Грунтовка под короед: Грунтовка под короед: технология и способы нанесения

Если вы хотите выразить благодарность, добавить уточнение или возражение, что-то спросить у автора — добавьте комментарий или скажите спасибо!

Грунтовка под короед. Подготовка стены

Грунтовка под короед. Подготовка стены

Сначала подготавливается поверхность, затем состав.

• Выровнять стену. Выровнять все углубления и дать стене хорошо высохнуть. Снять все выступающие элементы, забить или вытащить гвозди и выступающие элементы. Оставленные гвозди могут дать впоследствии ржавые пятна на оштукатуренном фасаде.
• Очистить. Поверхность следует тщательно очистить от пыли и грязи, насухо вытереть. Если есть масляные пятна, то их необходимо удалить обезжиривающим средством. Обязательно удаляется ржавчина, она со временем может проступить на покрытии.
• При необходимости положить утепляющий слой пенопласта. В этом случае готовиться придется дольше. На слой пенопласта необходимо установить армирующую сетку, и нанести армирующий клей. Затем клей будет сохнуть не менее 24 часов при теплой погоде (выше +5оС). После высыхания клея наносится грунтующая краска и также сушится.
• Если в качестве теплоизоляции предусмотрен пеноплекс, то подготовка будет немного иной. На плиты пеноплекса, закрепленные на фасаде, накладывается слой штукатурки (порошковая смесь без гранул) толщиной примерно 2 мм. Затем в него вдавливается армирующая сетка, она устанавливается так, чтобы не выступать над слоем раствора. Пока состав не застыл, он разглаживается шпателем и оставляется до полного высыхания, примерно на сутки. Затем проводится затирка всех неровностей и очистка поверхности от пыли. Следом наносят грунтовку под короед и снова сушат.
• Если утеплитель не предусмотрен, то следующим этапом будет грунтовка поверхности. Она производится специальным грунтом из цемента и кварцевого песка для максимального сцепления, так как короед накладывается толстым слоем и имеет серьезный вес в масштабах стены. Обычные проникающие грунтовки здесь не подойдут. Грунт высыхает около 30 минут при температуре +20оС, примерный расход — 150г/м2. Цвет нужно подбирать в цвет штукатурки.
• Технология нанесения на фасад из бетона грунтования не требует. Вместо этого достаточно смочить водой примерно за час до начала работы.

Кварцевая грунтовка перед короедом. Как подготовить основание для нанесения декоративной штукатурки короед

Думаю, ни для кого не секрет, что декоративная штукатурка короед и ей подобные покрытия наносятся исключительно на плотные поверхности. Как правило, нанесению такого отделочного материала на стены предшествует длительная и кропотливая работа по выравниванию основания. По большей части, в современном строительстве короед используется для отделки наружных стен, утепленных пенопластом или базальтовой плитой – именно такая технология позволяет избежать кропотливых работ по выравниванию основания.

Пенопласт или базальтовая плита высокой плотности крепятся на стену наподобие кафельной плитки, что позволяет одним махом решить две проблемы – утеплить дом и выровнять наружные стены. Впоследствии пенопласт армируется, штукатурится очень тонким слоем и только потом производится нанесение декоративной штукатурки короед.

Как подготовить основание перед нанесением штукатурки короед

С этого места мы и начнем подробно. Еще до нанесения штукатурки короед поверхность оштукатуренных стен необходимо качественно загрунтовать (не важно, пенопласт это или цементно-песчаная штукатурка). Обыкновенная грунтовка глубокого проникновения здесь не подходит – нужна особая жидкость, в состав которой входит кварцевый песок. Если вести речь о продукции компании Ceresit, то лучше, чем краска-грунтовка СТ-16, найти что-либо трудно – именно она способна обеспечить качественное сцепление штукатурки короед с любой поверхностью, а заодно и лишить основание возможности впитывать влагу.

Кстати, грунтовка такого типа используется для консервации оштукатуренной поверхности на зимний период. Это на тот случай, если кто-то не успел завершить отделку фасада и переносит нанесение декоративного покрытия на следующий сезон. Не стоит недооценивать этот шаг – перепады температуры и влажность способны быстро разрушить тонкий слой клея, нанесенного на пенопласт или базальтовую плиту. Такие природные явления просто порвут и штукатурку, и армирующую сетку.

Грунтовка Ceresit СТ-16 перед нанесением короеда фото

Но вернемся к технологии нанесения короеда и ее тонкостям.

Покраска короеда. Грунтование короеда

Итак, мы выяснили зачем и как грунтовать стены перед нанесением короеда. Но, данная декоративная штукатурка, как известно, после нанесения нуждается в покраске. Отсюда у новичков зачастую возникает другой вопрос – нужно ли грунтовать короед перед покраской?

С одной стороны, декоративная штукатурка имеет шероховатую поверхность, поэтому адгезия лакокрасочного материала и без грунта будет хорошей. Но с другой – в результате достаточно пористой структуры, расход краски получается большим, причем впитывается краска неравномерно, что проявляется на поверхности в виде пятен. Поэтому покраску приходится выполнять в несколько слоев.

Так как короед имеет рельефную поверхность, для его грунтования и покраски желательно использовать валик со средним или даже длинным ворсом.

Чтобы уменьшить расход краски и обеспечит равномерный цвет, короед грунтуют перед покраской. Данный процесс осуществляется по описанной выше схеме без каких-либо нюансов.

Грунтовка для короеда обычно используется универсальная. Также можно покрыть поверхность составом глубокого проникновения, если, к примеру, он остался после обработки основания.

Короед – так называется тип декоративной отделки внутренних или наружных стен здания. С помощью необычной по виду штукатурки можно оригинально покрасить любой дом, любое помещение.

Особенность короеда – текстурное покрытие. Раствор, который наносится на стену, содержит мелкие гранулы. В процессе растирания смеси по поверхности они образуют характерные борозды. Внешне поверхность стен как бы поедена древоточцем.

Существуют различные технологии декоративной отделки методом короед: дождик, ковер, барашек. Все зависит от способа растирки штукатурки.

Структурная штукатурка не только украсит дом, но и обеспечит хорошую защиту стен от внешнего воздействия. Подготовленную поверхность далее можно покрасить в различные цвета. Заметим, что существует способ окрашивания короеда путем колеровки рабочей смеси. Для этого в раствор добавляется специальный пигмент, который и определит будущий . Давайте же узнаем, какими способами окрашивается фасадная структурная штукатурка короед?

Видео нужна ли грунтовка стен под короед?

технология и способы нанесения |

Какую грунтовку наносить под декоративную штукатурку короед, и как вообще это правильно делать? Раньше я сам задумывался над этим вопросом, но теперь, имея за плечами определенный опыт и знания, готов подробно на него ответить. А фото-инструкция позволит вам наглядно ознакомиться с процессом нанесения.

Перед нанесением короеда стены обязательно нужно обработать грунтовкой

Нужно ли грунтовать основание перед короедом

Многие новички интересуются у специалистов – так ли нужна грунтовка перед короедом? Ведь грунтование отнимает время и увеличивает финансовые затраты.

Чтобы ответить на это вопрос, ниже я перечислю какие функции выполняет грунт:

• Улучшает адгезию. Грунт обеспечивает хорошее сцепление грунтовки с поверхностью, соответственно, увеличивает и долговечность отделки.
  Надо сказать, что данное качество имеет особую важность при нанесении штукатурки на гладкие поверхности, такие как бетон;

Грунт улучшает сцепляемость декоративной штукатурки с гладкими стенами и потолками

• Укрепляет поверхность. Грунт проникает в поры основания и склеивает их, укрепляя тем самым поверхность. Данное качество имеет значение для рыхлых/пористых поверхностей;
• Обеспечивает равномерное впитывание влаги. Грунтовка образует на поверхности пленку, благодаря чему влага впитывается равномерно, соответственно, равномерно высыхает и декоративная штукатурка.
  Надо сказать, что для короеда равномерное высыхание имеет большое значение, так как от этого во многом зависит качество затирки;

Качество затирки во многом зависит от равномерности застывания покрытия

• Оказывает антисептическое воздействие. Благодаря этому на обработанной грунтом поверхности не образуется грибок. Это качество является особенно важным при выполнении внутренних работ.

Из всего вышесказанного следует, в принципе можно обойтись без грунта. Но при этом невозможно гарантировать качество отделки и долговечность. Поэтому, чтобы не пришлось дополнительно тратиться на стройматериалы и выполнять работу дважды, лучше основание все же прогрунтовать.

Какую грунтовку использовать

В настоящее время в продаже можно встретить следующие виды грунтовок:

Далее рассмотрим в каких случаях какие из этих составов используют под декоративную штукатурку.

Адгезионные

Название этой группы грунтовок говорит само за себя – они предназначены для улучшения адгезии. Соответственно адгезионные грунты следует наносить на гладкие поверхности, такие как бетон.

На схеме показан принцип действия адгезионного грунта типа бетоноконтакт

Адгезия улучшается благодаря наличию в составе грунта мелкого абразива. Т.е. основание после грунтования становится шероховатым как наждачная бумага. Благодаря этому декоративная штукатурка хорошо прилипает.

Чаще всего в качестве абразива используют песок или игольчатый кварц. Т.е. грунт, по сути, представляет собой связующее (клеящее) вещество на водной основе с наполнителем в виде твердых минеральных частичек.

Качественный грунт от Кнауф — бетоконтакт

Все цены, указанные в данной статье, актуальны весной 2017 года.

Грунт проникает в поры основания и укрепляет его

Глубокого проникновения

Основное свойство грунтов глубокого проникновения заключается в способности проникать глубоко в структуру пористых поверхностей (до десяти сантиметров). При этом жидкость обладает свойством связующего вещества.

После обработки поверхностей грунтом глубокого проникновения, они приобретают более высокую прочность. Потребность в таком составе может понадобиться, если вы решили нанести короед, к примеру, на старую штукатурку, которая пылит и осыпается.

На фото грунт глубокого проникновения от отечественного производителя Эталон

Качественная универсальная грунтовка от немецкого производителя Церезит

Универсальные

Универсальные грунты не зря называются таковыми – они обладаю сразу всеми функциями, которые перечислены выше:

• Улучшают адгезию;
• Укрепляют поверхность;
• Создают пленку для равномерного впитывания влаги.

Такие составы подходят для нанесения на штукатурки, клеевые составы, применяемые в «мокрых» фасадах и пр.

Dufa Putzgrund – отлично зарекомендовавший себя грунт от финского производителя

Грунтовки различаются не только по типу действия, но и по области применения. Они бывают наружными, для внутренних работ и универсальными. Составы для внутренних работ более экологичные, чем их фасадные аналоги.

Технология нанесения

С выбором грунта мы разобрались, теперь давайте рассмотрим как наносится грунтовка под декоративную штукатурку короед. Так как нанесение декоративной штукатурки подразумевает, что стены уже подготовлены, т.е. очищены и выровнены, данную процедуру опустим, и приступим непосредственно к грунтованию.

Итак, данная работа осуществляется в такой последовательности:

• Смочите валик в жидкости;
• Слегка отожмите валик, раскатав его на специальной площадке в кюветке;
• Обработайте валиком поверхность, раскатывая жидкость равномерным тонким слоем. Старайтесь избегать потеков, и большого скопления жидкости на отдельных участках.
  При необходимости смачивайте валик в жидкости;
• Труднодоступные участки обработайте при помощи малярной кисти;
• Затем работу нужно прекратить до полного высыхания поверхности. Время высыхания зависит от влажности и температуры окружающей среды. Обычно при температуре 20 градусов грунт высыхает в течение нескольких часов;
• После высыхания основания процедуру нужно своими руками повторить, после чего опять дождаться полного высыхания поверхности.

На этом процесс грунтования завершен.

Грунтование короеда

Итак, мы выяснили зачем и как грунтовать стены перед нанесением короеда. Но, данная декоративная штукатурка, как известно, после нанесения нуждается в покраске. Отсюда у новичков зачастую возникает другой вопрос – нужно ли грунтовать короед перед покраской?

Чтобы краска легла равномерно, штукатурку необходимо прогрунтовать

С одной стороны, декоративная штукатурка имеет шероховатую поверхность, поэтому адгезия лакокрасочного материала и без грунта будет хорошей. Но с другой – в результате достаточно пористой структуры, расход краски получается большим, причем впитывается краска неравномерно, что проявляется на поверхности в виде пятен. Поэтому покраску приходится выполнять в несколько слоев.

Так как короед имеет рельефную поверхность, для его грунтования и покраски желательно использовать валик со средним или даже длинным ворсом.

Чтобы уменьшить расход краски и обеспечит равномерный цвет, короед грунтуют перед покраской. Данный процесс осуществляется по описанной выше схеме без каких-либо нюансов.

Грунтовка для короеда обычно используется универсальная. Также можно покрыть поверхность составом глубокого проникновения, если, к примеру, он остался после обработки основания.

