Mohr Siebeck, Tübingen, vol. 173 (3), страницы 470-497, сентябрь.
    11. Казелли, Франческо и Морелли, Массимо, 2004 г.» Плохие политики ,» Журнал общественной экономики, Elsevier, vol. 88 (3-4), страницы 759-782, март.
      • Казелли, Франческо и Морелли, Массимо, 2000. « Плохие политики ,» Документы для обсуждения CEPR 2402, C.E.P.R. Документы для обсуждения.
      • Франческо Казелли и Массимо Морелли, 2001 г. « Плохие политики ,» Рабочие документы NBER 8532, Национальное бюро экономических исследований, Inc.
      • Франческо Казелли и Массимо Морелли, 2000 г. « Плохие политики ,» Документ для обсуждения / Институт эмпирической макроэкономики 134, Федеральный резервный банк Миннеаполиса.
    12. Тимоти Бесли, 2004. « Лекция Йозефа Шумпетера: Платные политики: теория и доказательства «, Журнал Европейской экономической ассоциации, MIT Press, vol. 2 (2-3), страницы 193-215, 04/05.
    13. Тимоти Бесли, 2005. « Политический отбор ,» Журнал экономических перспектив, Американская экономическая ассоциация, т. 19 (3), страницы 43-60, Summer.
    14. Месснер, Маттиас и Полборн, Маттиас К., 2004. « Платежные политики ,» Журнал общественной экономики, Elsevier, vol.88 (12), страницы 2423-2445, декабрь.
      • Маттиас Месснер и Маттиас Полборн, 2003 г. « Платежные политики ,» Рабочие бумаги 246, IGIER (Институт экономических исследований Инноченцо Гаспарини), Университет Боккони.
    15. Марк-Даниэль Мессинджер, 2014 г. « Влияют ли личные характеристики министров финансов на изменение государственного долга? », Общественный выбор, Springer, т. 161 (1), страницы 183-207, октябрь.
    16. Галассо, Винченцо и Нанничини, Томмазо, 2015.» Так закрыто: политический отбор в пропорциональных системах ,» Европейский журнал политической экономии, Elsevier, vol. 40 (PB), страницы 260-273.
    17. Томас Брэндл, 2015. « Влияет ли вознаграждение на дисциплину и выбор политиков? Доказательства гармонизации оплаты труда в Европейском парламенте », Общественный выбор, Springer, т. 162 (1), страницы 1-24, январь.
    18. Бернекер, Андреас, 2014. « Уклоняются ли политики, когда переизбрание неизбежно? Данные из немецкого парламента », Европейский журнал политической экономии, Elsevier, vol.36 (C), страницы 55-70.
    19. Тимоти Бесли и Хосе Г. Монтальво и Марта Рейнал-Кероль, 2011 г. « Имеют ли значение образованные лидеры? ,» Экономический журнал, Королевское экономическое общество, т. 121 (554), страницы 205-205, август.
    20. Baltrunaite, Audinga & Bello, Piera & Casarico, Alessandra & Profeta, Paola, 2014. « Гендерные квоты и качество политиков », Журнал общественной экономики, Elsevier, vol. 118 (C), страницы 62-74.
    21. Котакорпи, Кайса и Поутваара, Пану, 2011.« Плата за политиков и отбор кандидатов: эмпирический анализ », Журнал общественной экономики, Elsevier, vol. 95 (7-8), страницы 877-885, август.
      • Котакорпи, Кайса и Поутваара, Пану, 2009. « Плата за политиков и отбор кандидатов: эмпирический анализ «, Документы для обсуждения IZA 4235, Институт экономики труда (ИЗА).
      • Котакорпи, Кайса и Поутваара, Пану, 2011. « Плата за политиков и отбор кандидатов: эмпирический анализ », Мюнхенские репринты по экономике 19489, Мюнхенский университет, экономический факультет.
      • Кайса Котакорпи и Пану Поутваара, 2010 г. « Плата за политиков и отбор кандидатов: эмпирический анализ «, Серия рабочих документов CESifo 3126, CESifo.
    22. Брандл, Томас, 2013 г. « Влияют ли институты на выбор граждан в политике? ,» Рабочие бумаги 2013/04, Факультет бизнеса и экономики Базельского университета.
    23. Роджерс, Джеймс Р., 2002. « Бесплатное использование в законодательных собраниях штата ,» Общественный выбор, Springer, т.113 (1-2), страницы 59-76, октябрь.
    24. Галассо, Винченцо и Нанничини, Томмазо, 2011. « Конкуренция с хорошими политиками ,» Обзор американской политической науки, Cambridge University Press, vol. 105 (1), страницы 79-99, февраль.
      • Галассо, Винченцо и Нанничини, Томмазо, 2009. « Конкуренция с хорошими политиками ,» Документы для обсуждения IZA 4282, Институт экономики труда (ИЗА).
      • Винченцо Галассо и Томмазо Нанничини, 2010 г. « Конкуренция с хорошими политиками ,» Рабочие бумаги 368, IGIER (Институт экономических исследований Инноченцо Гаспарини), Университет Боккони.
      • Галассо, Винченцо и Нанничини, Томмазо, 2009. « Конкуренция с хорошими политиками ,» Документы для обсуждения CEPR 7363, C.E.P.R. Документы для обсуждения.
    25. Бернд Хайо и Флориан Ноймайер, 2012 г. «Влияние лидеров на приоритеты государственных расходов: пример земель Германии », Kyklos, Wiley Blackwell, т. 65 (4), страницы 480-511, ноябрь.
    26. Мартин Дж. Осборн и Эл Сливински, 1996. « Модель политической конкуренции с гражданами-кандидатами ,» Ежеквартальный журнал экономики, Oxford University Press, vol.111 (1), страницы 65-96.
    27. Джеффри М. Вулдридж, 2010 г. « Эконометрический анализ поперечных сечений и панельных данных », Книги MIT Press, MIT Press, издание 2, том 1, номер 0262232588.
    28. Тимоти Бесли и Стивен Коут, 1997. « Экономическая модель представительной демократии », Ежеквартальный журнал экономики, Oxford University Press, vol. 112 (1), страницы 85-114.
    29. Тимоти Бесли и Олле Фольке, Торстен Перссон и Йоханна Рикне, 2017.» Гендерные квоты и кризис посредственного человека: теория и доказательства из Швеции «, Американский экономический обзор, Американская экономическая ассоциация, т. 107 (8), страницы 2204-2242, август.
    30. Бернд Хайо и Флориан Ноймайер, 2016. « Социально-экономическое положение политических лидеров и дефицит государственного бюджета: данные из стран ОЭСР «, Экономика и политика, Уайли Блэквелл, т. 28 (1), страницы 55-78, март.
    31. Орели Кассета и Этьен Фарвак и Жером Эрикур, 2013.« Выборы в два тура, определяющие факторы в один тур? Данные французских муниципальных выборов ,» Общественный выбор, Springer, т. 156 (3), страницы 563-591, сентябрь.
    32. Мария Паола и Винченцо Скоппа, 2011 г. « Политическая конкуренция и качество политического деятеля: данные итальянских муниципалитетов ,» Общественный выбор, Springer, т. 148 (3), страницы 547-559, сентябрь.
    33. Дреер, Аксель и Ламла, Майкл Дж. И Лейн, Сара М. и Сомоги, Франк, 2009. « Влияние профессии и образования политических лидеров на реформы ,» Журнал сравнительной экономики, Elsevier, vol.37 (1), страницы 169-193, март.
    34. Наннестад, Питер и Палдам, Мартин, 1994. « Функция VP: обзор литературы по функциям голосования и популярности через 25 лет «, Общественный выбор, Springer, т. 79 (3-4), страницы 213-245, июнь.
    35. Йохимсен, Беате и Томасиус, Себастьян, 2014 г. « Идеальный министр финансов: кого назначить министром финансов, чтобы сбалансировать бюджет », Европейский журнал политической экономии, Elsevier, vol. 34 (C), страницы 390-408.
    36. Кеннет Рогофф и Энн Сиберт, 1988. « Выборы и циклы макроэкономической политики », Обзор экономических исследований, Oxford University Press, vol. 55 (1), страницы 1-16.
      • Рогофф, Кеннет и Сиберт, Энн, 1985. « Выборы и циклы макроэкономической политики », Серия семинаров по СИОЗС 292676, Университет Висконсин-Мэдисон, Институт исследований социальных систем.
      • Кеннет Рогофф и Энн Сиберт, 1986. « Выборы и циклы макроэкономической политики ,» Рабочие документы NBER 1838 г., Национальное бюро экономических исследований, Inc.
    37. Thomas Braendle & Alois Stutzer, 2013. « Политический отбор государственных служащих и парламентский надзор ,» Экономика управления, Springer, vol. 14 (1), страницы 45-76, февраль.
    38. Валентино Ларчинезе, 2014 г. « Предоставление избирательных прав и представительство: свидетельства введения квазиуниверсального избирательного права в Италии «, Рабочие бумаги 512, IGIER (Институт экономических исследований Инноченцо Гаспарини), Университет Боккони.
    39. Хайо, Бернд и Ноймайер, Флориан, 2014 г.« Социально-экономическое положение и финансовые результаты политических лидеров в Германии ,» Европейский журнал политической экономии, Elsevier, vol. 34 (C), страницы 184-205.
    40. Фабио Падовано и Николя Гавой, 2013 г. « Цикл двойного политического законодательства во Франции », Рабочий доклад по экономике от Центра политической экономии Кондорсе в CREM-CNRS 2013-02-ccr, Центр политической экономии Кондорсе, отредактировано в июне 2014 г.
    41. Джон Фереджон, 1986. « Действующая деятельность и контроль на выборах ,» Общественный выбор, Springer, т.50 (1), страницы 5-25, январь.
    42. Рагабендра Чаттопадхья и Эстер Дюфло, 2004. « Женщины как политики: данные рандомизированного политического эксперимента в Индии «, Econometrica, Econometric Society, vol. 72 (5), страницы 1409-1443, сентябрь.
    43. Абель Франсуа и Лоран Вайль, 2014 г. « Le cumul de mandats locauxffecte-t-il l’activité des députés français? ,» Revue économique, Presses de Sciences-Po, vol. 65 (6), страницы 881-906.
    44. Гальярдуччи, Стефано и Нанничини, Томмазо и Натиччиони, Паоло, 2010 г.» Подработка политиков ,» Журнал общественной экономики, Elsevier, vol. 94 (9-10), страницы 688-699, октябрь.
    45. Доллар, Дэвид и Фисман, Раймонд и Гатти, Роберта, 2001. « Действительно ли женщины представительницы слабого пола? Коррупция и женщины в правительстве », Журнал экономического поведения и организации, Elsevier, vol. 46 (4), страницы 423-429, декабрь.
    46. Рогофф, Кеннет, 1990. « Циклы равновесия политического бюджета «, Американский экономический обзор, Американская экономическая ассоциация, т.80 (1), страницы 21-36, март.
    47. Бенджамин Ф. Джонс и Бенджамин А. Олкен, 2005. « Имеют ли значение лидеры? Национальное лидерство и рост после Второй мировой войны ,» Ежеквартальный журнал экономики, Oxford University Press, vol. 120 (3), страницы 835-864.
    48. Thomas Braendle & Alois Stutzer, 2010 г. « Государственный служащий в парламенте: теория и доказательства его детерминант в Германии », Общественный выбор, Springer, т. 145 (1), страницы 223-252, октябрь.
    49. Роберт Барро, 1973.« Контроль политиков: экономическая модель », Общественный выбор, Springer, т. 14 (1), страницы 19-42, март.
    Полные ссылки (включая те, которые не соответствуют элементам в IDEAS)

    Самые популярные товары

    Это элементы, которые чаще всего цитируют те же работы, что и эта, и цитируются в тех же работах, что и эта.
    1. Gavoille, Nicolas & Verschelde, Marijn, 2017. « Электоральная конкуренция и политический отбор: анализ деятельности французских депутатов 1958–2012 гг. », Европейский экономический обзор, Elsevier, vol.92 (C), страницы 180-195.
    2. Thomas Braendle & Alois Stutzer, 2017. « Избиратели и представители: как следует выбирать представителей? », Серия рабочих документов CREMA 2017-05, Центр исследований в области экономики, менеджмента и искусств (CREMA).
    3. Брандл, Томас, 2013 г. « Влияют ли институты на выбор граждан в политике? ,» Рабочие бумаги 2013/04, Факультет бизнеса и экономики Базельского университета.
    4. Braendle, Thomas & Stutzer, Alois, 2016.« Выбор государственных служащих в политику ,» Журнал сравнительной экономики, Elsevier, vol. 44 (3), страницы 696-719.
    5. Baltrunaite, Audinga & Bello, Piera & Casarico, Alessandra & Profeta, Paola, 2014. « Гендерные квоты и качество политиков », Журнал общественной экономики, Elsevier, vol. 118 (C), страницы 62-74.
    6. Андреас Пайхль, Нико Пестель и Себастьян Сиглох, 2013 г. « Разрыв в заработной плате политиков: мнения членов парламента Германии », Общественный выбор, Springer, т.156 (3), страницы 653-676, сентябрь.
      • Пайхль, Андреас и Пестель, Нико и Сиглох, Себастьян, 2011. « Разрыв в заработной плате политиков: мнения членов парламента Германии «, Документы для обсуждения IZA 5520, Институт экономики труда (ИЗА).
      • Пайхль, Андреас и Пестель, Нико и Сиглох, Себастьян, 2011 г. « Разрыв в заработной плате политиков: мнения членов парламента Германии », Бумага MPRA 34595, Университетская библиотека Мюнхена, Германия.
      • Андреас Пайхль, Нико Пестель и Себастьян Сиглох, 2011 г. « Разрыв в заработной плате политиков: мнения членов парламента Германии «, Документы SOEP по многопрофильному исследованию панельных данных 366, DIW Berlin, Немецкая социально-экономическая группа (SOEP).
    7. Алессандро Феделе и Паоло Натичкиони, 2016 г. « Подрабатывающие политики: имеет значение мотивация! ,» Обзор экономики Германии, Verein für Socialpolitik, vol. 17 (2), страницы 127-156, май.
    8. Флориан Ноймайер, 2018. « Делают ли бизнесмены хорошими губернаторами? » Экономическое расследование, Международная западная экономическая ассоциация, т. 56 (4), страницы 2116-2136, октябрь.
      • Флориан Ноймайер, 2015. « Делают ли бизнесмены хорошими губернаторами? » Статьи МАГКС по экономике 201519, Филиппский университет Марбурга, факультет делового администрирования и экономики, факультет экономики (Volkswirtschaftliche Abteilung).
      • Флориан Ноймайер, 2016.» Делают ли бизнесмены хорошими губернаторами? » Серия рабочих документов ifo 230, институт ifo — Институт экономических исследований им. Лейбница при Мюнхенском университете.
      • Ноймайер, Флориан, 2018. « Из предпринимателей становятся хорошими губернаторами? », Мюнхенские репринты по экономике 62867, Мюнхенский университет, факультет экономики.
    9. Шарфенкамп, Катрин, 2018. « Эффект объединения бизнеса и политики — анализ выживания федеральных министров Германии », Европейский журнал политической экономии, Elsevier, vol.55 (C), страницы 433-454.
    10. Клаас Бениерс и Роберт Дур, 2007. « Мотивация политиков, политическая культура и электоральная конкуренция ,» Международное налогообложение и государственные финансы, Springer; Международный институт государственных финансов, т. 14 (1), страницы 29-54, февраль.
      • Клаас Дж. Бениерс и Роберт Дур, 2004. « Мотивация политиков, политическая культура и электоральная конкуренция ,» Серия рабочих документов CESifo 1228, CESifo.
      • Клаас Дж.Бенирс и Роберт Дюр, 2004. « Мотивация политиков, политическая культура и электоральная конкуренция ,» Документы для обсуждения в Институте Тинбергена 04-065 / 1, Институт Тинбергена, от 16 августа 2005 г.
    11. Йохимсен, Беате и Томасиус, Себастьян, 2014 г. « Идеальный министр финансов: кого назначить министром финансов, чтобы сбалансировать бюджет », Европейский журнал политической экономии, Elsevier, vol. 34 (C), страницы 390-408.
    12. Де Бенедетто, Марко Альберто и Де Паола, Мария, 2014.«Качество кандидатов и участие в выборах: данные муниципальных выборов в Италии », Документы для обсуждения IZA 8102, Институт экономики труда (ИЗА).
    13. Николя ГАВОИ, Жан-Мишель ЖОССЕЛИН и Фабио ПАДОВАНО, 2014 г. « Что вы знаете о своем мэре? Информация об избирателях и размер юрисдикции », Рабочий доклад по экономике от Центра политической экономии Кондорсе в CREM-CNRS 2014-01-ccr, Центр политической экономии Кондорсе, отредактировано в августе 2015 г.
    14. Fuchs, Andreas & Richert, Katharina, 2015. « Влияют ли характеристики министра развития на оказание помощи? ,» Рабочие бумаги 0604, Гейдельбергский университет, экономический факультет.
    15. Пану Поутваара и Туомас Такало, 2007. « Кандидатское качество ,» Международное налогообложение и государственные финансы, Springer; Международный институт государственных финансов, т. 14 (1), страницы 7-27, февраль.
      • Пану Поутваара и Туомас Такало, 2003 г. « Кандидат качества ,» Серия рабочих документов CESifo 1106, CESifo.
      • Поутваара, Пану и Такало, Туомас, 2007. « Кандидатское качество ,» Мюнхенские репринты по экономике 19785 г., Мюнхенский университет, экономический факультет.
      • Пану Поутваара и Туомас Такало, 2004 г. « Кандидат качества ,» Общественная экономика 0406009, Университетская библиотека Мюнхена, Германия.
      • Поутваара, Пану и Такало, Туомас, 2004. « Кандидат качества ,» Документы для обсуждения IZA 1195, Институт экономики труда (ИЗА).
    16. Эрнесто Даль Бо, Фредерико Финан, Олле Фолке, Торстен Перссон и Йоханна Рикне, 2017.» Кто становится политиком? ,» Ежеквартальный журнал экономики, Oxford University Press, vol. 132 (4), страницы 1877-1914.
      • Даль Бо, Ernesto & Finan, Frederico & Folke, Olle & Persson, Torsten & Rickne, Johanna, 2016. « Кто становится политиком? ,» Серия рабочих документов 1133, Научно-исследовательский институт экономики промышленности.
      • Эрнесто Даль Бо, Фредерико Финан, Олле Фолке, Торстен Перссон и Йоханна Рикне, 2017. « Кто становится политиком? ,» Рабочие документы NBER 23120, Национальное бюро экономических исследований, Inc.
    17. Бьорн Каудер, Мануэла Краузе и Никлас Потрафке, 2018. « электоральный цикл в зарплатах депутатов: данные из немецких земель », Международное налогообложение и государственные финансы, Springer; Международный институт государственных финансов, т. 25 (4), страницы 981-1000, август.
      • Бьорн Каудер, Мануэла Краузе и Никлас Потрафке, 2016 г. « избирательных циклов в заработной плате депутатов: данные из немецких земель ,» Серия рабочих документов CESifo 6028, CESifo.
      • Каудер, Бьорн и Краузе, Мануэла и Потрафке, Никлас, 2018. « электоральный цикл в зарплатах депутатов: данные из немецких земель », Мюнхенские репринты по экономике 62849, Мюнхенский университет, факультет экономики.
    18. Ронни Фрейер и Себастьян Томазиус, 2016 г. « Избиратели предпочитают более квалифицированных мэров, но имеет ли это значение для государственных финансов? Доказательства для Германии », Международное налогообложение и государственные финансы, Springer; Международный институт государственных финансов, т.23 (5), страницы 875-910, октябрь.
    19. Fuchs, Andreas & Richert, Katharina, 2018. « Характеристики министра развития и оказания помощи «, Статьи и главы книг в открытом доступе EconStor, ZBW — Информационный центр экономики имени Лейбница, страницы 186-204.
    20. Арнольд, Феликс и Каудер, Бьорн и Потрафке, Никлас, 2014. « Внешние заработки, отсутствие и деятельность: свидетельства парламентариев Германии ,» Европейский журнал политической экономии, Elsevier, vol.36 (C), страницы 147-157.

    Исправления

    Все материалы на этом сайте предоставлены соответствующими издателями и авторами. Вы можете помочь исправить ошибки и упущения. При запросе исправления укажите номер этого элемента: RePEc: eee: poleco: v: 53: y: 2018: i: c: p: 134-148 . См. Общую информацию о том, как исправить материал в RePEc.

    По техническим вопросам, касающимся этого элемента, или для исправления его авторов, заголовка, аннотации, библиографической информации или информации для загрузки, обращайтесь:.Общие контактные данные провайдера: http://www.elsevier.com/locate/inca/505544 .

    Если вы создали этот элемент и еще не зарегистрированы в RePEc, мы рекомендуем вам сделать это здесь. Это позволяет связать ваш профиль с этим элементом. Это также позволяет вам принимать потенциальные ссылки на этот элемент, в отношении которых мы не уверены.

    Если CitEc распознал библиографическую ссылку, но не связал с ней элемент в RePEc, вы можете помочь с этой формой .

    Если вам известно об отсутствующих элементах, цитирующих этот элемент, вы можете помочь нам создать эти ссылки, добавив соответствующие ссылки таким же образом, как указано выше, для каждого элемента ссылки. Если вы являетесь зарегистрированным автором этого элемента, вы также можете проверить вкладку «Цитаты» в своем профиле RePEc Author Service, поскольку там могут быть некоторые цитаты, ожидающие подтверждения.

    По техническим вопросам, касающимся этого элемента, или для исправления его авторов, названия, аннотации, библиографической информации или информации для загрузки, обращайтесь: Catherine Liu (адрес электронной почты указан ниже).Общие контактные данные провайдера: http://www.elsevier.com/locate/inca/505544 .

    Обратите внимание, что исправления могут занять пару недель, чтобы отфильтровать различные сервисы RePEc.

    % PDF-1.5 % 1 0 объект > эндобдж 4 0 obj (\ 376 \ 377 \ 0001 \ 000 \ 040 \ 000I \ 000n \ 000t \ 000r \ 000o \ 000d \ 000u \ 000c \ 000t \ 000i \ 000o \ 000n) эндобдж 5 0 obj > эндобдж 8 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0002 \ 000 \ 040 \ 000H \ 000o \ 000w \ 000 \ 040 \ 000t \ 000o \ 000 \ 040 \ 000u \ 000s \ 000e) эндобдж 9 0 объект > эндобдж 12 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0003 \ 000 \ 040 \ 000C \ 000u \ 000s \ 000t \ 000o \ 000m \ 000i \ 000z \ 000a \ 000t \ 000i \ 000o \ 000n) эндобдж 13 0 объект > эндобдж 16 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0004 \ 000 \ 040 \ 000W \ 000h \ 000e \ 000r \ 000e \ 000 \ 040 \ 000t \ 000o \ 000 \ 040 \ 000g \ 000e \ 000t) эндобдж 17 0 объект > эндобдж 20 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0005 \ 000 \ 040 \ 000V \ 000e \ 000r \ 000s \ 000i \ 000o \ 000n \ 000 \ 040 \ 000h \ 000i \ 000s \ 000t \ 000o \ 000r \ 000y) эндобдж 21 0 объект > эндобдж 24 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0005 \ 000.\ 0001 \ 000 \ 040 \ 000O \ 000l \ 000d \ 000e \ 000r \ 000 \ 040 \ 000v \ 000e \ 000r \ 000s \ 000i \ 000o \ 000n \ 000s) эндобдж 25 0 объект > эндобдж 28 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000 \ 040 \ 000I \ 000m \ 000p \ 000l \ 000e \ 000m \ 000e \ 000n \ 000t \ 000a \ 000t \ 000i \ 000o \ 000n) эндобдж 29 0 объект > эндобдж 32 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0001 \ 000 \ 040 \ 000F \ 000i \ 000e \ 000l \ 000d \ 000s) эндобдж 33 0 объект > эндобдж 36 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0002 \ 000 \ 040 \ 000O \ 000u \ 000t \ 000p \ 000u \ 000t \ 000 \ 040 \ 000f \ 000u \ 000n \ 000c \ 000t \ 000i \ 000o \ 000n \ 000s ) эндобдж 37 0 объект > эндобдж 40 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000.\ 0003 \ 000 \ 040 \ 000L \ 000o \ 000g \ 000i \ 000c \ 000a \ 000l \ 000 \ 040 \ 000f \ 000u \ 000n \ 000c \ 000t \ 000i \ 000o \ 000n \ 000s \ 000 \ 040 \ 000a \ 000n \ 000d \ 000 \ 040 \ 000v \ 000a \ 000r \ 000i \ 000o \ 000u \ 000s \ 000 \ 040 \ 000c \ 000h \ 000e \ 000c \ 000k \ 000s) эндобдж 41 0 объект > эндобдж 44 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0004 \ 000 \ 040 \ 000S \ 000t \ 000r \ 000i \ 000n \ 000g \ 000 \ 040 \ 000F \ 000u \ 000n \ 000c \ 000t \ 000i \ 000o \ 000n \ 000s ) эндобдж 45 0 объект > эндобдж 48 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0005 \ 000 \ 040 \ 000L \ 000a \ 000n \ 000g \ 000u \ 000a \ 000g \ 000e \ 000- \ 000s \ 000e \ 000n \ 000s \ 000i \ 000t \ 000i \ 000v \ 000e \ 000 \ 040 \ 000a \ 000b \ 000b \ 000r \ 000e \ 000v \ 000i \ 000a \ 000t \ 000i \ 000o \ 000n \ 000s) эндобдж 49 0 объект > эндобдж 52 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000.\ 0006 \ 000 \ 040 \ 000A \ 000l \ 000i \ 000a \ 000s \ 000e \ 000s) эндобдж 53 0 объект > эндобдж 56 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0007 \ 000 \ 040 \ 000F \ 000o \ 000r \ 000m \ 000a \ 000t \ 000t \ 000i \ 000n \ 000g \ 000 \ 040 \ 000d \ 000a \ 000t \ 000e \ 000s ) эндобдж 57 0 объект > эндобдж 60 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0008 \ 000 \ 040 \ 000F \ 000o \ 000r \ 000m \ 000a \ 000t \ 000t \ 000i \ 000n \ 000g \ 000 \ 040 \ 000n \ 000a \ 000m \ 000e \ 000s ) эндобдж 61 0 объект > эндобдж 64 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0009 \ 000 \ 040 \ 000F \ 000o \ 000r \ 000m \ 000a \ 000t \ 000t \ 000i \ 000n \ 000g \ 000 \ 040 \ 000n \ 000a \ 000m \ 000e \ 000s \ 000 \ 040 \ 000 \ 050 \ 000c \ 000o \ 000n \ 000t \ 000.\ 000 \ 051) эндобдж 65 0 объект > эндобдж 68 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0001 \ 0000 \ 000 \ 040 \ 000F \ 000o \ 000r \ 000m \ 000a \ 000t \ 000t \ 000i \ 000n \ 000g \ 000 \ 040 \ 000n \ 000a \ 000t \ 000b \ 000i \ 000b \ 000 \ 040 \ 000k \ 000e \ 000y \ 000s) эндобдж 69 0 объект > эндобдж 72 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0001 \ 0001 \ 000 \ 040 \ 000O \ 000u \ 000t \ 000p \ 000u \ 000t \ 000 \ 040 \ 000f \ 000u \ 000n \ 000c \ 000t \ 000i \ 000o \ 000n \ 000s \ 000 \ 040 \ 000 \ 050 \ 000c \ 000o \ 000n \ 000t \ 000i \ 000n \ 000u \ 000e \ 000d \ 000 \ 051) эндобдж 73 0 объект > эндобдж 76 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0001 \ 0002 \ 000 \ 040 \ 000F \ 000o \ 000r \ 000m \ 000a \ 000t \ 000t \ 000i \ 000n \ 000g \ 000 \ 040 \ 000t \ 000i \ 000t \ 000l \ 000e \ 000, \ 000 \ 040 \ 000b \ 000o \ 000o \ 000k \ 000t \ 000i \ 000t \ 000l \ 000e \ 000, \ 000 \ 040 \ 000e \ 000t \ 000c \ 000.) эндобдж 77 0 объект > эндобдж 80 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0001 \ 0003 \ 000 \ 040 \ 000E \ 000l \ 000e \ 000c \ 000t \ 000r \ 000o \ 000n \ 000i \ 000c \ 000 \ 040 \ 000P \ 000u \ 000b \ 000l \ 000i \ 000s \ 000h \ 000i \ 000n \ 000g \ 000 \ 040 \ 000I \ 000n \ 000f \ 000o \ 000r \ 000m \ 000a \ 000t \ 000i \ 000o \ 000n) эндобдж 81 0 объект > эндобдж 84 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0001 \ 0004 \ 000 \ 040 \ 000E \ 000n \ 000t \ 000r \ 000y \ 000 \ 040 \ 000t \ 000y \ 000p \ 000e \ 000s) эндобдж 85 0 объект > эндобдж 88 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0001 \ 0004 \ 000. \ 0001 \ 000 \ 040 \ 000R \ 000e \ 000g \ 000u \ 000l \ 000a \ 000r \ 000 \ 040 \ 000T \ 000y \ 000p \ 000e \ 000 с) эндобдж 89 0 объект > эндобдж 92 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000.\ 0001 \ 0004 \ 000. \ 0002 \ 000 \ 040 \ 000T \ 000y \ 000p \ 000e \ 000 \ 040 \ 000A \ 000l \ 000i \ 000a \ 000s \ 000e \ 000s) эндобдж 93 0 объект > эндобдж 96 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0001 \ 0005 \ 000 \ 040 \ 000M \ 000o \ 000n \ 000t \ 000h \ 000 \ 040 \ 000A \ 000b \ 000b \ 000r \ 000e \ 000v \ 000i \ 000a \ 000t \ 000i \ 000o \ 000n \ 000s) эндобдж 97 0 объект > эндобдж 100 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0001 \ 0006 \ 000 \ 040 \ 000J \ 000o \ 000u \ 000r \ 000n \ 000a \ 000l \ 000 \ 040 \ 000A \ 000b \ 000b \ 000r \ 000e \ 000v \ 000i \ 000a \ 000t \ 000i \ 000o \ 000n \ 000s) эндобдж 101 0 объект > эндобдж 104 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000.\ 0001 \ 0006 \ 000. \ 0001 \ 000 \ 040 \ 000P \ 000h \ 000y \ 000s \ 000i \ 000c \ 000s \ 000 \ 040 \ 000a \ 000n \ 000d \ 000 \ 040 \ 000a \ 000s \ 000t \ 000r \ 000o \ 000n \ 000o \ 000m \ 000y) эндобдж 105 0 объект > эндобдж 108 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0001 \ 0006 \ 000. \ 0002 \ 000 \ 040 \ 000S \ 000u \ 000p \ 000p \ 000l \ 000e \ 000m \ 000e \ 000n \ 000t \ 000a \ 000r \ 000y \ 000 \ 040 \ 000J \ 000o \ 000u \ 000r \ 000n \ 000a \ 000l \ 000 \ 040 \ 000N \ 000a \ 000m \ 000e \ 000s) эндобдж 109 0 объект > эндобдж 112 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0001 \ 0006 \ 000. \ 0003 \ 000 \ 040 \ 000O \ 000p \ 000t \ 000i \ 000c \ 000s) эндобдж 113 0 объект > эндобдж 116 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000.\ 0001 \ 0006 \ 000. \ 0004 \ 000 \ 040 \ 000P \ 000h \ 000y \ 000s \ 000i \ 000c \ 000s \ 000 \ 040 \ 000o \ 000f \ 000 \ 040 \ 000c \ 000o \ 000n \ 000d \ 000e \ 000n \ 000s \ 000e \ 000d \ 000 \ 040 \ 000M \ 000a \ 000t \ 000t \ 000e \ 000r) эндобдж 117 0 объект > эндобдж 120 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0001 \ 0006 \ 000. \ 0005 \ 000 \ 040 \ 000S \ 000o \ 000v \ 000i \ 000e \ 000t \ 000 \ 040 \ 000a \ 000n \ 000d \ 000 \ 040 \ 000R \ 000u \ 000s \ 000s \ 000i \ 000a \ 000n \ 000 \ 040 \ 000j \ 000o \ 000u \ 000r \ 000n \ 000a \ 000l \ 000s) эндобдж 121 0 объект > эндобдж 124 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0001 \ 0007 \ 000 \ 040 \ 000M \ 000a \ 000i \ 000n \ 000 \ 040 \ 000c \ 000y \ 000c \ 000l \ 000e) эндобдж 125 0 объект > эндобдж 128 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000.\ 0001 \ 0008 \ 000 \ 040 \ 000S \ 000o \ 000r \ 000t \ 000i \ 000n \ 000g) эндобдж 129 0 объект > эндобдж 132 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0006 \ 000. \ 0001 \ 0009 \ 000 \ 040 \ 000B \ 000i \ 000b \ 000l \ 000i \ 000o \ 000g \ 000r \ 000a \ 000p \ 000h \ 000y \ 000 \ 040 \ 000l \ 000i \ 000s \ 000t) эндобдж 133 0 объект > эндобдж 136 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0007 \ 000 \ 040 \ 000C \ 000h \ 000a \ 000n \ 000g \ 000e \ 000 \ 040 \ 000H \ 000i \ 000s \ 000t \ 000o \ 000r \ 000y) эндобдж 137 0 объект > эндобдж 140 0 объект (\ 376 \ 377 \ 0008 \ 000 \ 040 \ 000I \ 000n \ 000d \ 000e \ 000x) эндобдж 141 0 объект > эндобдж 143 0 объект > транслировать xmUMo0Wxv> + d ‘۪ ^ ibJoƔj̛7sy =’ / 8OCrsSy [^ vy? ~]? Iοu: v M6N $ vAHO? ^ J˾ = Ti $ ڻ oXNxhWC88 |,/ ax? H] 2} [? v [XkQ [d ߅4 ۽ k — 4 C 돇 mm 擹 1_ 2> TUOʀC8_q ْ UT./1 k.ak`]) ΈcQWxgg% ljo r