Если у вас закончилась грунтовка, можно разбавить краску водой в соотношении один к двум, и использовать ее как грунтовку.

Вот, собственно, и вся информация о грунтовании поверхности перед декоративной штукатуркой короед, которой я хотел с вами поделиться.

Вывод

Теперь вы знаете чем и как грунтовать основание перед нанесением короеда. Обязательно посмотрите видео в этой статье. Со всеми вопросами относительно использования грунтовки вы можете обратиться ко мне в комментариях, и я с радостью вам отвечу.

Каким механизированным инструментом наносят штукатурку?

Андрей, для механизированной штукатурки используются растворонасосы и хоперы с соплами, в которые помещаются мягкие и жесткие растворы. Машина для набрасывания состава имеет стальной контейнер для зачерпывания раствора. Четыре сопла используются для подачи смеси, 4 – для воздуха. Трубка-держатель для удобства использования покрыта материалом, предотвращающим скольжение рук. На ней есть клапан для подачи сжатого воздуха. Пневмолопата имеет среднюю производительность труда 60 квадратных метров в час.

Такие агрегаты бывают стеновые и потолочные – отличаются формой ковша и его нахождения относительно держателя. Пневмопистолет имеет короткий ствол-форсунку с насадками, через которые смесь разбрызгивается на поверхность различными методами. Верх картушного пистолета оборудован емкостью в виде пластиковой либо металлической воронки, имеющей объем 5 л. Рукоятка в нынешнем оборудовании имеет спусковой крючок, позволяющий осуществлять либо прекращать подачу раствора. С виду он похож на аэрограф. Внизу ручки имеется ответвление для присоединения шланга с воздухом к компрессору.

Разные насадки дают возможность применять составы различной консистенции. Регулировка подачи смеси и воздуха позволяет делать выравнивание поверхности и фактурный набрызг ( при декоративной отделке). Рынок строительного оборудования отличается изобилием машин для нанесения раствора механизированным методом. У каждой из машин свои технические параметры, габариты и комплектация. Немецкие агрегаты имеют компактные размеры и позволяют помимо подачи раствора осуществлять покраску.

Грунтовки под декоративные структурные фасадные штукатурки

Грунтование поверхностей перед нанесением выравнивающих и отделочных слоев в качестве технологического процесса в строительстве применяется не так уж давно. Сегодня понятно, что без них не обойтись на многих этапах строительства и ремонта. Часто потребители не знают какую грунтовку использовать под штукатурку, какая грунтовка нужна под плитку, под краску, под шпаклевку. Какую грунтовку лучше выбрать для конкретной задачи, когда и как использовать грунт?

Кратко разберемся для чего нужны грунтовки, особенности их применения. Грунтовки для минеральных оснований в строительстве, можно разделить на несколько групп.

• Грунты глубокого проникновения, укрепляющие, выполненные в виде растворов акриловых дисперсий.
• Водорастворимые силикатные или силиконовые грунтовки. Применяют их, как правило, в окрасочных системах или при нанесении готовых к употреблению декоративных штукатурок, соответственно, силикатных или силиконовых.
• Контактные грунты, имеющие в своем составе кварцевый песок. Эти грунтовки образуют на поверхности материалов шероховатую полупрозрачную белую или цветную пленку.
• Грунты реставрационные специальные, используемые в системах материалов в специальном сегменте строительных, ремонтных или реставрационных работ.

Основное указание любого производителя для подготовки основания: «Основание должно быть сухим, прочным и стабильным, очищенным от пыли, грязи, жировых или масляных пятен, а также других веществ и образований, препятствующих адгезии». Это идеал, к которому должен стремиться каждый строитель. Но, как и всякий идеал, в реальных условиях он труднодостижим. Грунтовки значительно упростили вышеописанную технологию подготовки поверхности. Современные универсальные грунтовки решают ряд главных проблем в подготовке поверхности:

* снижение водопоглощения основания,

* обеспыливание

* поверхностное укрепление.

Рассмотрим отдельно грунтовки для фасадных работ под финишные штукатурки. Все производители для подготовки стен под декоративную штукатурку «Короед» или «Шуба», различных мозаичных штукатурок рекомендуют использовать грунт с кварцевым песком.  В линейке материалов АТЛАС есть две основные  такие грунтовки.

ATLAS SILKON ANX — грунтовка под силиконовую штукатурку и силиконо-силикатную штукатурку.

Эта силиконовая грунтовка для фасада грунтует основание под тонкослойные силиконовые и силиконо-силикатные штукатурки. ATLAS SILKON ANX по составу – водная дисперсия синтетических смол. Содержит кварцевую крошку – повышает адгезию благодаря значительному расширению эффективной поверхности между слоями. Образует шероховатую поверхность, которая облегчает нанесение очередного слоя, так как предотвращает «скольжение» наносимой штукатурки. Защищает основание от неблагоприятного воздействия нового слоя – является химическим барьером между основанием и штукатуркой, ограничивая их взаимные реакции — ограничивает пробивание цвета из основания и возникновение пятен на поверхности штукатурки. Обладает высоким уровнем адгезии – к бетону минимум 1 МПа. Этот грунт под декоративную штукатурку ограничивает впитываемость основания – предотвращает слишком интенсивную влагоотдачу основанию из свеженанесенной штукатурки.

Грунт под декоративную штукатурку важная составляющая системы отделки фасада, грунт содержит кварцевую муку и служит важным связующим звеном между основанием и декоративной штукатуркой фасада SILKON ANX или ASX грунтовка для силиконовых и силикатных декоративных штукатурок

ATLAS CERPLAST – Грунтовка под минеральные штукатурки, а также под акриловые и мозаичные штукатурки. Эта грунтовка под декоративные штукатурки обеспечивает основанию идеальную адгезию, выравнивает поглощаемость и укрепляет основание. Является грунтовкой для фасада, облегчает нанесение и формирование фактуры, выравнивает цвет основания. Эта готовая грунтовка строительная выпускается в белом цвете, но может быть сколерована в доступные цвета под выбранные темные цвета мозаичных штукатурок DEKO M.

Грунт под декоративную штукатурку важная составляющая системы отделки фасада, грунт содержит кварцевую муку и служит важным связующим звеном между основанием и декоративной штукатуркой фасада ATLAS CERPLAST грунтовка для минеральных декоративных штукатурок

Грунты SILKON ANX и Церпласт в течение полугода являются защитой от атмосферных фасадов для неоштукатуренного фасада, именно после нанесения этих грунтовок можно оставить утепленный фасад осенью до весны, с тем, чтобы весной сделать декоративный штукатурный слой.

На подготовленную вышеуказанными грунтовками под штукатурку поверхность легко наносятся также любые виды выравнивающих растворов или плиточных клеев. Какую грунтовку под декоративную штукатурку выбрать решается исходя из состава самой штукатурки. Применение этих грунтовок стен фасада уменьшают потери дорогого декоративного финишного материала.

Купить грунтовку под декоративную штукатурку, грунтовку фасадную, адгезионный грунт вы всегда можете в нашей компании. Грунтовки Атлас всегда есть в наличии.

Осуществляем бесплатные консультации и выезд специалиста на объект строительства или ремонта.
Звоните: Ковчин Дмитрий: +7-921-957-42-55.

Декоративная штукатурка короед — технология нанесения, сделай сам

Что представляет собой «короед»?

Это декоративная, композитная штукатурка — белый порошок, с мелкими камушками-гранулами. От размера гранул зависит конечный вид рисунка. Обычно используют короед с размером гранулы 1,5- 2,5. При нанесении штукатурки такие гранулы дают наиболее четкий и легко получаемый рисунок.

Существует два вида декоративной штукатурки короед – акриловая и на гипсовой основе. Если акриловая штукатурка продаётся в готовом виде, то гипсовая в виде смеси сухих компонентов. Срок службы составляет не менее 15 лет, отличная устойчивость к природным воздействиям: осадкам, высоким и низким температурам.

Достоинства штукатурки «короед»

— Материал легкий, не создает больших нагрузок на стены: данная штукатурка сделана на основе минерального вяжущего компонента — обычный кварцевый песок заменяется минеральным наполнителем и небольшим количеством полимерных компонентов.

— Ударопрочная, паропроницаемая, гидрофобная и морозостойкая штукатурка пригодна для внутренних и наружных работ.

— Экологически безопасное покрытие, оно устойчиво к воздействию открытого огня и не выделяет вредных компонентов при температурном воздействии.

— Долговечность «короеда» позволяет ему практически не подвергаться разрушениям в течении долгого периода времени.

— Штукатурка не смывается осадками, не подвержена разрушительному воздействию плесени, не дает усадки в процессе отвердения.

— Легко окрашивается в любой необходимый оттенок акриловой, водоэмульсионной краской с добавлением колора. При этом краска практически не смывается и не блекнет.

Материалы и инструменты для нанесения штукатурки:

Декоративная штукатурка «короед»

Металлический шпатель

Пластмассовая терка

Дрель с насадкой миксер

Резервуар для развода штукатурки

Распылитель, веник для разбрызгивания

Валик, ванночка – для работы с грунтовкой

Подготовка поверхности

Прежде чем декоративная штукатурка будет наноситься на поверхность, её надо подготовить. Поверхность очищается от пыли, жира, любых масел, грязи и плесени. После этого поверхность надо выровнять, заполнить все трещины и ямы шпатлёвкой. Полученная плоскость должна быть ровной, неровности не должны превышать размеров зерна штукатурки.

До того, как наносить декоративную штукатурку короед, на основу надо наложить краску-грунт, которая должна иметь тот же оттенок, что и цвет штукатурки. Такая грунтовка обеспечит в дальнейшем хорошую адгезию, и не будет просвечивать через основную массу.

Подготовить поверхность для нанесения штукатурки можно, также прогрунтовав ее глубоко проникающей акриловой грунтовкой.

Время высыхания грунтовки порядка четырёх-шести часов, после чего можно начинать штукатурить. Лучший результат получается, когда на всех этапах используются материалы от одного производителя.

К примеру, если будет использоваться декоративная штукатурка церезит короед, то для подготовки поверхности желательно использовать грунтовку марки СТ16.

Приготовление смеси

Если для работы будет использоваться сухая смесь, то её необходимо развести согласно инструкции на упаковке. Приведем основные правила :

-нужно подсыпать штукатурку в воду, а не наоборот;

-температуры воды должна быть (15-20)°С;

-перемешивать получающуюся массу надо, используя миксер или дрель с насадкой;

-после достижения нужной консистенции надо дать смеси постоять несколько минут, а затем перемешать всё ещё раз.

У каждой штукатурки свой срок годности в разведённом состоянии, указанный на упаковке. “Обновить” его добавкой воды не получится, поэтому разводить надо столько, сколько удастся использовать за указанное время.

Нанесение декоративной смеси “Короед”

Перед нанесением внешний периметр стены оклеивается малярным скотчем, чтобы защитить от загрязнения соседние поверхности.

Металлическим шпателем начинаем нанесение штукатурки на стену. Старайтесь наносить равномерно для получения ровного слоя одинаковой толщины.

Само нанесение штукатурки – процесс, к которому нужно привыкнуть. Самое важное в нём – соблюдать толщину слоя, равную диаметру зерна. Если он равен 1 мм, то и слой должен быть точно такой же толщины. Определить толщину штукатурки несложно – при нанесении её надо растягивать по стене как шпаклёвку. Когда на свежем слое начнут появляться небольшие канавки (или бороздки), это будет означать, что толщина слоя достигла своего минимума, равного диаметру зерна.

Уложив штукатурку, подождите, пока она немного «возьмется». Жидкий короед невозможно протереть. Обычно это занимает где-то до получаса времени.

Создание рисунка на штукатурке короед

После окончания работ по нанесению, необходимо дождаться, пока штукатурка схватится. Это проверить очень легко – используйте пластмассовую терку. В случае, если короед на ней остается – нужно подождать еще какое то время , если нет – то можно смело продолжать работу. Обработка и формирование рисунка на стене выполняется с помощью пластмассовой терки.

Рисунок (борозды) могут быть горизонтальными, вертикальными, скрещёнными, круговыми, это определяется выбранным вами узором.

От направления движения рук будет зависеть рисунок:

ровные движения сверху вниз или снизу вверх — прямой дождик;

ровные движения влево и вправо- горизонтальный дождик;

движения под углом — косой дождик;

круговые движения рук создадут, соответственно, круговой рисунок;

Старайтесь создавать рисунок так, чтобы поверхность оставалась ровной, без наплывов.

В завершении работ по нанесению штукатурки необходимо пройтись ещё раз тёркой по всем стыкам, не допуская высыхания незатёртого стыка, поскольку он обязательно будет виден на готовой стене. После того как отклеивается малярный скотч, выступающую кромку короеда можно подрезать обычным канцелярским ножом.

Покраска и лессировка штукатурки короед

Покраска штукатурки короед осуществляется или валиком, или кисточкой. Так же можно использовать краскопульт для обработки стены под давлением.

Лессировка – нанесение на просохший слой масляной краски тонких прозрачных красочных слоев, сквозь которые просвечиваются нижние, обогащая колорит.

В качестве лессирующего состава желательно использовать прозрачный акриловый лак. Он бывает матовый и глянцевый. Также возможно добавление различных блесков на свое усмотрение.

Прежде чем приступить к лессировке (покрытию поверхности прозрачной глянцевой краской или лаком), дайте время, чтобы краска высохла. Перед лессировкой грунтуем снова. Иначе лак может лечь пятнами. Чтобы сделать это, можно взять всю туже акриловую грунтовку.

После того, как основа высохла (около двух часов), наносим лак, с помощью резиновой или пластиковой лопаточки. Лак растирается по всей поверхности, пытаясь равномерно заполнить все пазы, а с гладких выступающих поверхностей лак убрать, чтобы получить более выпуклую фактурность. Если все же, где-то лак оставил темные пятна, протрите чистой влажной тканью.

Нанесение штукатурки короед видео

Покраска короеда: пошаговая инструкция с фото

Применение шпаклевок для облицовки на сегодняшний день бьет все рекорды по востребованности. Штукатурка короед относится к самым популярным декоративным покрытиям для наружной и внутренней отделки стен.

Именно поэтому покраска короеда в домашних условиях интересует каждого мастера. Сегодня мы рассмотрим главные принципы работы с краской для штукатурки и выясним, как происходит покраска штукатурки короед в два цвета.

Что необходимо знать

При окрашивании короеда следует учитывать не только степень подготовки поверхности, но и нюансы, которые проявляются из-за неравномерного основания. Фасадный материал имеет двухслойную фактуру, при которой поверхность похожа на хаотичное передвижение по стене жука-короеда. Такой эффект стал возможен благодаря добавлению минеральных гранул в штукатурку, которые при затирке перемещаются по основанию и создают неравномерные борозды. Именно они становятся причиной всех проблем в процессе окраски фасада своими руками.

Давайте на примере увидим, какие проблемы появятся при неправильном окрашивании короеда:

• Валик с коротким ворсом не достанет до всех углублений и некоторые борозды не прокрасятся. Это нанесет большой эстетический вред для всей облицовки
• При использовании валиков, у которых длинный ворс захватывается большее количество краски, которая не успев засохнуть будет стекать по углублениям. Придется дополнительным инструментом убирать подтеки, а это затянет и затруднит процесс оформления штукатурки

Первый способ – красим раствор

На этом этапе колер добавляют с штукатурный раствор перед его нанесением на стены. При этом вы сами выбираете цветовой оттенок и можете даже играть с его насыщенностью. Данная технология позволяет окрасить борозды короеда, которые сложно заполнить при финишной отделке. Техника нанесения самого декоративного раствора не отличается от стандартной:

1. С помощью шпателя смесь разглаживается по стене и через 15-20 минут, когда начинается застывание поверхность затирается в нужном направлении
2. После полного высыхания начинаются работы по окрашиванию

Для итогового покрытия красящий состав может быть идентичен пигменту, который добавлялся в шпатлевку, а можно выбрать наоборот темные или светлые оттенки для контраста поверхности. Во время покраски валики не прижимают к стенам для того, чтобы краска не затекала в пустоты.

Важно! Расход материала при таком способе оформления значительно уменьшается.

Не забываем про грунтовку

Всем нам известно, что грунтовка выполняет важные функции по улучшению адгезии поверхности с финишной отделкой, поэтому на вопрос, нужно ли грунтовать короед перед покраской, ответ однозначен: — да. Покраска штукатурки короед может выполняться с помощью краски-грунта, для этого нужный пигмент добавляется в адгезионный раствор. Загрунтовать площадь оформления не составит труда.

Наноситься грунтовочная смесь может при помощи распылителя или вручную. Два варианта отличаются своими преимуществами, так как жидкий раствор с легкостью попадает в борозды, как при механизированном способе нанесения, так и при ручном окрашивании. На высохшие стены следует нанести краску, которая будет идентична цвету, добавленному в грунт.

Наружный фасад дома требует ухода, поэтому обработать поверхность после завершения штукатурных работ нужно в ближайший период после засыхания. Купить краситель лучше с запасом, так как разные партии могут иметь разный оттенок, что соответственно скажется на внешнем виде облицовки.

Как покрасить декоративную штукатурку короед (видео)

Классический способ покраски

Самый распространенный метод окраски штукатурки короед – нанесение красок после завершения всех облицовочных работ. Для этого следует подобрать цвет, который будет сочетаться и гармонично смотреться с крышей, если окраска происходит снаружи и с общим дизайном, если красить вы будете внутренние помещения.

Важно! Короед в домашнем интерьере прекрасно комбинируется с другими отделочными материалами. Это могут быть обои, деревянные панели, вагонка.

После того, как вы закончили штукатурить стены, можно перейти к выбору красок. Среди современных материалов подойдут такие:

• Акриловый раствор
• Алкидный
• Масляный

Важно! Готовый фото образец поверхности можно увидеть в каталогах красящих средств, кроме этого большинство популярных производителей штукатурок создают свои линейки красок, которые будут стоить на порядок дешевле.

Водоэмульсионный состав не подходит для окрашивания короеда. Варианты покраски короеда краскопультом на видео дают ответы новичкам на все интересующие вопросы. Если в вашем хозяйстве имеется компрессор, то нанести краску с помощью краскопульта будет намного удобнее. На каждый обработанный квадратный метр понадобится меньшее количество раствора, а это снизит ваши затраты на оформление.

Покрасить можно в двойной способ и даже в три цвета, это зависит от ваших знаний и подготовки. Двухцветный способ дает возможность создать трехмерную поверхность, а перламутровый оттенок только улучшит ее. Также в краску добавляют золото – такой блеск применяют для песочных и желтых оснований.

Важно! Сочетание оттенков лучше доверить профессионалу или цветовому кругу, который можно найти на просторах интернета.

Для качественного проведения работ необходимо знать сколько сохнет штукатурка короед перед покраской. На самом деле вся информация представлена производителем на упаковке, так как сохнуть различные торговые марки могут разное количество времени. В среднем высыхать смесь будет от одного до пяти дней. Если вы решили штукатурить на выходных, то будьте готовы к тому, что следующие вам придется потратить на покраску.

Нанесенный на стены короед создает не только прекрасный декор, он надежно защищает поверхности от негативного воздействия атмосферных осадков. Кроме того, разрешено шпаклевать поверхности на кухне, в спальне и даже детской комнате. Это говорит о безопасности материала, несмотря на которую цена остается доступной для населения. Сочетание качеств и преимуществ, наличие образцов, легкий подбор материала по нужным параметрам выводит штукатурку короед на лидирующие позиции среди отделочных элементов.

Кроме того, пульверизатор дает возможность не только оштукатуривать стены и наносить смесь в несколько раз быстрее, но и окрашивать полученные основания. Шпаклевкой также скрываются мелкие изъяны и неровности – это значит штукатурить стены при помощи короеда с последующим окрашиванием будет еще выгоднее.

Фотогалерея готовых работ

расход на м2, использование и цена

Обновлено:

Нужно ли грунтовать перед шпаклевкой? Проведение наружных работ предусматривает обязательное применение грунтовок для штукатурки. Они выполняют полезные функции. Причем их рекомендуется использовать как до нанесения штукатурных смесей короед, так и после них. Поговорим об этом более подробно в нашем сегодняшнем материале.

Содержание статьи

Зачем грунтовать поверхности

Этим вопросом задаются многие люди, для которых выполнение наружных работ — это что-то новое и неизведанное. Но все приходит с опытом, потому переживать не стоит. Прежде чем нанести эмаль или фасадную краску, рекомендуется применить грунт.

Грунтовка перед штукатуркой считается обязательной, как и в некоторых ситуациях грунтовка после шпаклевки. Следует учитывать, что важно не просто правильно нанести смесь. Грунтовка для штукатурки должна быть качественной и выполнять поставленные задачи. Потому грунтовка под штукатурку выбирается особо тщательно. Если грамотно подобрать грунтовку под штукатурку, вы сможете создать качественную поверхность, добиться необходимых свойств:

• Создать высокий уровень адгезии, который позволит нанести другие отделочные материалы поверх штукатурки, либо обеспечить сцепление самой штукатурной смеси со стеной из газобетона или другого стройматериала;
• Повысить устойчивость к внешним воздействиям, механическим нагрузкам. Это достигается за счет того, что грунтовки для штукатурок заполняют микропоры, способствуют укреплению структуры материала;
• Обеспечить защиту от внешних негативных факторов, влияния атмосферы. На поверхности создается полимеризованная пленка, что обеспечивает гидрофобность.

Не важно, грунтовка или шпаклевка будет наноситься на поверхность. Главное, чтобы материалы были высокого качества. Если грунтовка под шпаклевку будет низкосортной, ожидаемого эффекта вы не получите, а обработка окажется напрасной тратой времени и денег. Теперь поговорим более подробно о том, для чего грунтовка наносится перед оштукатуриванием и зачем она нужна после отделки шпаклевкой.

1. Перед штукатуркой. Основание из газобетона, кирпича и другого стройматериала активно впитывает влагу, которая находится в штукатурной смеси для наружных работ. На отдельных участках газобетона впитывание происходит интенсивнее, отделка не успевает схватиться с поверхностью, из-за чего материал отслаивается, отпадает. Даже если это качественная штукатурка короед, избежать подобной проблемы не удастся без грунтовки. Она повышает адгезию, препятствует впитыванию влаги поверхностью газобетона.
2. После штукатурки. Важно использовать штукатурку не только перед, но и после проведения наружных работ. Если вам требуется нанести клей, обои, краску. Закончив выполнение наружных работ, поверхность из штукатурки короед не остается однородной и не имеет одинаковую плотность. Потому краска ложится не равномерно на каждый 1м2 стены, а обои отходят, поскольку не способны удержаться из-за хаотичного впитывания клея. Плюс грунтовка снижает расход клея и краски, что делает ремонт более экономичным.

Поиск оптимальных решений

Перед началом ремонта не все понимают, какую грунтовку использовать сначала, какую перед оштукатуриванием. Подойдет ли короед, либо на газобетон лучше укладывать иной вариант материала. Вопросов много. Среди них не на последнем месте стоит вопрос выбора грунтовки для наружных работ.

Материалы пропитки очень распространены, представлены в широком ассортименте. Потому для определенных поверхностей следует выбирать соответствующие грунтовочные составы. Перед покупкой взгляните, из чего выполнена стена, где планируется работа — из газобетона, кирпича, дерева и пр.

Некоторые грунтовки тщательно проникают в основание газобетона, заполняют поры, укрепляют структуру. Другие внутрь не стремятся, а вместо этого создают гидрофобную пленку с наружной стороны. Есть такие грунтовки, которые обеззараживают поверхность, оказывают антисептическое воздействие. Их бывает полезно использовать, когда на стенах из газобетона наблюдается большое количество плесени, грибка, склонность к появлению микроорганизмов.

Но отдельно взятые грунтовки требуют комплексного применения, сочетания с другими составами. Отсюда растет расход смесей и расход денежных средств. Грунтовку под короед лучше брать того же производителя, иначе могут возникнуть «конфликты» между материалами. А вот под грунт шпаклевку выбирают редко. Обычно отталкиваются от того, с какой шпаклевкой вы имеете дело.

Потому сегодня актуально применять универсальные грунтовки, которые выполняют сразу несколько функций при нанесении на штукатурный слой. Это снижает расход ваших финансов, плюс положительно влияет на расход самого главного ресурса — времени. Да и сама шпатлевка расходуется заметно меньше, как и эмаль, краска и иные материалы.

Выбираем грунтовку

Важно перед началом работ понять, с какими основаниями вам предстоит работать. Ведь не каждая грунтовка подходит под любой тип поверхности. Здесь во многом предопределяется судьба вашего ремонта, если вы неправильно сделаете выбор сначала.

Сегодня нашли широкое применение следующие составы, функции которых позволят вам понять, подходят они вам или нет.

1. Укрепляющие. Такие грунтовки подходят для оштукатуренных поверхностей, которые имеют рыхлую, нестабильную структуру, характеризуются большим количеством микропор. Если ваш короед уже пережил свои года, обрабатывать его следует именно таким грунтом.
2. Составы глубокого проникновения. Когда короед наносился лишь недавно, актуально будет нанести подобный тип грунтовки. Плюс его применяют при работе с поверхностью из асбоцемента или подобных ему. Определите расход на 1м2 стены, чтобы не прогадать с количеством грунтовки.
3. Антикоррозийные. Если хотя бы 1м2 стены имеет металлические включения, тогда их обязательно обрабатывают грунтовками с антикоррозийными свойствами.
4. Смеси с повышенной адгезией. Когда на поверхности скапливается большое количество загрязнений органического или неорганического происхождения, для сцепления с ней отделочных материалов обязательно воспользуйтесь подобными грунтовками.
5. Универсальные. Актуальны, когда на 1м2 имеются металлические включения, загрязнения, рыхлая поверхность и прочие характерные особенности, указанные в предыдущих пунктах.