    Призрачная половая жизнь педогенетического жука Micromalthus debilis

    Нам удалось вызвать образование взрослых особей педогенетического жука Micromalthus debilis . Термическая обработка может привести к появлению взрослых особей, которые редко встречаются в естественных и лабораторных популяциях. Термическая обработка была первоначально предложена Barber 12 ; позже Скотт 11,18 экспериментировал с колониями и получил только несколько личинок самцов и взрослых самок.Мы смогли побудить как взрослых женщин, так и мужчин. Термическая обработка — это общепризнанный метод подавления мутаций у вирусов, прокариот и эукариот 19,20,21 . Фенотип, а иногда и признаки жизненного цикла изменяются между нормальной низкой допустимой температурой и определенной высокой недопустимой температурой. Молекулярный механизм, который регулирует формирование взрослых особей у Micromalthus , возможно, приобрел миссенс-мутации, которые теперь предотвращают формирование взрослых особей при физиологических или допустимых температурах. Micromalthus — первый вид педогенетических насекомых, которые систематически подвергались воздействию определенных высокотемпературных режимов. Мы считаем правдоподобным, что метаморфоз от личинок до взрослых особей контролируется очень ограниченным числом мутировавших генов. Преждевременной активации рецептора экдизона и ультраспиракла у педогенетических личинок галлиц достаточно для индукции развития яичников в пределах личиночных возрастов 22 . Метаморфоз, регулируемый очень немногими генами, облегчил бы отбор по педогенетическому фенотипу.Можно утверждать, что высокая температура, например, в разгар лета, могла в прошлом быть естественным спусковым крючком для Micromalthus , чтобы перейти от партеногенетической части своего цикла к сексуальной части. Хотя этого нельзя исключать, известно, что повышенная температура препятствует метаморфозу личинок бабочек и жуков, а не вызывает или ускоряет его 23,24 . Температура, необходимая для развития взрослых особей, настолько высока, что приводит к серьезной гибели личинок.В среднем только одна из 315 личинок церамбикоидов пережила термическую обработку. По крайней мере, 650 личинок церамбикоидов требовалось для получения одной взрослой самки, в то время как, по оценкам, для развития одного взрослого самца потребовалось 10 000 личинок церамбикоидов. Температура, необходимая для развития взрослых особей, явно недопустима, и взрослые особи больше не являются физиологической частью жизненного цикла (рис. 1). Наши исследования подтверждают, что Micromalthus является педогенетическим видом, что согласуется с более ранней экспериментальной работой 9,10,11,12,13 .Эти данные находятся в противоречии с данными Кайля, Поллока и Нормака, а также Нормака, которые предположили, что это циклически партеногенетический вид 15,25,26 .

    Насколько информативны ошибки соотношения полов

    Micromalthus ?

    Среди необработанных педогенетических личинок преобладают самки, и это характерно для всех мест. Соотношение полов до и после термообработки существенно не изменилось. Это показывает, что сама термическая обработка не вызвала какой-либо избирательной гибели личинок по признаку пола.У спасенных взрослых призраков распределение пола опять-таки чрезвычайно предвзято по отношению к самкам, хотя и в меньшей степени, чем у личинок. Это говорит о том, что механизмы определения пола у личинок и взрослых особей различны. Случайная личинка-самец — это пережиток развития, остаток перехода от циклического партеногенеза к педогенезу. В физиологических условиях редкие личинки-самцы не развиваются в куколки или взрослых особей, а погибают как личинки. Соотношение полов у личинок не имеет функционального значения и является артефактом, тогда как соотношение полов взрослых призраков может отражать соотношение полов, которое действовало до того, как вид стал обязательно педогенетическим.Наблюдаемые вариации соотношения полов у взрослых призраков в разных местах, в отличие от личинок, могут указывать на генетическую изоляцию педогенетических популяций и вытекающие из этого стохастические различия в степени исследованности взрослых призраков.

    Существует ряд объяснений предвзятого соотношения полов, особенно для видов, которые живут в гниющей древесине или других замкнутых средах, как в случае с Micromalthus , где взаимодействие между родственниками может быть важным 17 .

    Во-первых, местное соревнование самцов (LMC) выбирает соотношение полов, предвзятое по отношению к самкам, когда родственные самцы (, т. Е. братьев или сводных братьев) соревнуются за оплодотворение своих сестер 27 . Спасая взрослых и наблюдая за их поведением, кажется маловероятным, что LMC была источником выбора соотношения полов у Micromalthus . Наиболее важно то, что самки избегают спаривания с родственниками, демонстрируют поведение отторжения и с меньшей вероятностью садятся на самцов из того же бревна, что снижает LMC.Самцы обнажают свой эдеагус, как только они выходят из стадии куколки, и, несмотря на то, что они окружены самками из того же участка, с которым они, вероятно, связаны, их игнорируют; Затем они совершают короткий перелет к новому участку неродственных самок (таким образом подтверждая гипотезу выбора самок). Кроме того, предварительное расселение самцов ограничивает любой эффект LMC либо до частичного LMC, либо до его полного улучшения, если все вязки находятся вдали от натального журнала, так что родственники редко будут участвовать в соревновании.

    Во-вторых, конкуренция за местные ресурсы (LRC) также может быть выбрана для предвзятого соотношения полов, хотя обычно LRC предполагает конкуренцию между женщинами за ресурсы. LRC следует выбирать соотношение полов, ориентированное на мужчин, что явно не характерно для взрослых особей Micromalthus .

    В-третьих, расширение местных ресурсов (LRE) может выбирать для предвзятого соотношения полов, если потомство одного пола повышает приспособленность родителей. Поедая свою мать, вероятно, возникнет конкуренция между личинками-самками, что противоречит интерпретации LRC.Таким образом, биология Micromalthus , включая наши новые наблюдения за брачным поведением взрослых, не предлагает сильной поддержки LMC, LRC или LRE, формирующих наблюдаемые модели распределения пола.

    У большинства нециклически гаплодиплоидных видов соотношение полов во взрослом состоянии меняется. Гаплодиплоидные виды с историей социальной жизни почти все предвзято относятся к самкам. Часто самки напрямую контролируют распределение пола. Большинство несоциальных гаплодиплоидных видов являются паразитоидами, и их соотношение полов колеблется от сильно ориентированного на самцов 28 до сильно предвзятого к самкам 29 .У диплодиплоидных видов, размножающихся половым путем, предубеждения в соотношении полов внутреннего генетического происхождения (например, не из-за манипуляций со стороны эндосимбионтов) крайне редки 30 . Однако гаплодиплоидные циклически партеногенетические виды часто упускаются из виду. Уэст 17 предположил, что гаплодиплоидные циклические партеногены, в частности, могут оказаться полезными для проверки теории распределения пола Дюзинга и Фишера. В эту особую группу попадают моногональные коловратки, цецидомиидные мошки, цинипидные осы и Micromalthus .Несмотря на таксономическое несоответствие, эти группы демонстрируют сходные жизненные циклы. На примере коловраток, лабораторные и полевые исследования населения выявили равномерное соотношение полов для гаплодиплоидных циклических партеногенов с течением времени 31 . Ошибки в гаплодиплоидных циклических партеногенах могут быть более информативными, чем принято считать. Три канонических объяснения смещения соотношения полов, подробно описанные выше, по-видимому, не применимы к гаплодиплоидным циклическим партеногенам и Micromalthus . Так что же могло вызвать отклонение соотношения полов у взрослых особей Micromalthus ?

    Брачное поведение взрослых-призраков указывает на древнюю смену пола и роли.Самки инициировали взаимодействие, соревновались за партнеров и даже захватывали мужские гениталии своими гениталиями, что в одном случае привело к травме самцов. Соревнование между самками и самками также было более распространенным, когда были доступны предпочтительные партнеры (

    , т.е. самцов из разных участков). Таким образом, самки конкурируют с самками и избирательны, избегая (предположительно) родственников. Это еще один явный признак разборчивых гаплодиплоидных самок, вероятно избегающих инбридинга 32 . Однако женский танец, который мы считали своего рода сигнальным поведением «родства», чаще возникал у самцов из одного и того же участка, что свидетельствует о том, что это не ухаживание, а, скорее, другая форма поведения отвержения со стороны самок.Таким образом, наши результаты не только проливают свет на предвзятость соотношения полов у Micromalthus , но также подтверждают, что половые роли не обязательно фиксированы, и подтверждают теорию систем спаривания, которая предсказывает, что и самцы, и самки могут в некоторой степени сочетать в себе выбор и конкурентоспособность по сравнению с самцами 33,34 .

    Рудигиализация взрослых и потеря полового размножения

    Действительно ли взрослые люди являются призраками и наблюдаемое поведение является древним? Некачественная асексуальность или редкий пол у преобладающих бесполых видов могут нарушить любую интерпретацию результатов.В большинстве случаев загадочное или случайное половое размножение происходит с участием телитоков, утративших половое размножение. У циклически партеногенетических видов, становящихся педогенетическими, потеря бывает двоякой: половой и взрослой стадии. В циклическом партеногенезе эти два явления связаны, однако у неотенических видов эти два явления независимы друг от друга. Например, у саламандр-амбистомид, таких как мексиканский аксолотль, у обоих полов потеряна только стадия имаго. Половое размножение продолжается на ювенильной стадии, в данном случае в водной среде, а не в наземной.У большинства насекомых с перекрученными крыльями (Strepsiptera) или некоторых щитовок и мучнистых червецов (Hemiptera) типичная взрослая стадия утрачена только для самок, но не для самцов, и половое размножение стало асимметричным в том смысле, что взрослые самцы спариваются с самками как личинки. или куколки. В Micromalthus половое воспроизводство и (практически) взрослые стадии были потеряны для обоих полов.