Смеси для оштукатуренных поверхностей

Если брать во внимание весь представленный сегодня ассортимент грунтовок, предназначенных для работы с штукатуркой, их можно разделить на две категории:

• Адгезионные;
• Укрепляющие.

Оба типа представлены в виде готовых или сухих смесей. Для их разведения применяют воду или органические растворители.

1. Укрепляющие применяются в качестве первичной обработки. Их второе популярное название — праймер. Его функция заключается в создании гомогенного покрытия из наружного слоя. Глубина проникновения составляет до 3 сантиметров, но отдельная категория составов глубокого действия способны впитываться на 10 сантиметров. Расход такой грунтовки на 1м2 составляет от 50 до 120 грамм. Это зависит от типа поверхности. Расход у смесей глубокого действия от 100 грамм на 1м2.
2. Адгезионные. Они служат для обеспечения лучшего сцепления между слоями отделочных материалов. Расход на 1м2 меньше укрепляющих грунтовок.

Принимая во внимание связующие компоненты грунтовки, их делят на несколько разновидностей:

• Алкидная;
• Акриловая;
• Минеральная;
• Полистирольная;
• Фенольная и пр.

Самыми популярными являются первые три. О них немного детальнее.

1. Алкидные. Подходят практически для любых поверхностей, включая кафель, стекло, эмаль и дерево. Перед нанесением штукатурки и после обработки штукатурного слоя этой грунтовкой, следует выждать около 15 часов.
2. Акриловые. Универсальные составы, которыми обрабатывают старые и новые покрытия из штукатурки короед и прочих ее видов. Прекрасно ложатся на бетон, дерево, эмаль, кирпич, ГКЛ, ДСП.
3. Минеральные. Применяются в строительстве с целью создать более прочное покрытие на пористых и нестабильных поверхностях. Хорошо показали себя грунтовки на бетоне, газосиликате, керамзитобетоне, кирпичах.

Грунтовка — невероятно важный компонент для проведения штукатурных и прочих ремонтных, строительных работ. Многие недооценивают ее значимость, из-за чего расплачиваются потом низким результатом проделанных процессов, эмаль отпадает или финишная шпаклевка не удерживается более года.

Короедов и изменение климата в США

Препараторы

Барбара Бенц, Исследовательская станция Скалистых гор, Кир Клепциг, Южная исследовательская станция

Имеется заархивированная версия этого тематического документа

Проблемы

Короеды, которые заражаются и размножаются на живых деревьях, способны вызывать гибель деревьев в масштабе всего ландшафта. В Соединенных Штатах (США) виды из родов Dendroctonus и Ips являются основными виновниками.В период с 1997 по 2010 год более 5 миллионов гектаров были поражены короедами в западной части США, в первую очередь горным сосновым жуком ( D. ponderosae ), еловым жуком ( D. rufipennis ) и ips ( I. confusus). ) (1), а количество углерода (C) в деревьях, погибших от этих насекомых, превышает количество углерода (C) в деревьях, погибших в результате пожара (2). На юго-востоке и северо-востоке США сосновый жук южный ( D. frontalis ) с 2008 года поразил более 14 000 га, особенно в Нью-Джерси и Миссисипи.До активности в конце 2000-х годов расширяющиеся заражения южным сосновым жуком не обнаруживались на юго-востоке и северо-востоке с 2002 г. (3). Ясно, что вспышки короедов существенно влияют на динамику лесных экосистем и углеродные циклы, и исследования показывают, что повышение летних и зимних температур является основными факторами вспышек популяций жуков в США и очевидного расширения ареала некоторых видов (4, 5, 6). Горный сосновый жук, еловый жук и южный сосновый жук являются примерами короедов, способных к быстрому росту популяции.Популяции существуют на низком уровне в течение многих лет, пока не будут вызваны такими факторами, как засуха (7, 8, 9), ветровал (10) и болезнетворные микроорганизмы, вызывающие стресс у деревьев (11). Другие виды жуков-короедов, такие как шиповник, могут быть вызваны аналогичными условиями, хотя их популяционная динамика более напрямую связана с состоянием дерева-хозяина (12). После срабатывания триггера рост популяции зависит от масштаба триггера, продолжающихся благоприятных условий, включая подходящие деревья-хозяева по всему ландшафту (13), и температуры, способствующей выживанию зимних жуков (14, 15) и успешных атак деревьев летом (16). ).

Самка горного соснового жука пережевывает флоэму дерева-хозяина, откладывая яйца.

Температура стимулирует физиологические процессы короеда, такие как развитие личинок и закаливание, тем самым напрямую связывая температуру с ростом популяции. В целом более высокие температуры приводят к более высокой выживаемости и более быстрому развитию, хотя есть температуры, выше которых выживаемость и развитие снижаются (17). Жуки-короеды убивают свои деревья-хозяева посредством массовых атак — процесса, который требует синхронизированного появления взрослых особей.Синхронность появления происходит через пороги развития (17) и диапаузы (18), обусловленные температурой, то есть состояние покоя с пониженным дыханием. Сильная роль температуры в росте популяции и та роль, которую сокращение количества осадков может сыграть в стрессе деревьев-хозяев, предполагают, что связанные с изменением климата сдвиги температуры и количества осадков повлияют на популяции короедов в будущих лесах. Это может привести к увеличению популяции короеда или, в некоторых случаях, к его сокращению, в зависимости от вида и географического положения (4, 16).

Вероятные изменения

Чтобы добиться успеха в обширных географических регионах, среди видов короедов (19) и среди видов произошла адаптация к местным условиям окружающей среды. Виды, которые заселяют деревья и размножаются на деревьях в теплых местах обитания (например, некоторые популяции южных сосновых жуков и ласточек), развили физиологические механизмы, которые позволяют создавать несколько поколений в течение одного года. Виды с деревьями-хозяевами в более холодном климате (например, горный сосновый жук и еловый жук) эволюционировали, чтобы выжить в холодные зимы, и вырастают взрослыми, чтобы нападать на деревья в теплые летние месяцы.Таким образом, эффект потепления будет зависеть от вида и сезонности потепления. Например, кедровник южный может иметь до 7 генераций в год в наиболее теплой части своего ареала (3). Однако даже при повышении температуры жук горный сосновый на всем протяжении своего текущего распространения может не иметь возможности производить несколько поколений за один год, поскольку он ограничен развитыми адаптациями16. Помимо различного воздействия потепления на сроки развития, потепление зимой будет иметь положительное влияние на рост популяции большинства видов короедов за счет снижения смертности от холода (5, 14, 15, 20).

Считается, что виды, которые в настоящее время не в полной мере занимают ареал своего дерева-хозяина, по крайней мере частично, ограничиваются климатом. Другие факторы, такие как конкуренция, могут играть роль, но температура может быть особенно ограничивающей. Недавнее повышение температуры оказало наибольшее влияние на популяции жуков-короедов в умеренно прохладных местообитаниях, что привело к увеличению численности популяции. Например, вспышки популяций южного соснового жука в настоящее время устойчивы в Нью-Джерси (21), а вспышки горного соснового жука в высокогорных лесах продолжаются темпами, невиданными за последнее столетие (22).Повышение минимальных температур — один из факторов, связанных с расширением ареала горного соснового жука в Канаде на север. Деревья подвергаются нападениям дальше на север, чем предполагают исторические записи за последние 100 лет (23). Повышение успешности популяции и расширение ареала из-за высвобождения из-за климатических ограничений недавно наблюдалось и наиболее изучено в северных широтах. Существует также потенциал для видов, которые в настоящее время ограничены южными широтами в пределах США, для расширения своего ареала на север с прогнозируемым повышением температуры, хотя подробная информация о тепловых воздействиях на приспособленность отсутствует для большинства видов короедов.Более того, в Мексике есть множество видов короедов, поражающих хвойные породы, которые могут расширить свой ареал на юго-запад США (4).

Изменения температуры и режима осадков также косвенно повлияют на жуков-короедов через воздействие на членов сообщества (24, 25, 26) и деревья-хозяева (27, 28). Хотя в прогнозировании характера осадков больше неопределенности, чем в температуре, засуха и высокие температуры могут сыграть роль в инициировании вспышки (7,8, 9). Напряженные деревья-хозяева в сочетании с теплым летом и зимой могут привести к распространению вспышки среди подходящих деревьев-хозяев.На членов сообщества, которые полезны и вредны для короедов, также окажут влияние изменение температуры (29) и режима осадков, хотя об этих взаимодействиях известно меньше.

Опции для управления

Лесные экосистемы эволюционировали с появлением местных нашествий короедов. Однако экономические и социальные издержки вспышек могут быть значительными. Некоторые методы могут повысить устойчивость ландшафта к вспышкам короеда. Долгосрочные стратегии, такие как прореживание и предписанное выжигание, могут оптимизировать траектории развития насаждений, изменить микроклимат в насаждениях, повлиять на распространение и поиск хозяев жуками, а также способствовать жизнеспособности деревьев и разнообразию видов и возрастных классов (13, 30).Однако ясно, что эти типы стратегий управления эффективны только до начала вспышки. Краткосрочные тактики могут использоваться для уменьшения продолжающихся инвазий путем прямого воздействия на популяции жуков, хотя из-за затрат они ограничены для использования в особо ценных районах, таких как палаточные лагеря и границы между дикими территориями и городами. Полуохимические вещества, коммуникационные соединения, выделяемые жуками и деревьями, могут быть использованы для привлечения и отпугивания жуков некоторых видов (31, 32, 33). Другая тактика включает комбинацию инсектицидов, распыляемых непосредственно на стволы деревьев, и санитарные урожаи, в результате чего зараженные деревья удаляются (13).Однако эти типы контроля могут иметь значительное влияние на нецелевые виды, такие как другие беспозвоночные, рыбы и птицы, что необходимо учитывать.

Короеды и огонь — два важных фактора нарушения лесных экосистем, которые могут взаимодействовать друг с другом. Смертность деревьев, вызванная жуками-короедами, может повлиять на последующее поведение пожара, хотя пространственная и временная динамика сложны (34). Удаление убитых жуками деревьев на границе с дикими территориями и рядом с зонами отдыха является жизнеспособным вариантом, который может снизить риск возникновения пожаров в этих приоритетных районах.После диких и предписанных пожаров короеды могут преимущественно атаковать деревья, пострадавшие от пожара, и вносить значительный вклад в гибель деревьев, которые в противном случае пережили бы свои травмы. Описательные модели были разработаны, чтобы помочь менеджерам в выборе деревьев для удаления после пожара, чтобы снизить дополнительную смертность деревьев (35). Однако после диких или предписанных пожаров крупномасштабные вспышки популяций жуков не наблюдались, скорее всего, потому, что деревья, пострадавшие от пожара, предоставляют жукам единичный эпизод или « импульс » стрессовых ресурсов, которые являются локализованными и временными и, следовательно, недостаточными для ландшафта. -масштабный прирост населения (36, 37).

В связи с продолжающимися изменениями климата многие виды деревьев будут находиться в условиях, которые потенциально менее подходят для оптимального роста, что сделает их более уязвимыми для нападений короедов. Чтобы предсказать роль короедов в будущей смертности деревьев, необходима информация, основанная на механистическом понимании процессов. Например, мы знаем, что короеды могут реагировать на деревья, подвергшиеся засухе (8, 27), но конкретные пороговые значения осадков и роль дефицита влаги во взаимоотношениях короед / дерево остаются неясными.Точно так же мы знаем, что температура является сильным фактором роста популяций короедов, но для большинства видов конкретные механизмы, на которые может повлиять изменение климата, неизвестны.

Изучение эндомикробиома и эктомикробиома короедов: случай Dendroctonus simplex

Scolytus schevyrewi (короед полосатый ильм)

В Китае S. schevyrewi обычно претерпевает от двух до трех перекрывающихся поколений в год, в зависимости от местонахождения. Зимует это насекомое либо взрослыми личинками внутри куколочной камеры, либо взрослыми особями под корой. Взрослые особи выходят из мест зимовки в конце апреля — начале мая и начинают искать подходящие деревья-хозяева и атаковать их. Исследования в Таджикистане показали, что S. schevyrewi имеет от трех до четырех поколений в год в Центральной Азии (Махмадзиев и Шукронаев, 1983).

Личинки первого поколения развиваются в мае-июне и к началу июля становятся взрослыми. К концу августа большинство личинок второго поколения строят куколочные камеры и начинают зимовать. Однако некоторые особи продолжают развиваться и завершают третье поколение до наступления зимы при благоприятных температурах (Li et al., 1987; Yang et al., 1988; Wang, 1992).