    Очень важен механизм потери полового размножения 35 .Диплодиплоидные циклически партеногенетические тли могут терять пол из-за изменений генов периодичности или генов, которые регулируют гормональную экспрессию 36 . Это может произойти настолько легко, что треть видов тлей может быть комбинацией циклически партеногенетических и облигатно бесполых популяций 37 . Диплодиплоидные циклически партеногенетические водоросли (Cladocera) теряют пол либо в результате гибридогенеза, либо через ген-супрессор мейоза. В частности, в случае гена-супрессора мейоза секс может вернуться в любое время и после этого снова исчезнуть.Ген-супрессор мейоза, зависимый от пола, не может поддерживать себя в гаплодиплоидных организмах 38,39 , что исключает любой из этих механизмов для Micromalthus .

    Анализ взрослых призраков свидетельствует о том, что Micromalthus больше не может вернуться к половому размножению. Взрослые особи физиологически неспособны к воспроизводству 10,11,12,18 . Это было экспериментально подтверждено и подтверждено много раз 9,40,41 . В первоначальном описании вида, основанном на взрослых особях, ЛеКонт назвал весь вид слабым и плохо развитым 42 .Это убедительно свидетельствует о том, что Micromalthus давно потерял половую часть своего жизненного цикла, что привело к огромной дегенерации у редких взрослых призраков. Сохранение бесполых самцов у видов, в остальном бесполых, хорошо задокументировано, но сохранение стерильных самок до сих пор игнорировалось 40 . Hebert 40 считает производство бесплодных самок «беспрецедентным». Действительно, произведенные нами взрослые самки, которые редко наблюдаются в полевых условиях (DKY), являются взрослыми особями-призраками.Хорошо известно, что имаго полностью исчезли у многих ныне облигатных партеногенетических видов 43 . Это также указывает на то, что редкие эпизоды полового размножения вряд ли будут способствовать выживанию наблюдаемого поведенческого паттерна или Micromalthus как вида.

    Когда виды насекомых, размножающихся половым путем, заражаются индуцирующим партеногенез Wolbachia , наблюдается следование самцов 44,45,46 . Характерным признаком распада сексуальной функциональности у Wolbachia -индуцированных телитокозных самок паразитоидных ос является дегенерация сперматеек 47,48,49 , как мы обнаружили у взрослых особей Micromalthus .Степень рудезиализации зависит от возраста ассоциации. Когда Wolbachia -инфицированных самок телитокуса различных видов обрабатывают антибиотиками или теплом для уничтожения Wolbachia , наблюдается континуум от полностью функциональных самцов до отсутствия самцов 50 . Кажется, что поведенческие функции, такие как распознавание партнера, теряются до того, как исчезнут физиологические функции, такие как мужская фертильность, или мужское производство полностью прекратится. В Micromalthus поведенческие функции, включая распознавание партнера, все еще сильно выражены, тогда как физиологические функции сильно дегенерировали или полностью утрачены.Это говорит о том, что либо взрослые призраки стали вести себя позже, чем мы предполагаем, либо стоимость сохранения такого поведения различна для каждого вида; мы предпочитаем последнее объяснение. Почти нейтральные поведенческие черты могут подвергаться очень небольшому распаду даже после длительных периодов расслабленного или отсутствующего отбора 43,46 .

    Объединяющие признаки

    Micromalthus и гаплодиплоидных циклических партеногенов

    Поведение потерянных взрослых может быть реконструировано только в очень небольшом временном окне.Согласно данным окаменелостей (триунгулины, сохранившиеся в янтаре), циклическому партеногенезу в Micromalthus 51,52 насчитывается не менее 112 миллионов лет. Возраст педогенеза у мошек цецидомиид оценивается в 30 миллионов лет на основе мексиканского янтаря и 145 миллионов лет на основе канадского янтаря 53 . О Micromalthus , когда были потеряны функциональные взрослые, пока сказать нельзя. У циклически партеногенетической коловратки Branchionus calcyciforus потерю пола и взрослых особей можно легко вызвать экспериментально в лаборатории через 20–30 поколений 39 .Для насекомых это кажется гораздо более медленным процессом. Несколько видов гаплодиплоидных, циклически партеногенетических цецидомиидных мошек, обитающих в гниющей коре деревьев и грибах, и цинипидных ос, обитающих в галлах, давно утратили половое размножение и взрослый фенотип. Два вида, мошка Heteropeza pygmaea 54,55,56 и желчная оса Andricus quadrilineatus Hartig / A. kiefferi Pigeot 57,58 , похоже, находятся на аналогичном стыке в эволюции своей жизни. циклы.Оба вида демонстрируют поразительное сходство с жизненным циклом Micromalthus . Оба вида производят взрослых особей лишь изредка, в основном после искусственной индукции. Они демонстрируют гемоцелезное развитие личинок внутри гемоцели материнских личинок, тогда как у Micromalthus проявляется матрифагия. Эти два вида имеют крайнюю предрасположенность к самкам, а взрослые особи становятся все более бесплодными, в то время как в Micromalthus половое размножение полностью исчезло.Оба вида также демонстрируют большие региональные различия в количестве и относительной стерильности взрослых особей. Комары, оса и жук ( Micromalthus ) уже претерпели функциональный переход от циклически партеногенетического метаморфоза к педогенетическому жизненному циклу. Любые имаго индуцируются в педогенетических личинках и развиваются из педогенетических личинок. Мы предполагаем, что соотношение полов у этих взрослых призраков является результатом педогенетического развития. Мы также предполагаем, что все гаплодиплоидные циклически партеногенетические виды, которые переходят к педогенетическому образу жизни, будут демонстрировать женскую предвзятость.

    Вероятная роль эндосимбионтов в

    Micromalthus

    Возможно, наблюдаемая нами смена половых ролей была результатом репродуктивных паразитов 59,60,61 . Искажение соотношения полов, вызванное бактериями или паразитами, которых часто называют эндосимбионтами, широко распространено у членистоногих; хорошо известны примеры микробов, которые манипулируют размножением своих гаплодиплоидных жуков-хозяев 62,63 .

    Rickettsia bellii эндосимбионтов были обнаружены у всех проанализированных личинок, что позволяет предположить, что они могут выполнять облигатную полезную роль у личинок, которая может включать восстановление диплоидии в ооцитах во время партеногенетического размножения, как у псоцидов 64 .Если предположить, что Rickettsia действительно восстанавливают диплоидию у Micromalthus , тогда тепло, необходимое для индукции самцов, должно быть достаточно высоким, чтобы вывести из строя или убить Rickettsia , чтобы могли развиться гаплоидные личинки самцов. Действительно, Rickettsia не может быть обнаружена у взрослых. Однако это также предполагает, что текущая форма педогенеза Micromalthus должна отличаться от предковой, голоциклической формы педогенеза, которая, как мы предполагаем, не была инфицирована Rickettsia .В качестве альтернативы, эти Rickettsia могут принести пользу, отличную от восстановления диплоидии. Интересно, что R. bellii было связано с убийством самцов жука-бупрестида 63 .

    Wolbachia pipientis эндосимбионтов были обнаружены только у 5% личинок, что свидетельствует против полезной ассоциации или все еще функциональной ассоциации. Отсутствие бактерий у взрослых особей, вероятно, является прямым следствием термической обработки и, как таковой, эпифеноменом.Бактерия Wolbachia , похоже, сейчас находится на траектории случайного исчезновения. Вполне возможно, что инфекция Wolbachia является следом события искажения соотношения полов, хотя не исключается, что эти Wolbachia могли быть полезны для взрослой стадии когда-то, а теперь являются излишними. У бабочек Acraea уничтожение самцов Wolbachia может оказывать такое давление отбора на вид, что эндосимбионты могут вызывать изменение роли пола 65 .Давление отбора может привести у некоторых видов к быстрому подавлению эффекта уничтожения самцов 66 , в то время как другие виды неспособны ответить на эффект уничтожения самцов 67 . Вызванная Wolbachia крайняя нехватка самцов у голубой лунной бабочки, Hypolimnas bolina , ускоряет распущенность самок 68 . Мы видим в Micromalthus взрослых-призраков сильную поддержку выбора партнера, который различает на основе родственного отбора, несмотря на крайнюю нехватку самцов.Это говорит о том, что у данного вида реакция самок на нехватку самцов непредсказуема. Эндосимбионты могут объяснять женскую предвзятость и поведение у Micromalthus , когда это был вид, размножающийся половым путем; эндосимбионты не могут объяснить наблюдаемое соотношение полов у взрослых призраков.

    В отличие от предубеждений, контролируемых механизмами распределения по полу и отбором, предвзятость по поводу женского пола взрослых призраков, вероятно, является временным побочным продуктом бесполого размножения на юношеской стадии.

    Реконструируя взрослых особей древнего гаплодиплоидного циклического партеногена, мы показали, что у них сильно смещено соотношение полов у взрослых призраков.Наши поведенческие наблюдения за этими взрослыми-призраками показывают замечательное поведение смены пола и ролей. Мы выдвигаем гипотезу, что наблюдаемое смещенное соотношение полов к самкам является физиологическим следствием педогенетических трудностей получения потомства мужского пола, вероятно, характерного для всех гаплодиплоидных циклических партеногенетических видов, переходящих к педогенетическому жизненному циклу. Не связанное с женской предвзятостью взрослых, вызванных в настоящее время, выздоровевшее поведение является следствием древнего предвзятого отношения полов.Это древнее женское предубеждение предшествовало потере взрослых и могло быть вызвано искажением соотношения полов, убивающим мужчин.

    Границы | Анализ протеома и картирование эпитопа в коммерческом продукте из пшеницы с пониженным содержанием глютена

    Введение

    Продукты из пшеницы составляют около 20% диетических калорий и белков, потребляемых во всем мире (1). Однако у восприимчивых людей белки пшеницы могут вызывать ряд нарушений здоровья, включая целиакию (CD), аллергию на пшеницу (WA) и нечувствительность к пшенице без целиакии (NCWS).Аллергенные белки пшеницы, вызывающие эти неблагоприятные иммунные реакции, были сопоставлены со специфическими генами Международным консорциумом по секвенированию генома пшеницы (IWGSC) и соавторами (2, 3). CD возникает, когда диетический глютен достигает тонкого кишечника генетически предрасположенных людей и стимулирует аутоиммунный ответ, приводящий к локальному повреждению и последующим симптомам (4). WA, а также пекарская астма (БА) и анафилаксия, вызванная физическими упражнениями, вызванная пшеницей (WDEIA), включают IgE-опосредованный иммунный ответ на белки пшеницы, которые либо попадают в организм с пищей, либо возникают при контакте с кожей или вдыхании.Хотя эти нарушения могут быть вызваны белками глютена, у БА обычно есть триггер, не связанный с белками глютена (5, 6). NCWS диагностируется, когда симптомы развиваются в ответ на потребление зерна злаков, но серологические тесты отрицательны как для аутоиммунного ответа, так и для IgE-опосредованного аллергического ответа, что противопоказано, соответственно, CD и WA (4, 7). Хотя термин «нечувствительность к глютену без глютена» имеет историю использования (8), NCWS лучше отражает неглютеновые белки пшеницы (9) или небелковые компоненты пшеницы, такие как FODMAP (10), которые вызывают аналогичные симптомы (7).По оценкам, CD поражает ~ 0,7–1,4% мирового населения (11, 12), WA — около 0,33–0,75% среди взрослых (13–15), а NCWS более вариабельна, но с оценкой распространенности от 0,5 до 13% (16 , 17). В то время как белки глютена являются установленными антигенами для людей с CD, а также способствуют возникновению различных аллергий, белки пшеницы, не содержащие глютена, являются потенциальными аллергенами и антигенами, способными вызывать WA, BA, NCWS, а также CD (3, 6, 18).

    Единственным эффективным средством лечения этих иммунных расстройств, связанных с пшеницей, является исключение из рациона пшеницы и родственных ей сельскохозяйственных культур.Это увеличивает спрос на продукты питания без глютена, которые напоминают традиционные продукты из пшеницы, однако пшеница заменяется ингредиентами-заменителями, которые содержат крахмал, но не содержат глютена или других белков злаков. Однако отсутствие белков глютена может повлиять на консистенцию, текстуру или вкус продуктов без глютена, а ингредиенты-заменители обычно имеют более высокую стоимость и требуют изменения рецепта (19).

    Несколько подходов были направлены на снижение содержания глютена при сохранении пользы для здоровья цельного зерна или сохранении уникальной функциональности злаков.Один из подходов заключается в использовании этилметансульфонатного (EMS) мутагенеза для получения случайных мутаций в генетическом материале путем замены нуклеотидов. EMS часто используется в качестве технологической основы для «Нацеливания на индуцированные локальные поражения в геномах» (TILLING), который доказал свою эффективность при нацеливании на ключевые ферменты пшеницы с целью улучшения состава крахмала (20). Его применяли к генам глютена пшеницы (21), но его ставит под сомнение огромное количество потенциальных аллергенов и тот факт, что даже низкие уровни экспрессируемых глиадинов могут вызывать CD (22).В ячмене сверхнизкие уровни глютена (<5 мг / кг) были достигнуты в сорте Kebari ® за счет использования традиционных методов селекции для комбинирования сортов ячменя, полученных из мутагенеза, с пониженным содержанием и составом гордеина (23, 24). Попытки разработать низкоаллергенный сорт пшеницы были нацелены на гены, которые либо напрямую демонстрируют сильный иммунный ответ (25), либо осуществляют эпигенетическую регуляцию нижестоящих генов белка глютена (26), а также использовали естественные варианты нулевого аллеля ( 27), CRISPR-Cas9 (28) и RNAi (29).Распространенным фенотипом является то, что подавление одного или подмножества генов, кодирующих белок глютена, сопровождается компенсаторной активацией альтернативных запасных белков (30–34) с изменением технологических свойств (35). Однако технология определения характеристик глютена в продуктах из пшеницы является предметом постоянных исследований (36), как и целевое удаление CD-реактивных эпитопов из пшеницы (37).

    Недавно был выпущен продукт с пониженным содержанием глютена, который, как утверждается, является сортом пшеницы без ГМО, который содержит «» на 65% меньше аллергенной глютена, чем традиционная мука .Уточняется, что продукт « разработан для людей с чувствительным желудком, у которых нет аллергии на глютен или пшеницу, но которые хотят уменьшить количество глютена в своем рационе. » (38) и был разработан с использованием бокса проламина пшеницы. мутанты связывающего фактора (PBF) (21, патенты США 9 150 839, 10412 909 и 10750 690). Нет сообщений о протеоме и общих характеристиках белков, присутствующих в муке с пониженным содержанием глютена, по сравнению с коммерческими сортами пшеницы.

    Пшеница имеет более 800 генов с потенциально аллергенными доменами, и около 356 генов, кодирующих эталонные пищевые аллергены, включены в «IWGSC v1.0 справочная карта аллергенов »(3). Сюда входят глиадины (включая α-, β-, γ- и ω-подтипы) и глютенины (включая низкомолекулярные (LMW) глютенины и высокомолекулярные (HMW) субъединицы глютенина), а также авениноподобные белки (ALPs). ), ингибиторы α-амилазы / трипсина (ATI) и белки-переносчики липидов (LTP) (3). Белки глютена содержат специфические эпитопы, которые дезамидируются, распознаются и представляются антигенпрезентирующими клетками MHC-II в желудочно-кишечном тракте, тем самым инициируя аутоиммунный ответ, характерный для CD (39).Канонические белки глютена, глиадины и глютенины, вместе составляют около 80% белка, содержащегося в эндосперме пшеницы, и наиболее значительными факторами токсичности CD являются α-глиадины хромосомы 6D и ω-глиадины хромосомы 1D (ω 1, 2), за которым следуют низкомолекулярные глютенины и γ-глиадин (40). Поэтому важно точно охарактеризовать группы белков и эпитопы при количественном определении «аллергенной глютена» в новых продуктах. Настоящее исследование направлено на понимание изменений протеома в этом пшеничном продукте с пониженным содержанием глютена с использованием ЖХ-МС / МС по сравнению со смешанным контролем из пшеницы.

    Материалы и методы

    Подготовка образца

    GoodWheat ™ (GW) пшеничная мука из белого хлеба была закуплена непосредственно у Arcadia Bioscience (Дэвис, Калифорния, США). Реплики GW и контрольного образца муки из смешанной пшеницы (MW) взвешивали в четырех экземплярах. Контроль MW состоял из равных частей муки из сортов пшеницы: Alsen, Xiayan, Pastor, Westonia, Baxter, Chara, Yitpi, AC Barrie и Volcania; выбран, чтобы представить разнообразие пшеницы, используемой в коммерческом производстве.Белки глютена были специально обогащены из пшеницы с использованием растворителя изопропанол / дитиотреитол (IPA / DTT), как описано ранее (41). Муку (50 мг) отвешивали в микропробирку на 1,5 мл и добавляли 500 мкл (10 мкл / мг) 55% IPA / 2% DTT при перемешивании на вортексе до тех пор, пока мука полностью не смешалась с растворителем. Затем пробирки обрабатывали ультразвуком в течение 5 минут при комнатной температуре и инкубировали в термомиксере (400 об / мин, 30 минут, 50 ° C). Пробирки центрифугировали 15 мин при 20 800 × g. Растворы центрифугировали 15 мин при 20,800 × g.Белковые экстракты (100 мкл) добавляли к фильтрам с отсечкой по молекулярной массе 10 кДа (Merck, Bayswater, Australia). Белок на фильтре дважды промывали буфером, состоящим из 8 М мочевины в 0,1 М трис-HCl (pH 8,5), с центрифугированием в течение 15 мин при 20 800 × g. Йодацетамид (25 мМ; 100 мкл), приготовленный в 8 М мочевине и 100 мМ Трис-HCl, добавляли к фильтрам для алкилирования цистеина с инкубацией в темноте в течение 20 минут перед центрифугированием в течение 10 минут при 20 800 × g. Буфер заменяли 100 мМ бикарбонатом аммония (pH 8.0) двумя последовательными этапами промывки / центрифугирования. Фильтры переносили в свежие пробирки для сбора и переваривающий фермент, трипсин или химотрипсин (Promega, NSW, Австралия), готовили в концентрации 10 мкг / мл в 100 мМ бикарбонате аммония, 50 мМ хлориде кальция и 200 мкл добавляли в каждый фильтр с инкубация 16 ч при 37 ° С. Фильтры центрифугировали 15 мин при 20 800 × g. Фильтры промывали 200 мкл 100 мМ бикарбоната аммония, а затем объединенные фильтраты лиофилизировали.

    Discovery Proteomics

    Перевариваемые образцы восстанавливали в 100 мкл 1% муравьиной кислоты и пептиды (1 мкл) хроматографически разделяли на Ekspert nanoLC415 (Eksigent, Dublin, CA, USA), соединенном с TripleTOF 6600MS (SCIEX, Redwood City, CA, СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ). Пептиды обессоливали в течение 5 мин на колонке-ловушке ChromXP C18 (3 мкм, 120 Å, 10 × 0,3 мм) при скорости потока 0,1% муравьиной кислоты 10 мкл / мин и разделяли на ChromXP C18 (3 мкм, 120 мкм). Å, 150 × 0,3 мм) при скорости потока 5 мкл / мин.Используемые растворители: (А) 5% ДМСО, 0,1% муравьиной кислоты, 94,9% воды и (В) 5% ДМСО, 0,1% муравьиной кислоты, 90% ацетонитрила, 4,9% воды. Был использован линейный градиент от 3 до 25% растворителя B в течение 68 минут, затем 25–35% B в течение 5 минут, увеличение до 80% B в течение 2 минут, выдержка в течение 2 минут при 90% B, возврат к 3% B более 1 мин и 8 мин повторного уравновешивания. Элюент из ВЭЖХ был напрямую связан с источником DuoSpray TripleTOF 6600 MS. Напряжение ионного распыления было установлено на 5 500 В; газ завесы был установлен на 138 кПа (20 фунтов на квадратный дюйм), а газ источника ионов 1 и 2 (GS1 и GS2) был установлен на 103 и 138 кПа (15 и 20 фунтов на квадратный дюйм).Нагреваемый интерфейс был установлен на 150 ° C. Файлы данных обнаружения отдельных технических копий GW и MW образцов, расщепленных трипсином или химотрипсином, были проанализированы с использованием ProteinPilot v5.0.3 с алгоритмом Paragon (SCIEX) по файлу FASTA, состоящему из белков племени Triticeae из UniProt-KB [доступ 02/2021 дополнен с дополнительными транслированными моделями генов из сборки IWGSC RefSeq v1 (2), а также с моделями, перечисленными в общем репозитории дополнительных белков (thegpm.org/crap)].Файл FASTA содержал 817 698 белковых последовательностей.

    Таргетированная протеомика

    Восстановленные и алкилированные триптические и химотриптические пептиды были хроматографически разделены на системе Exion LC-40AD UHPLC (SCIEX) и проанализированы на масс-спектрометре 6,500+ QTRAP (SCIEX). Сбор данных осуществлялся с помощью экспериментов по сканированию запланированного множественного мониторинга реакций (sMRM) с использованием окна обнаружения 60 с для каждого перехода MRM и времени цикла 0,3 с.

    Для создания метода MRM в Skyline был импортирован файл FASTA, содержащий все идентифицированные белки (42), все полностью триптические пептиды размером от 6 до 30 аминокислот были выбраны, а повторяющиеся пептиды удалены.Все полностью химотриптические пептиды, содержащие от 6 до 30 аминокислот, были отобраны в независимых экспериментах. Первоначально пять переходов были отобраны для каждого пептида в незапланированном анализе MRM и оценены как на GW, так и на MW образцах. Те пептиды, у которых по меньшей мере три перехода воспроизводимо совместно элюировались при ожидаемом времени удерживания (RT) без интерференции, затем отбирались для включения в запланированные анализы MRM. Они были разделены на несколько отдельных списков переходов, так что все данные были записаны с окном обнаружения 60 с и максимальным временем цикла 0.3 с. Ионы-предшественники, у которых три или более переходов имели постоянное RT, интенсивность более 1000 гц и отношение сигнал / шум (S / N)> 5, были сохранены, и три наиболее интенсивных перехода были выбраны для последующих количественных экспериментов. Таким образом, было отслежено в общей сложности 768 триптических и 175 химотриптических пептидов, которые были уникальными для одного белка, а также 263 триптических и 109 химотриптических пептидов, которые присутствовали более чем в одном белке. Данные были собраны на четырех технических повторностях GW и MW.Данные площади пиков пептидов были экспортированы из Skyline и проанализированы (Graphpad Prism v8).

    Чтобы количественно оценить относительное содержание отдельных групп белков глютена, были суммированы площади пиков как уникальных, так и неуникальных пептидов. Белки были картированы в геном пшеницы с использованием функции tBLASTn программы CLC Main Workbench v20.0.4 (Qiagen, Дания), и множественное картирование белков на один и тот же ген интерпретировалось как разные аллели одного и того же гена. Определенные количественно пептиды MRM затем распределяли по группам белков в соответствии с белками, в которых они были обнаружены.Пептиды, входящие в состав белков из нескольких групп, были помечены как множественные / смешанные. Значимость и кратность изменения этих групп белков графически отображали с помощью программного обеспечения VolcaNoseR (43).

    Высокое сходство последовательностей между белками глютена означало, что наблюдались многие пептиды, общие для нескольких белков глютена, что делало невозможным количественное определение всех белков с использованием уникальных пептидов. Чтобы преодолеть это, пептиды, количественно определенные с помощью MRM, были отнесены к группам белка глютена, которые были количественно определены с использованием уникальных пептидов для GW и MW, что выявило относительное количество групп белка в этих образцах.Для этого все количественно определенные пептиды были сопоставлены с геномом пшеницы (2) и с использованием комбинации выравнивания последовательностей, присутствия доменов Pfam (PF13016, PF03157, PF00234) и ручной проверки совпадающих белков были отнесены к одному из следующие группы белков: α-глиадины, ALP, ATI, γ-глиадин, HMW-GS, LMW-GS и ω-глиадины. Если белки содержали два или более пептидов из нескольких групп белков, они были определены как «смешанные». Хотя ATI и ALP не являются каноническими белками глютена, некоторые из ALP могут функционировать как белки-резервуары питательных веществ, и ATI проявляют некоторую аллергенность, что делает их актуальными для данного исследования.

    Для количественной оценки групп белков отслеживаемые пептиды были сопоставлены с идентифицированными последовательностями белков глютена и семействами белков, не относящихся к глютену, с иммуно-реактивными свойствами с использованием 100% совпадения последовательностей в алгоритме поиска Motif в CLC Genomic Workbench v21.0.3 (Qiagen, Дания) , и были идентифицированы специфичные для группы пептиды. Количественные данные по всем химотриптическим и триптическим пептидам были объединены, и количество каждого пептида в каждой повторности было нормализовано к среднему значению, наблюдаемому во всех повторностях как для GW, так и для MW.Графики были созданы в Graphpad Prism v8.

    Анализ обогащения генов

    Анализ обогащения

    GO был проведен для проверки подавления определенных классов белков в GW. Те белки, которые присутствуют как в GW, так и в MW, были исключены, так что только белки, уникальные для GW или MW, были проанализированы на предмет обогащения GO. Затем GW- или MW-специфические белки были картированы в геном пшеницы с помощью CLC Genomic Workbench v21.0.3 (Qiagen, Дания), и списки их соответствующих идентификаторов генов пшеницы были вставлены в g: Profiler (biit.cs.ut.ee/gprofiler/gost) для анализа перепредставленности GO.

    Картирование эпитопа

    Пептиды, идентифицированные с 1% FDR в протеомике открытия, были подвергнуты поиску известных эпитопов Т-клеток, связанных с CD [Ludvig M (44)], астмы пекаря и эпитопов, связанных с аллергией на пшеницу, собранных из базы данных иммунных эпитопов и ресурсов анализа (www.iedb. org) с использованием алгоритма поиска Motif в CLC Genomic Workbench v21.0.3 (Qiagen, Орхус, Дания). Кроме того, пептиды, распознаваемые коммерческими наборами ELISA с использованием моноклональных антител R5 и G12, также были картированы с последовательностями белка и пептида.В анализе сохранялись совпадения со 100% идентичностью последовательностей. Пептиды, отслеживаемые в анализах MRM, также были сопоставлены с тем же списком белков, и было определено перекрытие между эпитопами CD и отслеживаемыми пептидами. Контролируемые пептиды, которые содержали полный эпитоп в своей последовательности, были отобраны и количественно определены в GW и MW, чтобы дать относительную меру потенциальной иммунной реактивности.

    Измерение белка и ELISA

    Оценка содержания белка

    выполнялась с использованием анализа связывания белка с красителем Кумасси с использованием реагента Брэдфорда (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, США) в соответствии с инструкциями производителя.Измерения проводили при 595 нм с использованием микропланшетного ридера Varioskan LUX (Thermo Scientific, Скорсби, Австралия). Стандарт бычьего сывороточного альбумина (БСА) использовали в линейном диапазоне 0,125–1,5 мг / мл.

    Разбавленные экстракты пшеницы анализировали с помощью сэндвич-ELISA с использованием Ridascreen Gliadin (R-Biopharm, Дармштадт, Германия). Аналитические протоколы, предоставленные производителем набора, строго соблюдались. Каждый из образцов экстрагировали с использованием экстракционного коктейля (R7006 / R7016, R-Biopharm), рекомендованного производителем для оптимальной экстракции глютена, и измеряли с помощью устройства для считывания микропланшетов Varioskan LUX (Thermo Scientific) в двух экземплярах на одном планшете для ELISA вместе с прилагаемым стандарты (представляющие концентрацию глютена 5–80 мг / кг).Результаты измерения оптической плотности анализировали в соответствии с инструкциями производителя набора с использованием кубической полиномиальной регрессии для стандартной кривой. Анализ данных проводился с использованием Microsoft Excel.

    Результаты

    Discovery Proteomics

    Чтобы идентифицировать белки в образцах GW и MW, был выполнен комбинированный поиск в базе данных по наборам данных протеомики открытия. Количество различных белков, идентифицированных с 1% -ной глобальной степенью ложного обнаружения (FDR), за исключением идентификации против общих загрязняющих веществ (база данных cRAP), сведено в Таблицу 1.Эта информация генерируется из отчетов, доступных по адресу https://doi.org/10.25919/fr8e-k267, обработанных с помощью шаблона Protein Alignment Template v3.002 beta (SCIEX) и ручного курирования.

    Таблица 1 . Количество различных белков, а также белков глютена и ATI, идентифицированных с достоверностью 99% в данных по трипсину и химотрипсину.

    Из 541 белка, идентифицированного как в GW, так и в MW (Таблица 1), больше было идентифицировано в триптических гидролизатах (440), чем в химотриптических гидролизатах (179).Большее представительство α- и γ-глиадинов и LMW-GS было достигнуто с использованием химотриптических переваривающих веществ, в то время как больше ATI, производных от ALP и белков, не относящихся к глютену, было идентифицировано в триптических перевариваемых веществах (Таблица 1).