Вновь развившиеся имаго остаются в своих кукольных камерах от 2 до 5 дней, прежде чем просверлить круглое выходное отверстие диаметром 1,6–2,0 мм в коре.Вылет имаго обычно происходит между 14.00 и 20.00 часами. Соотношение полов слегка смещено в сторону женщин (1,0 женщины: 0,9 мужчин). Новые взрослые особи ходят по стволу в течение первых 30 минут после вылупления и перед началом полета. Взрослые особи наиболее активны в теплую и солнечную погоду.

Созревание кормления происходит на коре в местах пересечения нежных веточек. Однако в Таджикистане исследования S. schevyrewi и некоторых других видов Scolytus показали, что эти насекомые могут воспроизводиться без кормления для созревания (Махмадзиев и Шукронаев, 1983).После созревания кормления самки атакуют деревья-хозяева, сооружая отдельные входные отверстия в коре. Считается, что самки выделяют феромон, чтобы привлечь самцов к входному отверстию. Спаривание происходит на поверхности коры у входного отверстия и длится от 1 до 8 минут (в среднем 5 минут). И самцы, и самки могут спариваться более одного раза.

Поскольку спаривание происходит на поверхности коры, яичные ходы не содержат брачных камер. Каждая самка строит в камбии отдельную галерею для яиц с отдельными нишами для яиц вдоль стены галереи.Галерея для яиц представляет собой одиночный вертикальный туннель, обычно расположенный над входным отверстием, и имеет в среднем от 4 до 6 см (максимум 9 см) в длину. Яичные ниши расположены близко друг к другу по обе стороны галереи и запечатаны смесью опилок и клеевых выделений. Яичные галереи обычно содержат в среднем около 60 яиц с диапазоном от 23 до 123 яиц. Самки охраняют входное отверстие своих яйцекладок до самой смерти (Li et al., 1987; Wang, 1992).

Яйца вылупляются в том порядке, в котором они были отложены.Только что вылупившиеся личинки питаются камбием и строят отдельные ходы. Личиночные ходы сначала перпендикулярны ходу яиц, а затем поворачиваются вверх или вниз. Некоторые ходы личинок извиваются или пересекаются друг с другом. Высокая плотность личинок приводит к полному опоясанию камбия и, в конечном итоге, к гибели дерева. Существует пять личиночных возрастов. По окончании питания зрелые личинки строят куколочные камеры во внешней коре в конце своих ходов и окукливаются (Li et al., 1987; Wang, 1992).

Продолжительность каждой стадии жизни зависит от температуры (Li et al., 1987; Yang et al., 1988; Wang 1992). Например, при 26 ° C стадия яйца длится от 3 до 5 дней (в среднем 3,8 дня), стадия личинки — от 18 до 23 дней (в среднем 21,0 дня), стадия куколки — от 5 до 7 дней (в среднем 6,0 дня) и взрослая стадия длится от 6 до 43 дней (в среднем 20 дней). Обычно для завершения одного поколения в полевых условиях требуется от 40 до 45 дней (Wang, 1992).

Границы | Грибы с синими пятнами, ассоциированные с короедами, повышают активность антиоксидантных ферментов и концентрацию монотерпенов в Pinus yunnanensis

Введение

Хвойные и короеды подсемейства Scolytinae за миллионы лет взаимодействия и совместной эволюции установили сложные взаимоотношения.Хвойные растения выработали многоцелевую конститутивную и индуцируемую защиту для отражения атакующих, в то время как короеды выработали разные стратегии для преодоления этой защиты (Adams et al., 2011; Krokene, 2015). Одна из стратегий жуков заключается в переносе различных фитопатогенных грибов с синей окраской различной вирулентности, которые заражают дерево, когда жуки туннелируют во флоэме (Zhou et al., 2002; Masuya et al., 2003). Считается, что эти грибы способствуют колонизации хозяев короедами (Krokene, 2015). Грибы с синими пятнами — это некротрофные патогены, которые постепенно колонизируют ткани флоэмы и ксилемы вдали от туннелей жуков, захватывая ресурсы деревьев (Six and Wingfield, 2011; Six, 2012), вызывая защиту деревьев (Franceschi et al., 2000; Надь и др., 2000; Виири и др., 2001; Lieutier et al., 2009; Zhao et al., 2010, 2011a, b), и, вероятно, помогает короедам преодолевать защитные силы деревьев (Paine et al., 1997; Lieutier et al., 2009; Zhao et al., 2018). Кроме того, некоторые грибы с синими пятнами, по-видимому, участвуют в питании личинок короеда (Ayres et al., 2000; Bleiker and Six, 2007) и в производстве феромонов агрегации короеда (Zhao et al., 2015).

Защитные реакции хвойных растений сложны и включают несколько метаболических путей, таких как изопреноидные и фенилпропаноидные пути (Iriti and Faoro, 2009).Сосны и другие представители семейства Pinaceae в значительной степени полагаются на монотерпены и другие продукты изопреноидного пути в своей защите от короедов и других биотических проблем (Franceschi et al., 2000; Nagy et al., 2000; Viiri et al., 2001 ; Klepzig et al., 2005; Fäldt et al., 2006; Zhao et al., 2011a). Монотерпены, постоянно накапливающиеся в смоляных каналах флоэмы и заболони, являются первым защитным барьером (Гершензон, Дударева, 2007). После нападения жуков и грибковой инфекции концентрация монотерпена резко возрастает в некротических очагах, образованных защитными механизмами, вызванными деревьями (например,г., Viiri et al., 2001; Клепциг и др., 2005; Fäldt et al., 2006; Zhao et al., 2011a). Поскольку более вирулентные грибы вызывают более длительные некротические поражения и более сильные монотерпеновые ответы на инфекцию, чем менее вирулентные грибы (Krokene and Solheim, 1999; Fäldt et al., 2006), вирулентность грибов часто оценивается путем измерения длины поражения, а количество монотерпенов увеличивается после экспериментальной инокуляции.

Помимо терпенов, сосна и другие растения защищают себя от повреждений, высвобождая антиоксидантные поглощающие ферменты, такие как супероксиддисмутазы (SOD), полифенолоксидазы (PPO), пероксидазы (POD) и каталазы (CAT).Эти ферменты защищают растения от активных форм кислорода, которые выделяются при повреждении тканей растений в результате кормления насекомых, колонизирующих грибы (Liao, 2002; Liu, 2010). Предыдущие исследования показали, что стресс от соли и засухи, ранения, нападение жуков и грибковая инфекция могут изменять активность этих ферментов в растениях (Nagy et al., 2004; Pan et al., 2006). Однако мало что известно об антиоксидантных ферментах в хвойных деревьях и о том, участвуют ли они в устойчивости и устойчивости деревьев к короедам и синюшным грибам (Liao, 2002; Liu, 2010).

Сосна Юньнань ( Pinus yunnanensis ) — это экономически и экологически важное хвойное дерево на юго-западе Китая, которое сильно повреждается сосновыми побегами рода Tomicus (Scolytinae) (Ye, 1992; Lu, 2011). С 1980-х годов 93000 га из P. yunnanensis были уничтожены тремя аборигенными видами Tomicus : T. yunnanensis , T. minor и T. brevipilosus (Ji et al., 2007; Lu, 2011). В Европе видов Tomicus обычно являются вторичными вредителями, которые могут размножаться только во флоэме ствола ослабленных или мертвых деревьев, но их созревание, питающееся побегами здоровых деревьев, может вызвать значительные потери прироста (Jankowiak and Kurek, 2006; Jankowiak, 2008 ).Тем не менее, видов Tomicus могут вести себя агрессивно и убивать здоровых особей своего совместного эволюционирующего дерева-хозяина сосны Юньнань (Lu, 2011). Считается, что опасные грибковые ассоциации вместе с теплым и влажным климатом являются объяснением агрессивности жуков в этом районе (Duan, 1999).

Tomicus связан со многими различными грибами с синими пятнами на юго-западе Китая (Zhou et al., 2000, 2013; Paciura et al., 2010; Chang et al., 2017; Pan et al., 2017, 2018) и Исследования инокуляции показали, что по крайней мере один из них, L.yunnanense , вирулентен по отношению к сосне Юньнань (Liao and Ye, 2002). Недавно мы выделили три вида синюшных грибов с неизвестной вирулентностью из племенных галерей Tomicus : Leptographium wusanense, L. sinense, и Ophiostoma canum . Целью этого исследования было определить, являются ли эти грибы вирулентными по отношению к сосне Юньнань, и оценить их потенциальный ущерб деревьям. С этой целью мы инокулировали грибы во флоэму зрелых деревьев и количественно оценили защитные реакции деревьев, такие как длина поражения, активность антиоксидантных ферментов и концентрации монотерпена.

Материалы и методы

Виды грибов и секвенирование ДНК

В это исследование были включены три вида синеватых грибов, ассоциированных с сосновыми побегами ( Tomicus spp.) В Китае (Таблица 1). Leptographium sinense и недавно описанный вид L. wusanense были изолированы из штольней T. armandii , заражающих сосну Armand ( P. armandii ). Ophiostoma canum выделена из галереи T.yunanensis из юньнаньской сосны. Сосна арманд обычно относительно устойчива к Tomicus (Zhao and Längström, 2012), но, поскольку сосна арманд и сосна Юньнань часто образуют смешанные насаждения, синеватые грибы могут передаваться между этими двумя видами жуками Tomicus . Leptographium sinense ранее был изолирован от Hylobitelus xiaoi , долгоносика, наносящего серьезный ущерб нескольким видам сосны в Китае (Yin et al., 2015). Третий вид грибов, Ophiostoma canum , является обычным партнером Tomicus у сосны Юньнань в Китае (Pan et al.рукопись).

ТАБЛИЦА 1. Изоляты грибов с синими пятнами, использованные в этом исследовании, и номера доступа GenBank для последовательностей ДНК. L., Leptographium; О., Офиостома.

Три грибка с синей окраской были идентифицированы на основе морфологии и секвенирования трех участков ДНК (подробности см. На дополнительных рисунках S1, S2). ДНК экстрагировали, как описано у Raeder and Broda (1985). Для всех трех видов мы амплифицировали частичные последовательности β-тубулина с использованием пары праймеров Bt2a / Bt2b и фактора элонгации 1α (EF-1α) с использованием EF1F / EF2R (Glass and Donaldson, 1995; Jacobs et al., 2004). Кроме того, для L. sinense и L. wushanense мы амплифицировали внутреннюю транскрибируемую область спейсера 2 и часть большой субъединицы (ITS2-LSU), используя пару праймеров ITS3 / LRS (Vilgalys and Hester, 1990; White et al. др., 1990). Для O. canum мы амплифицировали области ITS1 и 2, включая ген 5.8S (ITS1-5.8S-ITS2), с использованием пары праймеров ITS1F / ITS4 (White et al., 1990; Gardes and Bruns, 1993). Все условия ПЦР соответствовали процедуре, описанной Grobbelaar et al.(2009).

Полученные последовательности ДНК сравнивали с соответствующими последовательностями Leptographium и Ophiostoma , депонированными в GenBank. Затем все последовательности были выровнены с использованием ClustalX1.81 (Jeanmougin et al., 1998). Данные для трех секвенированных участков ДНК (рибосомная ДНК, β-тубулин и EF-1α) были объединены с использованием BioEdit 7.0.1. Филогенетические отношения были определены на основе байесовского (BI) анализа с использованием MrBayes 3.1.2 (Ronquist and Huelsenbeck, 2003) и анализа максимального правдоподобия (ML) с использованием RAxML версии 7.0,4 (Стаматакис, 2014). Два филогенетических дерева сгруппировали наши секвенированные штаммы L. sinense и O. canum вместе с другими последовательностями L. sinense и O. canum из GenBank с высокой поддержкой (93 и 100% байесовской апостериорной вероятности (BIPP), соответственно, дополнительные рисунки S1, S2). Дерево Leptographium поместило L. wushanense в комплекс L. lundbergii как родственный таксон L. conunctum и L.yunnanense с 99% BIPP.

Штаммы грибов, использованные в этом исследовании, были депонированы в гербарии лаборатории сохранения и использования биоресурсов, Юньнаньский университет, Куньмин, Юньнань, Китай (YMF; бывшая Ключевая лаборатория промышленной микробиологии и технологии ферментации Юньнани). Данные о последовательностях были депонированы в GenBank (инвентарные номера приведены в таблице 1).