    Совместное рассмотрение данных по трипсину и химотрипсину позволяет провести более полное сравнение протеомов GW и MW. Вместе было обнаружено 360 различных белков, идентифицированных в GW и 448 в MW, с перекрытием 267. Более высокое число в MW отражает генетическое разнообразие множества присутствующих сортов пшеницы.В GW 126 идентифицированных белков были глютеноподобными белками (35%), а в MW это число составляло 138 (31%). Примечательно, что протеомы GW и MW разделяют 99 (60%) из 165 обнаруженных белков глютена. Количество идентифицированных белков сравнивается на рисунках 1A, B. Чтобы идентифицировать хромосомное положение этих белков в белке генома пшеницы, последовательности были сопоставлены с версией 1 сборки генома пшеницы IWGSC (2), и было определено количество пептидов, наблюдаемых на 1 миллион бункеров пар оснований (Mb). Это выявило кластеры обнаруженных белков во всех известных локусах генов запасных белков в геноме, соответствующих γ- и ω-глиадинам, LMW-GS и HMW-GS (3) на хромосомной группе 1 и α-глиадинам на хромосомной группе 6. .На рисунке 1C показано расположение обнаруженных пептидов, наложенных на хромосомы 1A, B и D, соответственно. Хотя белки, не относящиеся к глютену, также были обнаружены во всех хромосомах пшеницы, не наблюдалось крупномасштабных изменений участков хромосом в GW и MW, что указывает на возможность экспрессии генов белков глютена в GW.

    Рисунок 1 . Сводная информация об идентификации общих и глютеноподобных белков при 1% FDR и их соответствующих хромосомных положениях. (A) Диаграмма Венна, показывающая общее количество белков, обнаруженных в наборах данных GW и MW. (B) Обнаруженные белки глютена в MW и GW. (C) Расположение генов обнаруженных белков на хромосомах пшеницы 1A, 1B и 1D.

    Таргетированная протеомика

    Для исследования количественных изменений в образцах пшеницы GW и MW были разработаны количественные анализы на основе LC-MRM-MS для всех пептидов, достоверно идентифицированных в эксперименте по протеомике открытия (рис. 2). Всего было изучено 189 триптических пептидов и 170 химотриптиков. Хотя однозначно присутствовали 84 триптических и 55 химотриптических пептидов, т.е.е. только в одной изоформе белка, многие из пептидов, контролируемых MRM, встречаются во множестве изоформ белка и, следовательно, отражают относительное содержание более чем одного белка. Хотя LC-MRM-MS выявляет относительное содержание пептидов, использование этой информации для количественной оценки белков путем комбинирования составляющих пептидов затруднено как наличием повторяющихся пептидов, так и дифференциальной эффективностью ионизации различных пептидов. Поэтому мы разделили пептиды на группы, которые отражают обилие основных типов аллергенов и не определяют количественно конкретные белки.Это выявило кратность изменения и значимость триптических (фиг. 2A) и химотриптических пептидов (фиг. 2B) пептидов между GW и MW. Пептиды HMW-GS и ATI обычно имеют более высокий GW, чем MW, а многие триптические «неглютеновые» пептиды имеют более высокий GW. Точно так же у многих пептидов LMW-GS, ALP и α-глиадина GW ниже, чем MW.

    Рисунок 2 . Графики вулканов, показывающие количественно определенные триптические (A) и химотриптические (B) пептиды в образцах GW и MW, окрашенных в соответствии с группой глютена.Кратность изменения 2 обозначена пунктирными вертикальными линиями [Log 2 (FC) = ± 1]. Пептиды над горизонтальной пунктирной линией имеют значительное изменение содержания между GW и MW ( p -значение <0,01 [-log 10 ( p )> 2].

    Нормализованные площади пиков для всех пептидов, принадлежащих к каждой группе белков, затем суммировались для сравнения общей численности каждой группы белков (рис. 3). Важно отметить, что GW показал значительно более низкое содержание LMW-глютенинов, α-глиадинов и γ-глиадинов, но показал увеличение HMW-глютенинов по сравнению с MW.GW также показал значительное снижение ALP и увеличение ATI. Изменения в чистом содержании ω-глиадина не были значительными. Чистое изменение в каноническом содержании глютена может быть получено путем сложения вместе глиадинов и глютенинов (LMW-GS, HMW-GS, α-, γ-, ω-глиадины), показывая, что GW имеет 67% относительного содержания белка глютена как MW. (Рисунок 3B).

    Рисунок 3 . Относительное содержание различных групп глютена или белка ATI (A) . Количественный анализ проводился на основе всех обнаруживаемых пептидов из белков, отнесенных к этим группам.Планки погрешностей указывают на SEM, а значительные различия отмечены звездочкой. Сложение вместе LMW и HMW глютенинов и α-, γ-, ω-глиадинов дает чистое содержание глиадина и глютенина (B) , что приравнивается к GW, имеющему ориентировочно 67% содержания глютена в MW (пунктирная линия).

    Анализ обогащения набора генов

    Чтобы понять обогащение классов белков в отдельных образцах пшеницы, был проведен анализ обогащения GO с использованием g: Profiler для тех белков, обнаруженных с кратным изменением ≥2 в MW и GW, как показано на рисунке 2.Белки в MW показали преобладающее обогащение для активности резервуаров питательных веществ (GO: 0045735, рис. 4A). Белки GW показали обогащение несколькими классами ингибиторов и регуляторов ферментов, а также обогащение белков, локализованных во внеклеточной области (GO: 0005576) клеточного компартмента, что указывает на механизм компенсации экспрессии неглютеновых белков. Не было обогащения питательными веществами из резервуара (рис. 4B).

    Рисунок 4 . Анализ обогащения белков GO показывает увеличение в ≥2 раза: MW (A) ; или GW (B) .

    Картирование эпитопа

    Чтобы изучить потенциальную иммунореактивную природу белков, обнаруженных в GW, по сравнению с белками в MW, были количественно определены пептиды, идентифицированные в данных открытия, которые содержат полноразмерные иммунно-реактивные эпитопы (рис. 5). Определены количественно известные иммуногенные области внутри количественно определенных пептидов MRM, включая эпитопы Т-клеток HLA-DQ для пациентов с CD (фигура 5A), эпитопы пекарской астмы (фигура 5B) и эпитопы, связанные с аллергией на пшеницу (фигура 5C). Следует отметить, что они представляют собой небольшую часть известных иммунореактивных эпитопов.Результаты анализа обнаружения (дополнительная таблица 1) указывают на присутствие дополнительных эпитопов, которые не были количественно определены с помощью MRM. Было обнаружено шесть полных последовательностей Т-клеточного эпитопа HLA-DQ в 25 пептидах, девять эпитопов BA в 12 пептидах, два эпитопа WA в 16 пептидах и один эпитоп WDEIA в одном пептиде. В целом, HLA-DQ-реактивные эпитопы в GW присутствовали в 67% относительной численности MW. BA-реактивные эпитопы также были более многочисленны в GW на 180%, чем MW. WA-реактивные эпитопы также были более многочисленны в GW на 379% от уровня, наблюдаемого в MW.Наблюдался только один эпитоп анафилаксии, вызванной зависимой от пшеницы физической нагрузкой, который был заметно ниже в GW на 17,7% от уровня, наблюдаемого в MW.

    Рисунок 5 . Относительное количество иммунореактивных эпитопов в пептидах, определенное количественно в анализах MRM, выраженное как среднее значение и стандартная ошибка. Последовательности эпитопов выделены жирным шрифтом в пределах пептидной последовательности: (A) глютеновая болезнь HLA-DQ-реактивные эпитопы; (B) астма пекарей; (C) Аллергия на пшеницу плюс пептид QQQQQQQQILQQILQQQLIPCR, который содержит эпитоп QILQQQLIPC, антигенный для анафилаксии, вызванной зависимыми от пшеницы упражнениями.При подсчете общего количества повторяющиеся пептиды, в которых было обнаружено несколько эпитопов, подсчитывали только один раз.

    Содержание белка MW и GW было оценено и не показало значимой разницы при 0,84 и 0,88 мг / мл соответственно. Содержание глютена также оценивали с помощью R5 ELISA, и было интересно отметить, что GW показал на 39% более высокое содержание глютена, чем MW, что является неожиданным результатом, учитывая общее снижение пептидов глютена, обнаруженное с помощью LC-MS.

    Обсуждение

    В текущем исследовании использовались дополнительные высокочувствительные методы ЖХ-МС для идентификации белков глютена и мониторинга относительного содержания глютена и аллергенных белков пшеницы в недавно разработанном пшеничном продукте (GoodWheat, GW) по сравнению с образцом пшеницы, смешанным из равных количеств девять товарных сортов (пшеница смешанная, MW).Пептиды из белков глиадина и глютенина присутствовали в GW в 67% от концентрации MW контроля, что указывает на среднее снижение на 33% (Рисунок 3B). Это дополняется нашим анализом интактных HLA-DQ-реактивных эпитопов в отслеживаемых пептидах, содержание которых в GW было на 67,3% больше, чем в MW (рис. 5A). Хотя это может снизить, но не удалить содержание антигена в GW, это сопровождается увеличением количества пептидов, связанных с астмой Бейкера и аллергией на пшеницу, на 180 и 379% соответственно.Совпадение иммуногенных эпитопов DQ с пептидами, обнаруженными в данных открытия и количественно определенными в MRM, представлено в дополнительной таблице 1. Хотя использование LC-MRM-MS в этой работе позволило количественно определить белки глютена и подчеркнуть его полезность в исследованиях белков зерна. Что касается глютена, будущие исследования должны быть сосредоточены на использовании дополнительных буферов для экстракции, чтобы лучше понять изменения в протеоме зерна GW.

    В отличие от анализа MRM, который выявил общее более низкое содержание глютена в GW, чем в MW (рис. 3), оценка содержания глютена методом ELISA R5 показала, что содержание глютена в GW на ~ 39% выше, чем в MW.Немного повышенное содержание белка (5%) в GW по сравнению с MW могло бы объяснить меньшую часть наблюдаемой разницы. Повышенное значение измерения ELISA, вероятно, отражает общее увеличение отношения эпитопа R5 на единицу белка. Выбор эталонного материала, в частности отношения глиадина к глютенину, как известно, влияет на измерения глютена с помощью ELISA даже в простых пищевых матрицах (45), а наборы, в которых используются разные первичные антитела, будут давать разные измерения глютена (46), потому что специфичности и чувствительности первичного антитела (47).В будущих анализах следует изучить содержание глютена в GW с использованием альтернативных наборов для ELISA или количественного определения белка глютена с использованием протоколов фракционирования (RP-HPLC или эксклюзионная хроматография).

    Важные тенденции наблюдались в конкретных типах белка глютена (рис. 2, 3), так как LMW-GS, α- и γ-глиадины имеют более низкую GW, в то время как HMW-GS были значительно более многочисленными. Глютенины HMW в большей степени способствуют эластичным свойствам хлеба, чем другие белки глютена, из-за их относительного размера и способности образовывать крупные полимеры (48).Их более высокое относительное содержание в GW указывает на то, что они частично компенсируют более низкое содержание глиадинов и низкомолекулярных глютенинов (49). Кроме того, уровень иммунного ответа, определяемый HMW-глютенином при CD, значительно ниже по сравнению с α-, γ- и ω-глиадинами и LMW-глютенинами (40), что делает их повышение менее значимым для CD, однако это имеет важные последствия для WA и BA. Наряду с ATI, которые также были значительно выше в GW, более высокое содержание глютенина HMW в GW приносит больше аллергенных эпитопов, связанных с WA и BA.Это отражено на рисунке 5, поскольку количество аллергенных эпитопов, распознаваемых различными типами В- и Т-клеток, увеличивается в целом на 53,5%.

    Интересно, что ЩФ также присутствовали в значительно меньших количествах в ГВт, чем в МВт. Хотя эти запасные белки семян названы так из-за их сходства с авенинами овса (50), они имеют сходство последовательностей и вторичную функцию с γ-глиадинами и низкомолекулярными глютенинами (51). Они способствуют как аллергенности (52), так и качеству хлебного теста (53) и содержат один или два домена глиадина (PF13016).ЩФ также содержат CD-связанные эпитопы В-клеток (3), и их подавление важно для токсичности CD.

    Симметрия графика вулкана (рис. 2) указывает на чистое снижение содержания белка глютена и ЩФ, сопровождаемого компенсаторной экспрессией других белков в зерне. Анализ обогащения протеома GW с помощью GO выявил ингибиторы и регуляторы ферментов, которые обогащены GW, что также было подтверждено анализом обогащения набора генов, показывающим, что белки, богатые цистеином, чрезмерно представлены в белках с повышенной регуляцией в GW.Большинство этих белков обладают защитной функцией и активируются вместо белков с канонической аннотацией GO MF «активность резервуара питательных веществ» (Рис. 4).

    Наш протеогеномный анализ показывает, что нет никаких доказательств крупномасштабных делеций хромосом или отсутствия кластеров генов запасных белков (Рисунки 1B, C) на хромосомных группах 1 и 6 в GW. Хотя анализы на основе антител или классическое фракционирование по Осборну не проводились и, таким образом, представляют собой ограничение настоящей работы, белки глютена присутствовали как в GW, так и в MW и просто экспрессировались на разных уровнях (рис. 3).Это предполагает, что новый сорт GW экспрессирует меньше белков глютена из-за регуляции генов на транскрипционном или посттранскрипционном уровне. Есть несколько известных механизмов, участвующих в развитии семян и экспрессии белка глютена, которые могут иметь значение. Одним из них является ген LYS3 , который кодирует фактор транскрипции Prolamin Binding Factor (PBF). PBF экспрессируется на ранней стадии развития семян и подавляет рост семян за счет снижения экспрессии генов развития и метаболизма крахмала (54).Сообщалось, что мутанты пшеницы lys3 содержат более низкие уровни глиадинов и LMW-GS (21), что соответствует нашим результатам, как показано на рисунке 4. Сорт ячменя с мутацией lys3a , из-за которой он не экспрессирует C-гордеин (a класс глютена ячменя) был использован в программе селекции для получения сорта ячменя со сверхнизким содержанием глютена (30, 55), что свидетельствует о его совместимости с селективной селекцией. Эти мутантные линии PBF с низким содержанием глютена демонстрируют повышенную экспрессию богатых лизином генов, которые в остальном связаны с процессами развития во время прорастания (30).Хотя возможно, что GW использует механизмы lys3 для регулирования экспрессии белка глютена, используя только протеомную информацию, представленную в этом исследовании, мы не можем окончательно определить нацеливание регуляции lys3 .

    В заключение, использование открытий и целевых экспериментов на основе протеомики позволило выявить и количественно оценить глютен и дополнительные аллергенные белки, присутствующие в образцах GW и MW. Это исследование показало снижение на 33% глютеноподобных белков в GW и компенсаторную экспрессию неглютеновых белков в образцах MW, которые, как правило, имеют условия GO-ингибитора или регулятора активности ферментов.Это исследование подтверждает, что, по заявлению производителя, GW несовместим с безглютеновой диетой. Картирование эпитопов выявило снижение количества эпитопов, специфичных для белка глютена; однако наблюдалось увеличение эпитопов, связанных с астмой пекарей и аллергией на пшеницу, у пшеницы GW по сравнению с MW. Кроме того, анализ обнаруженных белков на хромосомном уровне не показал значительных различий между GW и MW. Будущие исследования, сфокусированные на интеграции результатов ЖХ-МС / МС с клиническими измерениями, потребуются для изучения питательных свойств GW.В целом, настоящее исследование иллюстрирует использование протеогеномных подходов в качестве инструмента для изучения безопасности и / или пользы для здоровья сортов пшеницы, ориентированных на потребителей с заболеваниями, связанными с пшеницей.

    Заявление о доступности данных

    Наборы данных, представленные в этом исследовании, можно найти в онлайн-репозиториях. Имена репозитория / репозиториев и номера доступа можно найти ниже: https://doi.org/10.25919/fr8e-k267.

    Авторские взносы

    MN-W: подготовка образцов, сбор данных ЖХ-МС, анализ данных и подготовка рукописи.AJ и UB: анализ данных и подготовка рукописи. МК: концепция и дизайн проекта, подготовка рукописи. Все авторы внесли свой вклад в статью и одобрили представленную версию.

    Финансирование

    Это исследование было частично поддержано ARC Center of Excellence for Innovations in Peptide and Protein Science (CE200100012).

    Конфликт интересов

    Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

    Рецензент KS заявил редактору о прошлом соавторстве с одним из авторов, MC.

    Примечание издателя

    Все претензии, выраженные в этой статье, принадлежат исключительно авторам и не обязательно отражают претензии их дочерних организаций или издателей, редакторов и рецензентов. Любой продукт, который может быть оценен в этой статье, или заявление, которое может быть сделано его производителем, не подлежат гарантии или одобрению со стороны издателя.

    Дополнительные материалы

    Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fnut.2021.705822/full#supplementary-material

    Список литературы

    1. Шиферо Б., Смейл М., Браун Х. Дж., Дювейлер Э., Рейнольдс М., Муричо Г. Культуры, которые кормят мир 10. Прошлые успехи и будущие проблемы роли пшеницы в глобальной продовольственной безопасности. Продовольственная безопасность. (2013) 5: 291–317. DOI: 10.1007 / s12571-013-0263-y

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    2.IWGSC, Appels R, Eversole K, Stein N, Feuillet C, Keller B и др. Сдвиг границ в исследованиях и селекции пшеницы с использованием полностью аннотированного эталонного генома. Наука. (2018) 361: eaar7191. DOI: 10.1126 / science.aar7191

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    3. Юхас А., Белова Т., Флоридес К.Г., Маулис К., Фишер И., Гелл Г. и др. Картирование генома семенных аллергенов и иммунореактивных белков пшеницы. Sci Adv. (2018) 4: eaar8602.DOI: 10.1126 / sciadv.aar8602

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    4. Людвигссон Дж. Ф., Леффлер Д. А., Бай Дж. К., Бьяджи Ф., Фазано А., Грин PHR и др. Определения глютеновой болезни и связанных с ней терминов в Осло. Gut. (2013) 62:43. DOI: 10.1136 / gutjnl-2011-301346

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    5. Кабанильяс Б. Расстройства, связанные с глютеном: целиакия, аллергия на пшеницу и нецеловая чувствительность к глютену. Crit Rev Food Sci Nutr. (2020) 60: 2606–21. DOI: 10.1080 / 10408398.2019.1651689

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    6. Сальседо Г., Квирс С., Диас-Пералес А. Аллергены пшеницы, связанные с астмой Бейкера. J Investig Allergol Clin Immunol. (2011) 21: 81–92.

    Google Scholar

    7. Шуппан Д., Пикерт Г., Ашфак-Хан М., Зеваллос В. Чувствительность к пшенице без целиакии: дифференциальный диагноз, триггеры и последствия. Best Practices Clin Gastroenterol. (2015) 29: 469–76. DOI: 10.1016 / j.bpg.2015.04.002

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    10. Скодье Г.И., Сарна В.К., Минел И.Х., Рольфсен К.Л., Мьюир Дж. Г., Гибсон П.Р. и др. Фруктан, а не глютен, вызывает симптомы у пациентов с самооценкой чувствительности к глютену, не связанной с глютеном. Гастроэнтерология. (2018) 154: 529–39. DOI: 10.1053 / j.gastro.2017.10.040

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    11.Kang J, Kang A, Green A, Gwee K, Ho K. Систематический обзор: глобальные вариации частоты глютеновой болезни и изменения с течением времени. Aliment Pharmacol Ther. (2013) 38: 226–45. DOI: 10.1111 / apt.12373

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    12. Сингх П., Арора А., Стрэнд Т.А., Леффлер Д.А., Катасси С., Грин PH и др. Глобальная распространенность целиакии: систематический обзор и метаанализ. Clin Gastroenterol Hepatol. (2018) 16: 823–36.DOI: 10.1016 / j.cgh.2017.06.037

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    13. Кабрера-Чавес Ф., Дезар Г. В., Ислас-Заморано А. П., Эспиноза-Альдерете Дж. Г., Вергара-Хименес М. Дж., Маганья-Ордорика Д. и др. Распространенность самооценки чувствительности к глютену и соблюдение безглютеновой диеты среди взрослого населения Аргентины. Питательные вещества. (2017) 9:81. DOI: 10.3390 / nu81

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    14. Онтиверос Н., Лопес-Галлардо Х.А., Вергара-Хименес М.Дж., Кабрера-Чавес Ф.Самооценка распространенности симптоматических побочных реакций на глютен и соблюдение безглютеновой диеты среди взрослого населения Мексики. Питательные вещества. (2015) 7: 6000–15. DOI: 10.3390 / nu7075267

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    15. Онтиверос Н., Родригес-Беллегарриг С.И., Галисия-Родригес Дж., Вергара-Хименес, доктор медицинских наук, Сепеда-Гомес Е.М., Арамбуро-Гальвес Дж. Распространенность заболеваний, связанных с глютеном, о которых сообщают сами люди, и соблюдение безглютеновой диеты среди взрослого населения Сальвадора. Int J Environ Res Public Health. (2018) 15: 786. DOI: 10.3390 / ijerph25040786

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    16. Катасси К., Бай Дж. К., Боназ Б., Боума Дж., Калабро А., Карроччо А. и др. Чувствительность к глютену без целиакии: новый рубеж заболеваний, связанных с глютеном. Питательные вещества. (2013) 5: 3839–53. DOI: 10.3390 / nu5103839

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    18. Ларре С., Лупи Р., Гомбо Дж., Броссар С., Бранлар Дж., Монере-Вотрен Д. и др.Оценка аллергенности диплоидных и гексаплоидных генотипов пшеницы: идентификация аллергенов во фракции альбумин / глобулин. Дж. Протеомика. (2011) 74: 1279–89. DOI: 10.1016 / j.jprot.2011.03.014

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    19. Фрай Л., Мэдден А., Фаллэйз Р. Исследование питательного состава и стоимости безглютеновых продуктов по сравнению с обычными продуктами питания в Великобритании. J Human Nutr Diet. (2018) 31: 108–20. DOI: 10.1111 / jhn.12502

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    20. Sestili F, Botticella E, Lafiandra D. TILLING для улучшения состава крахмала в пшенице. В: Tuberosa R, Graner A, Frison E, редакторы. Геномика генетических ресурсов растений: Том 2. Урожайность, продовольственная безопасность и качество питания . Дордрехт: Спрингер (2014). п. 467–87. DOI: 10.1007 / 978-94-007-7575-6_20

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    21. Moehs CP, Austill WJ, Holm A, Large TA, Loeffler D, Mullenberg J, et al.Создание пшеницы с пониженным содержанием глютена стало возможным благодаря определению генетической основы ячменя lys3a. Plant Physiol. (2019) 179: 1692–703. DOI: 10.1104 / стр. 18.00771

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    22. Frisoni M, Corazza GR, Lafiandra D, De Ambrogio E, Filipponi C, Bonvicini F, et al. Дефицит глиадинов в пшенице: перспективное средство для лечения целиакии. Gut. (1995) 36: 375. DOI: 10.1136 / gut.36.3.375

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    23.Кукла H, Køie B, Eggum BO. Индуцировал мутанты с высоким содержанием лизина в ячмене. Radiat Bot. (1974) 14: 73–80. DOI: 10.1016 / S0033-7560 (74)-3

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    24. Таннер Г.Дж., Бланделл М.Дж., Колгрейв М.Л., Ховитт, Калифорния. Создание первого ячменя со сверхнизким содержанием глютена (Hordeum vulgare L.) для популяций, страдающих глютеновой болезнью и непереносимостью глютена. Plant Biotechnol J. (2016) 14: 1139–50. DOI: 10.1111 / pbi.12482

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    25.Санчес-Леон С., Гил-Хуманес Дж., Озуна К.В., Хименес М.Дж., Соуза С., Войтас Д.Ф. и др. Нетрансгенная пшеница с низким содержанием глютена, разработанная с использованием CRISPR / Cas9. Plant Biotechnol J. (2018) 16: 902–10. DOI: 10.1111 / pbi.12837

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    26. Вен С., Вен Н., Панг Дж., Ланген Дж., Бру-Аппиа РАТ, Мехиас Дж. Х. и др. Структурные гены 5-метилцитозиновых ДНК-гликозилаз пшеницы и ячменя и их потенциальное применение для здоровья человека. Proc Natl Acad Sci USA. (2012) 109: 20543–8. DOI: 10.1073 / pnas.1217927109

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    27. Карроччо А., Ди Прима Л., Ното Д., Файер Ф., Амброзиано Дж., Вилланаччи В. и др. Поиск растений пшеницы с низкой токсичностью при целиакии: между прямой токсичностью и иммунологической активацией. Digest Liver Dis. (2011) 43: 34–9. DOI: 10.1016 / j.dld.2010.05.005

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    28. Камерленго Ф., Фриттелли А., Спаркс С., Доэрти А., Мартиньяго Д., Ларре С. и др.Мультиплексное редактирование CRISPR-Cas9 генов ингибиторов α-амилазы / трипсина с целью уменьшения количества белков аллергенов в твердых породах пшеницы. Front Sustain Food Syst. (2020) 4: 104. DOI: 10.3389 / fsufs.2020.00104

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    29. Калунке Р.М., Тундо С., Сестили Ф., Камерленго Ф., Лафиандра Д., Лупи Р. и др. Снижение аллергенного потенциала в трансгенных линиях РНКи мягкой пшеницы, подавленных по генам CM3, CM16 и 0,28 ATI. Int J Mol Sci. (2020) 21: 5817.DOI: 10.3390 / ijms21165817

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    30. Бозе Ю., Бродбент Дж. А., Бирн К., Бланделл М. Дж., Ховитт, Калифорния, Колгрейв М.Л. Протеомный анализ линий ячменя, не содержащих гордеин, выявляет синтез запасного белка и механизмы компенсации. J Agric Food Chem. (2020) 68: 5763–75. DOI: 10.1021 / acs.jafc.0c01410

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    31. Гарсия-Молина, доктор медицины, Муччилли В., Салетти Р., Фоти С., Маски С., Барро Ф.Сравнительный протеомный анализ двух линий трансгенной пшеницы с низким содержанием глиадина и нетрансгенного контроля пшеницы. Дж. Протеомика. (2017) 165: 102–12. DOI: 10.1016 / j.jprot.2017.06.010

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    32. Gil-Humanes J, Pistón F, Rosell CM, Barro F. Значительное подавление γ-глиадинов оказывает незначительное влияние на глютеновые и крахмальные свойства мягкой пшеницы. J Cereal Sci. (2012) 56: 161–70. DOI: 10.1016 / j.jcs.2012.02.009

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    33. Gil-Humanes J, Pistón F, Tollefsen S, Sollid LM, Barro F. Эффективное отключение экспрессии эпитопов Т-клеток глиадина пшеницы, связанных с глютеновой болезнью, посредством РНК-интерференции. Proc Natl Acad Sci USA. (2010) 107: 17023–8. DOI: 10.1073 / pnas.1007773107

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    34. Шмидт Д., Газиола С.А., Боаретто Л.Ф., Азеведо Р.А. Протеомный анализ зрелых зерен ячменя из антисмысловых линий С-гордеина. Фитохимия. (2016) 125: 14–26. DOI: 10.1016 / j.phytochem.2016.03.001

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    35. van den Broeck HC, van Herpen TW, Schuit C, Salentijn EM, Dekking L, Bosch D, et al. Удаление белков глютена, связанных с глютеновой болезнью, из мягкой пшеницы с сохранением технологических свойств: исследование с использованием делеционных линий Chinese Spring. BMC Plant Biol. (2009) 9: 1–12. DOI: 10.1186 / 1471-2229-9-41

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    36.Жуанин А., Борм Т., Бойд Л.А., Кокрам Дж., Ли Ф., Сантос Б.А. и др. Разработка системы захвата GlutEnSeq для секвенирования семейств генов глютена в гексаплоидной мягкой пшенице с делециями или мутациями, индуцированными γ-облучением или CRISPR / Cas9. Дж. Зерновая наука . (2019) 88: 157–66. DOI: 10.1016 / j.jcs.2019.04.008

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    37. Жуанин А., Шаарт Дж. Г., Бойд Л. А., Кокрам Дж., Ли Ф. Дж., Бейтс Р. и др. Перспективы для пациентов с целиакией: переход к мягкой пшенице с гипоиммуногенным глютеном путем редактирования генов семейств генов α- и γ-глиадина. БМК Завод Биол . (2019) 19: 1–16. DOI: 10.1186 / s12870-019-1889-5

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    40. Тай-Дин Дж. А., Стюарт Дж. А., Дроми Дж. А., Бейсбарт Т., ван Хил Д. А., Татхам А. и др. Комплексное количественное картирование эпитопов Т-клеток в глютене при целиакии. Sci Transl Med. (2010) 2: 41ra51. DOI: 10.1126 / scitranslmed.3001012

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    41. Бозе Ю., Бродбент Дж. А., Бирн К., Хасан С., Ховитт, Калифорния, Колгрейв М.Л.Оптимизация экстракции белка для углубленного профилирования протеома зерна злаков. Дж. Протеомика. (2019) 197: 23–33. DOI: 10.1016 / j.jprot.2019.02.009