Полевые процедуры

Эксперимент проводился в естественно восстановленном сосновом лесу Юньнань в Юньнани, на юго-западе Китая (25 ° 12′N, 102 ° 77′E) в июле и августе 2016 года.Для инокуляции были выбраны юньнаньские сосны от двадцати до тридцати лет без видимых повреждений и аналогичного размера (диаметр на уровне груди: 13 ± 3 см, высота: 15 ± 3 м (среднее ± стандартное отклонение). Каждое дерево инокулировали по три раза каждой грибка и трижды с контролем с использованием пробкового бурава диаметром 1 см. Инокулят состоял из грибных культур (таблица 1), инкубированных на 2% агаре с солодовым экстрактом в течение 14 дней при 20 ° C в темном или стерильном агаре с солодовым экстрактом в качестве контроля. 12 мест посева на каждом дереве были расположены по спирали вокруг стебля от 0.Высота от 7 до 1,7 м, с чередованием положений для каждой из четырех обработок. Длину повреждений, вызванных различными видами инокуляции, регистрировали через 10, 20 и 30 дней после инокуляции путем осторожного удаления коры пробки над одним набором инокуляционных отверстий и измерения полной длины некротических повреждений во флоэме (одно место инокуляции на одну инокуляционную обработку. в каждый день отбора проб). Одновременно с помощью стерилизованного скальпеля и щипцов из каждого некротического очага брали образец флоэмы.Образцы флоэмы, собранные каждый день, были равномерно разделены на две группы. Одну группу использовали для анализа терпена, а другую — для определения активности антиоксидантных ферментов. После отбора образцы флоэмы помещали по отдельности в стерилизованные пробирки Эппендорфа объемом 1,5 мл и сразу же хранили в жидком азоте. Два или три дополнительных образца флоэмы (12 ± 3 мм × 1,5 ± 0,5 мм) были взяты из каждого некротического поражения и культивированы на 2% агаре с экстрактом солода для повторной изоляции инокулированных грибов.

Определение активности антиоксидантных ферментов

Четыре антиоксидантных фермента (CAT, POD, PPO, SOD) были экстрагированы из контроля, и инокулированные грибами образцы флоэмы были собраны через 10, 20 и 30 дней после инокуляции ( n = 10 деревьев).Активность фермента определяли с использованием специальных наборов в соответствии с инструкциями производителя (Suzhou Comin Biotechnology Co., Ltd., Сучжоу, Цзянсу, Китай). Конкретный метод определения, используемый для каждого из четырех ферментов, приведен в дополнительной таблице S1. Вкратце, флоэма измельчали ​​до мелкого помола в жидком азоте, 0,1 г порошка добавляли к 1 мл реагента (дополнительная таблица S1) в пробирке Эппендорфа и помещали в ледяную баню. Затем супернатант переносили в новую пробирку Эппендорфа и центрифугировали при 8000 об / мин в течение 10 мин при 25 ° C.Полученный неочищенный ферментный экстракт смешивали с определенными реагентами, следуя инструкциям, приведенным в дополнительной таблице S1. Оптическую плотность каждого постреакционного раствора измеряли с использованием спектрофотометра в ультрафиолетовом и видимом диапазонах (модель 752N, Шанхайская фабрика аналитических приборов, Шанхай, Китай), и активность каждого антиоксидантного фермента рассчитывали в соответствии с конкретными формулами, приведенными в дополнительной таблице S1.

Одна единица активности СОД была определена как количество фермента, необходимое для 50% -ного ингибирования восстановления нитро-синего тетразолия (NBT).Одна единица активности POD и PPO была определена как количество фермента, необходимое для изменения оптической плотности на 0,01 при 525 (PPO) и 470 (POD) нм в минуту. Одна единица активности CAT была определена как количество фермента, необходимое для разложения 1 нмоль H ₂ O ₂ при 240 нм в минуту.

Разделение, идентификация и количественная оценка монотерпенов

Все образцы флоэмы с 10 из 20 экспериментальных деревьев по отдельности погружали в 1,5 мл гексана в 8 мл коричневые пробирки (Aijiren, Китай) и выдерживали при 20 ° C в течение 48 часов.Экстракт центрифугировали при 5000 об / мин в течение 10 минут при 8 ° C, 1 мл супернатанта переносили в пробирку для проб объемом 2 мл (Agilent, США) и добавляли 0,3 мг нонена (99%, предоставлено доктором Эренсторфер) в виде внутренний стандарт. Экстракты хранили при -20 ° C до анализа методом газовой хроматографии-масс-спектрометрии (ГХ-МС). Оставшуюся флоэму сушили при 80 ° C в течение 6 часов и взвешивали на электронных весах (Sartorius) для расчета концентрации монотерпена на единицу сухой массы.

ГХ Agilent 6890, подключенный к МС 5973 и капиллярной колонке из плавленого кварца HP-5 (J&W Scientific ^TM , длина 30 м, 0.Внутренний диаметр 25 мм и толщина пленки 0,25 мкм). Один микролитр экстракта вводили в инжектор с разделением / без разделения с инъекцией без разделения в течение 30 с при температуре 250 ° C. Температурная программа начиналась с 40 ° C, повышалась до 80 ° C со скоростью 3 ° C / мин, затем до 280 ° C со скоростью 5 ° C / мин, а затем оставалась на уровне 280 ° C в течение 20 минут.

были идентифицированы с использованием эталонных библиотек Wiley 7 n.l и NIST 98.L и подтверждены путем сравнения времени удерживания и масс-спектров с доступными аутентифицированными стандартами.Абсолютное количество каждого монотерпена (m _x ) было рассчитано с использованием уравнения m _x = k (A _x / A _s ) m _s / D _w (где k — относительный отклик коэффициент, A _x — площадь пика монотерпена в образце, A _s — площадь пика внутреннего стандарта нонана, m _s — масса нонана, а D _w — сухой вес пример). Коэффициент относительного отклика (k) был рассчитан с использованием уравнения k = A _s m _i / (A _i m _s ) (где A _s — площадь пика нонана, A _i — площадь пика стандарта монотерпена, m _s — масса нонана, m _i — масса стандарта монотерпена).

Статистический анализ

Все анализы проводились с помощью SPSS 17.0 (SPSS Inc., Чикаго, Иллинойс, США), а графики были построены с использованием Origin 8.5 (Origin Lab Corporation, Нортгемптон, Массачусетс, США). Различия в длине поражения анализировали с использованием модели повторных измерений, а активность ферментов и концентрации монотерпена тестировали с использованием линейной смешанной модели (GLMM) для повторных измерений, поскольку у нас были некоторые недостающие данные, вызванные несколькими образцами, которые были слишком разбавлены для фермента и монотерпена. анализ.После дисперсионного анализа различия между обработками инокуляцией в каждой временной точке и между временными точками для каждой обработки были протестированы с использованием теста Бонферрони (для данных с равной дисперсией) или теста Т3 Даннета (для данных с неравными дисперсиями) при P = 0,05.

Результаты

Длина поражения флоэмы

Все грибы были патогенными для сосны Юньнань и вызывали значительно более длительные поражения, чем контрольные посевы агара во всех трех временных точках [10 ^th день: F _{(3, 39.796)} = 30,321, P <0,001; 20 ^th день: F _{(3, 40,870)} = 72,155, P <0,001; 30 ^th день: F _{(3, 39,635)} = 86,683, P <0,001]. Эти три гриба показали разную вирулентность по сравнению с юньнаньской сосной. Leptographium wushanense вызывал очень длинные поражения (до 103 мм), которые были значительно длиннее, чем повреждения, вызванные L. sinense и O.canum во всех трех точках времени. Leptographium sinense вызывал несколько, но значительно более длительные поражения, чем O. canum через 20 и 30 дней после инокуляции.

Длина поражения значительно увеличилась со временем для L. wushanense : [ F _(2,57) = 5,658, P <0,01], L. sinense [ F _(2,35,038) = 56,403, p <0,01] и O. canum [ F _(2,57) = 15.579, p <0,001; Рисунок 1].

РИСУНОК 1. Длина некротических поражений во флоэме Pinus yunnanensis после заражения грибком или механического ранения (черные столбцы: Leptographium wushanense , серые столбцы: L. sinense , светло-серые столбцы: Ophiostoma canum , белые столбики: контрольный посев на агар). Данные выражены в виде среднего значения ± стандартная ошибка ( n = 20). Различные буквы указывают на существенные различия между обработками в каждой временной точке (заглавные буквы) или между временными точками для каждого лечения (строчные буквы), после теста Бонферрони или Т3 Даннета при P = 0.05.

Антиоксидантная активность ферментов при поражениях флоэмы

Активность ферментов сильно различалась между четырьмя обработками и во времени с момента инокуляции. Активность СОД в стеблевой флоэме, инокулированной L. wushanense , была значительно выше, чем для трех других обработок через 30 дней после инокуляции [ F _(3,9,131) = 6,382, P = 0,013]. В другие моменты времени не было значительных различий в лечении. Активность SOD значительно увеличилась со временем после инокуляции для всех обработок, кроме O.canum (рисунок 2A и дополнительная таблица S2).

РИСУНОК 2. Активность антиоксидантных ферментов в зонах реакции флоэмы Pinus yunnanensis после заражения грибком или механического ранения ( A , SOD; B , PPO; C , POD; D , CAT) (черные столбцы: Leptographium wushanense , серые столбцы: L. sinense , светло-серые столбцы: Ophiostoma canum , белые столбцы: контрольный посев на агар).Данные выражены как среднее значение ± стандартная ошибка ( n ≤ 10). Разные буквы указывают на значительные различия между обработками в каждой временной точке (заглавные буквы) или между временными точками для каждого лечения (строчные буквы) в соответствии с тестом Бонферрони или Т3 Даннета при P = 0,05.

PPO была более вариабельной с небольшими существенными различиями в обработке, но активность PPO во флоэме, инокулированной L. wushanense , была значительно выше, чем для O.canum через 10 дней после лечения [ F _(3,8,765) = 6,770, P = 0,012]. Единственной обработкой со значительным увеличением активности PPO с течением времени была O. canum , но она начиналась с очень низкой активности через 10 дней после инокуляции [ F _(2,7,303) = 10,729, P = 0,007 ; Рисунок 2B и дополнительная таблица S2].

POD во флоэме, инокулированной L. sinense , была значительно выше, чем в контроле через 20 дней после инокуляции [ F _(3,9.427) = 8,802, P = 0,004] и значительно выше, чем для других обработок через 30 дней после инокуляции [ F _(3,11,580) = 24,407, P <0,001]. Кроме того, со временем активность POD значительно увеличилась для всех видов лечения, кроме контроля (рис. 2C).

CAT показала другой временной образец, чем другие антиоксидантные ферменты, причем активность CAT значительно снижалась со временем для всех четырех обработок (рис. 2).Единственное существенное различие лечения заключалось в том, что L. wushanense имел значительно более высокую активность CAT, чем контроль через 10 дней после обработки [ F _(3,9,420) = 10,663, P = 0,002 (C)].

Концентрации монотерпена в поражениях флоэмы

Шесть монотерпеновых углеводородов (α-пинен, камфен, β-пинен, мирцен, β-фелландрен и α-терпинолен) были обнаружены в повреждениях флоэмы, вызванных контрольными посевами грибков и агаром (рис. 3).Наиболее распространенными монотерпенами во всех вариантах обработки были α-пинен и β-пинен, которые составляли более 83,4% от общего количества монотерпенов в большинстве образцов. Не наблюдалось значительного увеличения концентраций монотерпена с течением времени после инокуляции для любого лечения, хотя абсолютные значения постепенно увеличивались для большинства комбинаций монотерпена и лечения (Рисунок 3 и дополнительная таблица S3).

РИСУНОК 3. Концентрации монотерпена в некротических поражениях флоэмы Pinus yunnanensis после заражения грибком или механического ранения ( A , α-пинен; B , камфен; C , β-пинен; D , мирцен; E , β-фелландрен; F , α-терпинолен) (черные полосы: Leptographium wushanense , серые полосы: L.sinense , светло-серые столбцы: Ophiostoma canum , белые столбцы: контрольный посев на агар). Данные выражены как среднее значение ± стандартная ошибка ( n ≤ 10). Разные буквы указывают на значительные различия между обработками в каждой временной точке (заглавные буквы) или между временными точками для каждого лечения (строчные буквы) в соответствии с тестом Бонферрони или Т3 Даннета при P = 0,05.

Концентрации монотерпена варьировались в зависимости от инокуляции. Два вида Leptographium индуцировали накопление монотерпена больше, чем O.canum и механическое ранение. При последнем отборе образцов через 30 дней после инокуляции L. wushanense индуцировала значительно более высокие концентрации α-пинена [ F _(3,13.193) = 7,172, P = 0,004], β-мирцена [ F _(3,28) = 4,323, P = 0,013] и β-фелландрен [ F _{(3, 29)} = 3,542, P = 0,027] по сравнению с контролем. Кроме того, L. wushanense также индуцировал более высокие уровни камфена, β-пинена и α-терпинолена, чем контроль, но различия не были статистически значимыми.Аналогично, L. sinense индуцировал более сильное накопление большинства монотерпенов, чем контроль, но увеличение было значительным только для α-терпинолена [10 ^th день: F _(3,9.056) = 9,951, P = 0,003; 20 ^-й день: F _(3,11,388) = 5,755, P = 0,012; 30 ^th день: F _(3,13,668) = 15,920, P <0,001]. Ophiostoma canum индуцировал более высокие абсолютные концентрации, чем контроль, для большинства монотерпенов, но различия не были статистически значимыми для любого монотерпена (рис. 3).

В дополнение к различиям, наблюдаемым во время окончательного отбора проб, один или оба вида Leptographium индуцировали значительно более высокие концентрации, чем контроль, для α-пинена, камфена, β-мирцена, β-фелландрена или α-терпинолена при 10 или 20 дней после инокуляции (рис. 3).

Обсуждение

Голубые грибы — хорошо известные ассоциаты видов короедов-короедов, колонизирующих как твердые, так и хвойные деревья. Многие грибки с синими пятнами являются патогенными для деревьев-хозяев, вызывая некроз вокруг естественных очагов заражения и экспериментальных грибковых прививок.Поскольку вирулентные грибы убивают больше тканей хозяина и вызывают более длительные некротические поражения, чем менее вирулентные виды, длина поражения после заражения грибами используется в качестве стандартной меры вирулентности грибов (например, Krokene and Solheim, 1999; Solheim et al., 2001; Viiri et al. ., 2001; Fäldt et al., 2006). В настоящем исследовании прививка L. wushanense вызвала самые длинные поражения у сосны Юньнань, за которой следовали L. sinense и O. canum . Это говорит о том, что L. wushanense является наиболее вирулентным, а O.canum наименее вирулентный из трех протестированных нами грибов.

Ophiostoma canum является обычным партнером T. minor и слабо патогенен для сосны обыкновенной ( P. sylvestris ) и красной сосны японской ( P. densiflora ) (Solheim et al., 2001; Masuya et al., 2001; Masuya et al. др., 2003). Мы обнаружили, что O. canum вызывает несколько, но значительно более длительные повреждения, чем механические ранения, что позволяет предположить, что этот гриб является слабопатогенным также для сосны Юньнань.Патогенность L. sinense и L. wushanense ранее была неизвестна. Наши результаты показывают, что они умеренно ( L. sinense ) или очень вирулентны ( L. wushanense ) по отношению к юньнаньской сосне. Присутствие этих патогенных грибов на юго-западе Китая может быть фактором, способствующим разрушительности видов Tomicus в этом районе.

ГХ / МС сложноэфирной фракции только что появившихся взрослых жуков ( A ) и стандартов монотерпенилового эфира ( B — F ). Стандарты и фракцию сложного эфира вводили в колонку HP-5 при 30 ° C с использованием охлаждающего инжектора на колонке. Вербенилпальмитат, транс, — и цис -вербенилолеат, миртенилолеат и миртанилолеат — все присутствовали во фракции появляющегося женского сложного эфира (красный), но не присутствовали во фракции возникающего мужского сложного эфира (синий).Масс-спектры пиков, обозначенных 1–5, показаны в приложении SI , рис. S5.

Присутствие эфиров вербенила у только что появившихся самок в зависимости от пола.

Вербениловые эфиры, которые представляют собой всего цис-— и транс -вербенилолеатов и пальмитатов, а также миртенилолеат и миртанилолеат, присутствовали в аналогичных количествах у самок и самцов на ранних стадиях жизни личинок первой стадии. до окукливания (рис.2 A — D ).Напротив, значимые половые различия появились у только что появившихся взрослых жуков, которые больше не контактировали с тканями расплода. У вылупившихся имаго только самки содержали значительные количества вербенилового, миртенилового и миртанилового эфиров (рис. 2 A — D ). На ранних стадиях жизни до окукливания вербенилолеат был самым распространенным из монотерпениловых эфиров у обоих полов с 250–1500 нг / мг массы тела жука (рис. 2 A ), что было как минимум на порядок выше. чем любой из других монотерпениловых эфиров.Уровни вербениловых эфиров значительно увеличивались у куколок-самцов по сравнению со стадиями личинок (рис. 2 A и B ), а затем снижались и отсутствовали у только что появившихся взрослых самцов. Напротив, хотя уровни вербениловых эфиров у самок были аналогичны уровням самцов на четырех стадиях личинки, они значительно увеличились у обычных взрослых самок и оставались высокими у вылупившихся самок. В отличие от вербенилового и миртанилового эфиров, уровни других монотерпениловых эфиров, в частности периллила и карвилолеата, не зависели от пола и снижались на протяжении жизненного цикла от личинок раннего возраста до взрослых особей (рис.2 E и F ).

Содержание монотерпениловых эфиров у женщин (розовый) и мужчин (синий) в течение жизненного цикла MPB. Столбцы на том же графике с одной и той же буквой существенно не различались по критерию Коновера (α ≥ 0,05). В период от личиночной стадии до общей взрослой стадии развивающиеся жуки остаются на дереве расплода. Tenerals — это взрослые жуки, у которых нет полностью склеротизированной кутикулы, стадия которой длится 7–14 дней. Вылупившиеся жуки — это полностью зрелые взрослые особи, которые покидают свое расплодное дерево в поисках нового хозяина.Количества ( A ) вербенилолеата, ( B ) вербенилпальмитата и ( D ) миртанилолеата значительно различались между самками и самцами вылупившихся жуков, как показано стрелками, но не для ( C ) миртенилолеат или периллилолеат ( F ). Для карвилолеата ( E ) значимых различий не обнаружено ( n = 4).

Вербенилолеат, накопленный у только что появившихся самок с наибольшим изобилием в брюшной полости и жировом теле.

Вербенилолеат присутствовал у только что появившихся самок в трех основных частях тела — голове, грудной клетке и брюшной полости — где пищеварительный канал с жировым телом был удален из брюшной полости (рис. 3). Иссечение пищеварительного канала показало, что вербенилолеат был наиболее обильным в слое перивисцерального жирового тела, окружающего пищеварительный канал (рис. 3), с гораздо меньшими количествами в средней кишке, мальпигиевых канальцах и задней кишке.

Содержание вербенилолеата в рассеченных тканях формирующейся самки МПБ.Голову, грудную клетку и брюшную полость отделяли, а затем из брюшной полости удаляли пищеварительный канал с мальпигиевыми канальцами и перивисцеральное жировое тело для дальнейшего рассечения на жировое тело, среднюю кишку, мальпигиевы канальцы и заднюю кишку. Звездочкой обозначен живот с удаленным пищеварительным трактом ( n = 4).

Уровни

После идентификации вербениловых эфиров у самцов и самок до взрослого возраста и их специфического для пола изобилия у только что появившихся самок мы проверили, влияет ли на их уровни JHIII, который регулирует высвобождение феромона в MPB.Мы также проверили, влияет ли лечение JHIII на уровни свободного вербенола и других монотерпеновых спиртов у взрослых женщин и мужчин. Уровни транс -вербенола увеличились у женщин, получавших JHIII, по сравнению с контрольной группой, получавшей ацетон (фиг.4 A ), в то время как уровни вербениловых эфиров снизились у женщин, получавших JHIII, по сравнению с контрольной группой (фиг.5 A ). . Уровни цис- -вербенола и миртенола также значительно повышались у женщин в ответ на JHIII (рис.4 B и C ), тогда как соответствующие эфиры уменьшились (рис. 5 B и C ). Обработка JHIII не вызвала повышенных уровней монотерпенолов у мужчин, которым не хватало значительных количеств соответствующих сложных эфиров жирных кислот (Фиг.4 D и 5 D ).

Наличие компонентов феромона монотерпенового спирта в MPB после обработки ацетоном, JHIII или 44 (+): 56 (-) α-пиненом. Столбцы на том же графике с одинаковым номером [(+) энантиомер] или той же буквой [(-) энантиомер] существенно не различались по тесту Коновера (α ≥ 0.05). По сравнению с контрольным ацетоном, обработка JHIII значительно увеличила продукцию ( A ) транс, -вербенола, ( B ) цис -вербенола и ( C ) миртенола у самок, но не у самцов жуков. Обработка α-пиненом увеличивала продукцию ( A ) транс -вербенола, ( B ) цис -вербенола и ( C ) миртенола у обоих полов. ( D ) α-Пинен не увеличивал транс -миртанол, продукт метаболизма β-пинена.Энантиомерные соотношения показаны там, где это уместно ( n = 6).

Наличие монотерпениловых эфиров в MPB после обработки ацетоном, JHIII или α-пиненом. Столбцы на том же графике с одной и той же буквой существенно не различались по критерию Коновера (α ≥ 0,05). ( A ) вербенилолеат, ( B ) вербенилпальмитат и ( D ) миртанилолеат значительно снизились при обработке JHIII у женщин. ( A ) Вербенилолеат, ( B ) вербенилпальмитат и ( C ) миртенилолеат значительно увеличились при обработке α-пиненом у обоих полов ( n = 6).

Уровни

Мы проверили влияние паров α-пинена, который является предполагаемым монотерпеновым предшественником вербенола, полученным из хозяина, на уровни монотерпенолов и монотерпениловых эфиров у только что появившихся самцов и самок. Воздействие почти рацемической смеси α-пинена вызывало повышение уровней транс, -вербенола, цис, -вербенола и миртенола, а также повышенное накопление соответствующих сложных эфиров у обоих полов (рис.4 A — C и 5 A — C ). Воздействие α-пинена не вызывало значительного увеличения уровней миртанола, монотерпенола, полученного из β-пинена, или накопления миртанилолеата у обоих полов (Фиг.4 D и 5 D ).

Стереохимия монотерпенолов, индуцированных обработкой JHIII и α-пиненом.

Ожидается, что стереохимия монотерпенолов, обнаруженных в MPB, будет зависеть от стереохимии предложенных монотерпенов-предшественников ( SI Приложение , рис.S7). Мы сравнили энантиомерное соотношение монотерпенолов, индуцированное обработкой JHIII или α-пиненом, с энантиомерным соотношением предполагаемых предшественников монотерпена.

Энантиомерное соотношение транс--вербенола, обнаруженного у жуков, различалось при обработке JHIII и α-пиненом. Среднее энантиомерное соотношение транс -вербенола у женщин, получавших JHIII, составляло 3 (+): 97 (-) для транс -вербенола (фиг. 4 A ). Это соотношение было аналогично соотношению 4 (+): 96 (-) транс -вербенола, который содержал вербениловые эфиры у только что появившихся самок ( SI Приложение , рис.S3). Энантиомерное соотношение транс -вербенола, обнаруженное у только что появившихся жуков, подвергшихся воздействию почти рацемического пара α-пинена, составляло 34 (+): 66 (-) у самок (рис.4 A ) и 35 (+): 65 (-) у самцов (рис. 4 B ), что было ближе к соотношению 44 (+): 56 (-) α-пинена, используемого для лечения.

Монотерпениловые эфиры в MPB, подверженные воздействию других монотерпенов.

После наблюдения, что воздействие паров α-пинена приводит к повышению уровней вербениловых и миртениловых эфиров как у самок, так и у самцов, мы также подвергли только что появившимся взрослым жукам пары других монотерпенов, присутствующих в деревьях-хозяевах, чтобы проверить наличие монотерпениловых эфиров был специфическим для α-пинена или общим эффектом воздействия монотерпена.Самки и самцы индивидуально подвергались воздействию (-) — β-пинена, (-) — лимонена и (-) — β-фелландрена. Воздействие всех этих монотерпенов привело к образованию у жуков монотерпеновых спиртов и соответствующих монотерпениловых эфиров (рис. 6). Часто после обработки одним монотерпеном получали несколько продуктов. Однако идентичность только нескольких эфиров из (-) — β-пинена и (-) — лимонена может быть подтверждена нашими синтетическими стандартами (рис.6 и SI Приложение , рис.S8).

ГХ / МС хроматограммы экстрактов самок и самцов жуков, обработанных ацетоном, (-) — лимоненом, (-) — β-пиненом и (-) — β-фелландреном. Монотерпениловые эфиры, ( A ) карвилолеат и периллилолеат были идентифицированы у обоих полов MPB, обработанного лимоненом; ( B ) пинокарвилолеат и миртанилолеат были идентифицированы у обоих полов MPB, обработанного β-пиненом; и ( C ) сложный монотерпениловый эфир присутствует в MPB, обработанном β-фелландреном, но не может быть идентифицирован.Масс-спектры пиков, обозначенных 1–6, показаны в приложении SI , рис. S8.

Обсуждение

Короеды (Scolytidae) обычно используют монотерпенольные феромоны. Их биосинтез изучен у видов MPB и Ips с использованием геномного (20), транскриптомного (21–23) и протеомного (16) подходов и функциональной характеристики генов (24–28). Ips paraconfusus и I. pini продуцируют монотерпеноловые феромоны ипсенол и ипсдиенол de novo (29⇓ – 31) в процессе, регулируемом JHIII (32).В целом, стратегии производства феромонов короедами предполагают детоксикацию монотерпенов хозяина (33, 34), которая может включать конъюгацию монотерпенов (17), микробное производство (35) и биосинтез de novo (36). .

В контексте нынешнего расширения географии и диапазона хозяев MPB важно понимать, как MPB продуцирует и высвобождает специфический для женщин феромон агрегации транс -вербенол (11, 37). Это включает тестирование способности MPB накапливать монотерпены-хозяева в качестве предшественников феромонов, когда они наиболее подвержены олеорезии сосны в течение своего жизненного цикла до появления взрослых особей из расплодных деревьев.

В подтверждение гипотезы о накоплении посредством конъюгации транс -вербенола (15, 17, 18) мы идентифицировали монотерпениловые эфиры вербенилолеата и вербенилпальмитата вместе с миртенилолеатом и миртанилолеатом при разработке MPB. Влияние JHIII у женщин на уменьшение вербенилолеата с одновременным увеличением транс -вербенола в отсутствие прямого контакта с α-пиненом подтверждает вывод о том, что эфиры вербенила могут служить пулом метаболитов для специфического для женщин феромона. выпускать.JHIII запускает специфичную для пола повышающую регуляцию экспрессии гена, в том числе специфичную для женского среднего кишечника повышающую регуляцию гена эстеразы, как это наблюдается в данных транскриптома (16).

Способность MPB накапливать монотерпены хозяина посредством этерификации гидроксилированных промежуточных продуктов может быть общим механизмом детоксикации монотерпенов сосны, который не зависит от пола. Такая система детоксикации будет аналогична системам различных видов чешуекрылых, которые конъюгируют фитоэкдистероиды с жирными кислотами в качестве механизма детоксикации (38).В MPB повышенная полярность сложного эфира монотерпениловой жирной кислоты по сравнению с монотерпеновым углеводородом вместе с боковой цепью липофильной жирной кислоты может облегчить транспорт и локализацию производного монотерпена в брюшной полости и, в частности, в жировом теле в виде длинной цепи. -срочное хранение сайта.

У женщин с MPB накопление вербениловых эфиров в качестве механизма детоксикации могло в дальнейшем развиться в специфичную для пола систему феромонов, благодаря которой высвобождение транс -вербенола могло стать независимым от непосредственного контакта с α-пиненом.Присутствие эфиров вербенила становится признаком пола в конце развития MPB в дереве расплода и при появлении жуков. На этой стадии своего жизненного цикла MPB перестают находиться в прямом контакте с монотерпенами расплодных деревьев и еще не вступают в контакт с монотерпенами нового хозяина. Самки сохраняют свои вербениловые эфиры до той стадии, когда они появляются и рассеиваются в поисках нового хозяина, в то время как появившиеся самцы, по-видимому, метаболизируют или иным образом теряют эти соединения.

Монотерпениловые эфиры короткоцепочечных жирных кислот, такие как борнилацетат, были идентифицированы у родственных видов Dendroctonus (39, 40).Монотерпениловые эфиры жирных кислот с более длинной цепью, подобные вербенилолеату, ранее не обнаруживались в Dendroctonus , но действительно присутствуют в растениях, например, хризантенилгексаноат и октаноат в цветках плоского падуба ( Eryngium planum ) (41) и геранил. , нерил и цитронеллил пальмитат и стеарат в лепестках розы ( Rosa × hybrida ) (42). Интересно, что эти монотерпениловые эфиры также были предложены в качестве резервуара для последующего высвобождения летучих монотерпенолов как части цветочного аромата (42).

Подобно настоящему исследованию, предыдущая работа (12, 15, 19) также показала, что мужской и женский MPB могут продуцировать сходные количества транс -вербенола при обработке α-пиненом. Однако самцы продуцируют очень мало или совсем не продуцируют транс -вербенол при контакте с новым деревом-хозяином, хотя и самцы, и самки контактируют с производным от хозяина α-пиненом (8, 10). Эти наблюдения предполагают, что транс -вербенол, высвобождаемый женским MPB на новом дереве-хозяине, может высвобождаться, по крайней мере частично, из специфического для женщин резервуара вербениловых эфиров, возможно, запускается воздействием сигналов хозяина и регулируется JHIII.

Предыдущее исследование (11) показало, что энантиомерное соотношение транс -вербенола, выделяемого атакующими самками, не соответствует энантиомерному соотношению α-пинена, поставляемого атакованным деревом. Наши результаты показывают, что (-) энантиомер имел небольшое предпочтение в превращении α-пинена в транс -вербенол у взрослых. Однако, по-видимому, предпочтение отдается (-) энантиомеру на стадиях гидроксилирования и этерификации на более ранних стадиях жизни, о чем свидетельствует энантиомерный избыток (-) — транс -вербенола в накопленных сложных эфирах и высвобожденных взрослые женщины.

Результаты, представленные здесь, могут иметь более широкое значение для понимания продукции феромонов у других деструктивных видов Dendroctonus , которые продуцируют транс -вербенол в качестве агрегационного, антиагрегационного или синергетического компонента в их коммуникационных системах. К ним относятся сосновоед южный ( Dendroctonus frontalis ) (43), сосновый жук ( D. brevicomis ) (44) и красный скипидар ( D. valens ) (33), которые вызывают повреждение по всей длине. леса в Северной Америке и Азии.

Материалы и методы

Химические вещества.

Следующие химические вещества были получены от Sigma-Aldrich: рацемический JHIII [каталожный номер. J2000, Химическая служба рефератов (CAS), нет. 24198–95-6], N , N ′ -дициклогексилкарбодиимид (DCC, каталожный номер D8002), 4- (диметиламино) пиридин (DMAP, каталожный номер 39405), N , O — бис (триметилсилил) трифторацетамид (BSTFA, № по каталогу 15209), (+) — α-пинен (№ CAS 7785–70-8), (-) — α-пинен (№ CAS.7785–26-4), (-) — карвеол (каталожный номер 192384), (-) — миртенол (каталожный номер W343900), олеиновая кислота (каталожный номер O1008), пальмитиновая кислота (каталожный номер P0500), ( S ) — (-) — периллиловый спирт (каталожный номер 218391), стеариновая кислота (каталожный номер 85679), (-) — транспинокарвеол (каталожный номер 80613), (-) — β-пинен (каталожный номер. 112089), (+) — 3-карен (каталожный номер 441619), (-) — лимонен (каталожный номер 218367) и мирцен (каталожный номер M100005). транс -Вербенол [∼20 (+): 80 (-) оптическая чистота, номер партии. W06-00141] и цис -Вербенол [∼20 (+): 80 (-) оптическая чистота, номер партии.CV001129] были получены от PheroTech. (-) — транс -миртанол (каталожный номер 5134 S) был получен от Extrasynthese, а (-) — β-фелландрен был получен путем очистки от скипидара полевой сосны ( Pinus contorta ) компанией Synergy Semiochemicals.

МПБ и коллекция флоэмы.

стеблей сосны, зараженной MPB ( P. contorta ), были собраны около Уистлера, Британская Колумбия, Канада (50 ° 12′46,6 ″ с.ш., 122 ° 53′20,8 ″ з.д.).В июне 2016 года феромонные приманки MPB (Contech) были прикреплены к деревьям и удалены после атаки через 4 недели. В сентябре 2016 года зараженные деревья были вырублены, а бревна помещены в экранированные клетки при комнатной температуре. Образцы флоэмы были собраны из зараженных бревен. Личинок, куколок и взрослых особей отделяли от зараженных бревен и хранили при -80 ° C. Возраст личинок оценивали по ширине головной капсулы по Блейкеру и Реньье (45). Кроме того, каждые 3–4 дня собирали вылупившихся взрослых особей из проверенных клеток.Взрослые MPB были определены по полу по форме седьмого тергита брюшка согласно Lyon (46), а личинки и куколки — с помощью ПЦР.

Определение пола MPB методом ПЦР.

Праймеры для ПЦР, специфичные для пола, были разработаны для определения пола личинок и куколок MPB ( SI, приложение , рисунки S9 и S10 и таблица S2). Подобно методу, разработанному для определения пола в Tribolium casteneum (47), эти праймеры амплифицируют области хромосом neo-X и neo-Y в мультиплексной ПЦР. ПЦР самцов (neo-X и neo-Y) дает два основных продукта ДНК, а ПЦР самок (neo-X и neo-X) дает один основной продукт ДНК, обнаруженный на агарозном геле.Праймеры были проверены на 60 взрослых особях мужского и женского пола, которые были разделены по полу с использованием морфологических характеристик (46). ДНК экстрагировали из образцов личинок и куколок, которые предварительно экстрагировали пентаном для анализа транс- -вербенилового эфира. Образец ³ MPB объемом около 1 мм использовали для получения 20 мкл экстракта ДНК с использованием набора для насекомых препГЕМ (ZyGEM) в соответствии с инструкциями производителя.

Обработка МПБ.

Новые взрослые женщины и мужчины MPB обрабатывались отдельно ацетоном, JHIII, α-пиненом и другими монотерпенами для тестирования продукции транс -вербенола.Для лечения JHIII 0,5 мкл JHIII (20 мг / мл в ацетоне) наносили местно на живот. Местное нанесение 0,5 мкл ацетона служило контролем. Обработанных жуков помещали по отдельности в герметичные стеклянные флаконы объемом 20 мл. Оба энантиомера α-пинена использовали для лечения жуков, поскольку оба энантиомера присутствуют в сосновых хозяевах MPB. В обработках использовалась почти рацемическая смесь [44 (+): 56 (-)] α-пинена, из которых 2 мкл наносили на 1-см фильтровальную бумагу Whatman ² и помещали в герметичный 20-миллилитровый стакан. флакон с индивидуальным жуком.Жукам позволяли контактировать с фильтровальной бумагой, несущей α-пинен. Другие обработки монотерпеном проводили с 2 мкл (-) — β-фелландрена, 2 мкл (-) — β-пинена или 1 мкл (-) — лимонена, нанесенными на фильтр Whatman размером 1 см ² . Жуков обрабатывали в течение 24 ч, а затем вынимали из флакона, замораживали в жидкости N ₂ и хранили при -80 ° C до экстракции.

Диссекция МПБ.

Вылупившиеся самки были разрезаны на голову, грудную клетку и брюшную полость.Пищеварительный канал был удален из рассеченного живота и разделен на жировое тело (перивисцеральный слой), среднюю кишку, мальпигиевы канальцы и заднюю кишку. Перивисцеральный слой жирового тела окружает пищеварительный канал и был удален чисто, без загрязнения другими тканями. Остальная часть жирового тела (париетальный слой), расположенная между мышцами живота, грудной клетки и головы, не могла быть удалена полностью или полностью и была оставлена ​​на месте.

Экстракция метаболитов.

Замороженных жуков измельчали ​​в 2-мл пробирке Safe-Lock (Eppendorf) на сухом льду с помощью стержня для перемешивания из холодного стекла и экстрагировали 0.5 мл пентана, содержащего 1 нг / мкл тридекана в качестве внутреннего стандарта. Образцы меньшего размера (личинки первой и второй возрастных стадий и рассеченный пищеварительный канал) экстрагировали 0,1–0,25 мл пентана. Из одной пробирки извлекали одну личинку, куколку или взрослую особь. Образцы извлекали из сухого льда, давали ему оттаять в течение нескольких минут и центрифугировали в течение 20 с при 2000 × g . Образцы снова замораживали на сухом льду, и супернатант пентана переносили в стеклянный флакон желтого цвета на 2 мл (Agilent). Жуков добыли второй раз с 0.5 мл пентана, и два экстракта были объединены. Для удаления избыточного количества жирных кислот из образца к объединенному пентановому экстракту добавляли 400 мкл 1 мМ карбоната аммония (pH 8) и встряхивали. Образец центрифугировали в течение 10 мин при 3000 × g , и слой пентана удаляли для анализа с помощью ГХ / МС. Образцы флоэмы экстрагировали 1,5 мл метил-трет-бутилового эфира (МТБЭ) (Sigma-Aldrich).

Идентификация сложных эфиров монотерпениловых жирных кислот в женских MPB.

Для идентификации специфических для самок соединений, обнаруженных в виде сложных эфиров в вылупившихся жуках, экстракты самцов и самок жуков были отдельно обработаны с помощью хроматографии на силикагеле и гидролиза сложного эфира.Экстракты жуков упаривали досуха, повторно растворяли в 0,2 мл гексана, загружали в колонку с силикагелем (300 мг) (каталожный № S2509; Sigma) и промывали 4 мл гексана для удаления алканов. Сложные эфиры элюировали 6 мл 1% (об. / Об.) МТБЭ в гексане. Для гидролиза сложных эфиров 3 мл сложноэфирной фракции упаривали досуха и гидролизовали повторным растворением в 0,5 мл 0,3 М метанольного гидроксида калия и инкубацией при 75 ° C в течение 1 ч в запечатанном флаконе объемом 2 мл из желтого стекла (каталожный номер. 5182–0716; Agilent).Затем высвободившиеся спирты дважды экстрагировали