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    42. Маклин Б., Томазела Д. М., Шульман Н., Чемберс М., Финни Г. Л., Фрюен Б. и др. Skyline: редактор документов с открытым исходным кодом для создания и анализа целевых протеомических экспериментов. Биоинформатика. (2010) 26: 966–8. DOI: 10.1093 / биоинформатика / btq054

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    44.Sollid LM, Tye-Din JA, Qiao S.-W, Anderson RP, Gianfrani C, Koning F. Обновление 2020: номенклатура и список эпитопов глютена, связанных с глютеновой болезнью, распознаваемых CD4 + Т-клетками. Иммуногенетика. (2020) 72: 85–8. DOI: 10.1007 / s00251-019-01141-w

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    45. Schalk K, Koehler P, Scherf KA. Тандемная масс-спектрометрия с целевой жидкостной хроматографией для количественного определения глютена пшеницы с использованием четко определенных эталонных белков. PLoS ONE. (2018) 13: e0192804. DOI: 10.1371 / journal.pone.0192804

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    46. Томпсон Т., Мендес Э. Коммерческие анализы для оценки содержания глютена в безглютеновых продуктах: почему они не созданы равными. J Am Diet Assoc. (2008) 108: 1682–7. DOI: 10.1016 / j.jada.2008.07.012

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    47. Scherf KA. Анализ клейковины пшеничного крахмала с помощью семи коммерческих наборов для анализа ELISA — до шести различных значений. Методы пищевого анализа. (2017) 10: 234–46. DOI: 10.1007 / s12161-016-0573-8

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    48. Delcour JA, Joye IJ, Pareyt B., Wilderjans E, Brijs K, Lagrain B. Функциональность пшеничного глютена как определяющий фактор качества пищевых продуктов на основе злаков. Annu Rev Food Sci Technol. (2012) 3: 469–92. DOI: 10.1146 / annurev-food-022811-101303

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    49. Gianibelli M, Larroque O, MacRitchie F, Wrigley C.Биохимическая, генетическая и молекулярная характеристика белков эндосперма пшеницы. Cereal Chem. (2001) 78: 635–46. DOI: 10.1094 / CCHEM.2001.78.6.635

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    50. Кан И, Ван И, Бодуан Ф., Лидер ДиДжей, Эдвардс К., Пул Р. и др. Анализ транскриптома выявляет дифференциально экспрессируемые транскрипты запасных белков в семенах эгилопса и пшеницы. J Cereal Sci. (2006) 44: 75–85. DOI: 10.1016 / j.jcs.2006.04.004

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    51.Колгрейв М.Л., Госвами Х., Бирн К., Бланделл М., Ховитт, Калифорния, Таннер Г.Дж. Протеомное профилирование 16 зерен злаков и применение целевой протеомики для обнаружения загрязнения пшеницы. J Proteome Res. (2015) 14: 2659–68. DOI: 10.1021 / acs.jproteome.5b00187

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    52. Чжан Ю., Ху Х, Джухас А., Ислам С., Ю З, Чжао Ю. и др. Характеристика авениноподобных белков (ALP) из фракции альбумина / глобулина зерен пшеницы путем секвенирования пептидов с помощью RP-HPLC, SDS-PAGE и MS / MS. BMC Plant Biol. (2020) 20:45. DOI: 10.1186 / s12870-020-2259-z

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    53. Ма Ф, Ли М, Ли Т., Лю В., Лю И, Ли Й и др. Избыточная экспрессия авенин-подобных b-белков в мягкой пшенице (Triticum aestivum L.) улучшает свойства замешивания теста за счет их включения в полимеры глютенина. PLoS ONE. (2013) 8: e66758. DOI: 10.1371 / journal.pone.0066758

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    54.Орман-Лигеза Б., Боррилл П., Чиа Т., Кирико М., Долежель Дж., Дреа С. и др. LYS3 кодирует фактор транскрипции, связывающий проламин-бокс, который контролирует рост эмбрионов ячменя и пшеницы. J Cereal Sci. (2020) 93: 102965. DOI: 10.1016 / j.jcs.2020.102965

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    55. Ховитт, Калифорния, Ларкин П.Дж., Колгрейв М.Л. Стратегии снижения содержания глютена в пшенице и ячмене. Cereal Food World. (2018) 65: 184–7. DOI: 10.1094 / CFW-63-5-0184

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Curse (движение) — Bulbapedia, энциклопедия покемонов, управляемая сообществом

    Curse (яп. の ろ い Curse / Slow ) — это не наносящий урон приём Призрачного типа, представленный в Поколении II.До поколения V это был ход типа ???, и единственный ход такого типа. Это был TM03 в поколении II.

    Эффект

    Во всех поколениях Проклятие действует по-разному в зависимости от того, есть у пользователя тип Призрака или нет.

    Покемон призрачного типа

    Пользователь потеряет половину своего максимального HP (округляется в меньшую сторону) и наложит проклятие на цель. Если это приводит к тому, что HP пользователя упадет до 0, движение будет выполнено полностью, но заставит пользователя упасть в обморок. Проклятый покемон теряет ¼ своего максимального запаса здоровья в конце каждого хода.Проклятие будет действовать до тех пор, пока Покемон не отключится или пока битва не закончится. Этот ход не блокируется защитой, обнаружением или остроконечным щитом, но блокируется хитрым щитом.

    Пользователь не теряет HP, если Проклятие промахивается (из-за движения с полу-неуязвимым ходом), терпит неудачу (из-за того, что на цель уже действует Проклятие) или блокируется Коварным Щитом.

    При включении Ghostium Z в Z-Curse пользователь восстанавливает все свои HP.

    Покемон не призрачного типа

    Показатель скорости пользователя упадет на одну ступень, а его показатель атаки и защиты повысится на один уровень каждый.Несмотря на то, что на пользователя действует эффект, этот ход не удастся, если на поле нет противников.

    При включении Ghostium Z в Z-Curse статистика атаки пользователя поднимает еще одну ступень.

    В разных поколениях

    Поколение II

    Проклятие — ход типа ???.

    Если используется покемоном не-призрачного типа, Curse не сработает, если характеристики атаки и защиты пользователя находятся на +6 стадиях, даже если его показатель скорости не на -6 стадиях.

    Если проклятый покемон побеждает своего противника, он не получит урона от проклятия в этот ход.

    Curse не может поразить замену.

    III и IV поколения

    Проклятие, если его использует покемон, не являющийся призраком, теперь может снизить показатель скорости пользователя, даже если его показатели атаки и защиты находятся на +6 стадиях. (Однако Проклятие все равно не сработает, если характеристики атаки и защиты пользователя имеют +6 этапов, а его показатель скорости — -6 этапов.)

    Если проклятый покемон побеждает своего противника, он теперь получает урон проклятия в этом ходу.

    Если пользователь меняет тип перед использованием Curse, Curse будет подчиняться типу пользователя во время выполнения движения.В Двойной битве, если пользователь получает тип Призрака до выполнения Проклятия, Проклятие будет отдавать приоритет противнику, находящемуся прямо напротив пользователя в качестве своей цели.

    Проклятие также можно использовать как часть комбинации Конкурса покемонов, в результате чего определенные ходы (Узы Судьбы, Обида, Злость и Злоба) удваивают свои базовые очки апелляции, если они используются в следующем ходу.

    Поколение V

    Curse теперь является призрачным.

    Curse теперь может поразить замену.

    В тройной битве, если пользователь получает тип Призрака до выполнения Проклятия, Проклятие будет отдавать приоритет противнику, находящемуся прямо напротив пользователя в качестве своей цели.

    Поколение VI

    В одиночной битве, если пользователь еще не является призрачным типом и становится призрачным перед выполнением Проклятия (из-за Мега-эволюции, смены цвета или угощения), проклятие будет выполняться, как и для всех типов призраков. , причиняя вред пользователю и накладывая проклятие.

    В тройной битве или столкновении с ордой, если пользователь еще не является призрачным типом и становится призрачным перед выполнением Проклятия (из-за Мега-эволюции, смены цвета или угощения), проклятие теперь будет нацелено на случайное соседний противник.

    Из-за сбоя Curse может иметь необычное поведение в некоторых ситуациях, когда пользователь меняет его тип прямо перед использованием движения.

    В Двойной битве, если пользователь еще не является призрачным типом и становится призрачным перед выполнением Проклятия (из-за Мега-эволюции, смены цвета или угощения), Проклятие может нацеливаться на другого покемона в зависимости от позиция пользователя. Если пользователь находится справа (с точки зрения тренера), Curse будет нацеливаться на союзника пользователя (или потерпит неудачу, если его нет).Если пользователь находится слева (с точки зрения тренера), Curse будет нацелен на случайного противника. Follow Me и Rage Powder по-прежнему будут перенаправлять Curse как обычно.

    Если пользователь еще не является призрачным типом и становится призрачным из-за Protean после выполнения Проклятия, пользователь будет использовать Проклятие призрачного типа на себе (независимо от Follow Me или Rage Powder). Это не может быть заблокировано Коварным щитом.

    Поколение VII

    В Двойной битве, если пользователь еще не является призрачным типом и становится призрачным перед выполнением Проклятия (из-за Мега-эволюции, смены цвета или «Кошелек или жизнь»), Проклятие теперь будет нацелено на случайного противника.

    Поколение VIII

    Покемона Dynamax можно проклясть, однако он получает урон, равный 1/4 от его максимального HP до Dynamax, что составляет от 1/6 до 1/8 от его HP Dynamax, или всего лишь 1/12 для босс в Max Raid Battle.

    Покемоны призрачного типа больше не могут выбирать цели для проклятия в двойном бою и всегда будут пытаться наложить проклятие на случайного противника.

    Описание

    Игры Описание
    Stad2 Повышает атаку и защиту за счет скорости.Для типа Призрак это работает иначе.
    GSC По-разному работает с призраками.
    RSE Colo. XD Движение, которое действует у Призраков по-другому.
    FRLG Движение, которое работает по-разному для типа Призрак и всех других типов.
    DPPtHGSS PBR Движение, которое работает для типа Призрак иначе, чем для всех других типов.
    BWB2W2
    XYORAS
    SMUSUM
    SwSh     		Движение, которое работает для типа Призрак иначе, чем для всех других типов.

    Learnset

    Повышая уровень

    по TM

    Племенной

    Специальный прием

    III поколения
    Поколение V
    Поколение VIII

    По событию

    Поколение IV

    В других играх

    Серия Pokémon Mystery Dungeon

    В Red Rescue Team и Blue Rescue Team, Explorers of Time, Darkness and Sky, Curse — это ход обычного типа с 17PP.Если пользователь относится к типу Призрака, этот ход имеет 100% точность, он будет нацелен на врага спереди и наложит на цель состояние статуса Проклятия на 4-5 ходов, при этом пользователь теряет 50% своего HP при использовании. Если пользователь не является призраком, его атака и защита повышаются на один уровень, а его скорость передвижения снижается на один уровень. На этот ход действует Насмешка.

    Pokémon Rumble Blast

    При использовании покемоном не-призрачного типа Curse такое же, как и в поколении V. При использовании покемоном призрачного типа Curse наносит урон, а затем истощает здоровье противника с течением времени.

    Описание

    Игры Описание
    MDRB Повышает атаку и защиту пользователя на один уровень, но также снижает скорость передвижения на один уровень. Если используется призрак, цель проклинается, а HP пользователя уменьшается вдвое.
    MDTDS Повышает атаку и защиту пользователя на 1 уровень, но также снижает скорость передвижения на 1 уровень.Если этот ход используется покемоном призрачного типа, он поражает цель статусом Проклятие, но снижает HP пользователя вдвое.
    BSL じ ぶ ん の こ う げ き ぼ う ぎ ょ を 1 だ ん か い あ げ る が い ど う そ く ど が 1 だ ん か い さ が る ゴ ー ス ト タ イ プ が つ か っ た と き は て き ポ ケ モ ン を の ろ い じ ょ う た い に す る が じ ぶ ん の HP は は ん ぶ ん に な る
    MDGtI Увеличивает вашу атаку и защиту, но снижает скорость передвижения. Если это используется покемоном призрачного типа, это вызывает состояние статуса Проклятие для врага.Но это вдвое снижает ваш HP.
    SMD Увеличивает вашу атаку и защиту, но снижает скорость передвижения. Если это используется покемонами призрачного типа, это делает врага проклятым, но снижает ваше здоровье вдвое.

    В манге

    Приключения покемонов

    В других поколениях

    Игры серии Core

    Покемон призрачного типа
    Покемон не призрачного типа

    Сторона серии игр

    Покемон призрачного типа
    Покемон не призрачного типа

    Игры серии Spin-off

    Покемон призрачного типа
    Покемон не призрачного типа

    Интересные факты

    • Curse и Z-Curse — единственные движения, эффекты которых различаются в зависимости от типа пользователя.
      • Проклятие отличается своим японским названием の ろ い Noroi , что может означать либо «проклятие» (呪 い), либо «тупой / медленный» (鈍 い), в зависимости от используемого кандзи. Вот почему он накладывает настоящее проклятие, когда используется покемонами призрачного типа, но снижает скорость, когда используется покемонами не призрачного типа.
    • В поколении II три покемона могли законно использовать оба эффекта движения, используя Преобразование или Преобразование 2, чтобы изменить свой собственный тип на тип Призрака и наоборот: Поригон, Поригон2 и Смаргл.С технической точки зрения, любой покемон, который может изменить свой тип в бою (например, с помощью смены цвета, отражения типа или угощения), может использовать оба эффекта Проклятия. Точно так же, если покемон призрачного типа использует Проклятие, находясь под действием впитывания, будет использоваться не призрачная версия.
    • Проклятие — это один из четырех ходов поколения II, тип которого изменится в более позднем поколении, остальные — Очарование, Лунный свет и Сладкий поцелуй.
    • В поколении II TM03, который содержит Проклятие, выдается только ночью человеком, рассказывающим следующую историю:
    «Позвольте мне рассказать ужасающую историю…. Жил-был мальчик, которому подарили новый Велосипед … Он хотел попробовать его прямо сейчас … Ему было так весело, что он не заметил, что солнце село … Когда ехал домой в кромешной тьме ночи, мотоцикл внезапно замедлился! Педали стали тяжелыми! Когда он перестал крутить педали, байк начал скользить назад! Как будто байк был проклят и пытался увести его в небытие! … … Визг! Мальчик ехал в гору по велодорожке! … Ба-дум ба-дум! За то, что ты так терпеливо слушал, можешь взять вот это — TM03! TM03 — это Проклятие.Это ужасный ход, который медленно снижает здоровье жертвы ».

    На других языках

    .

    Published by alexxlab

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *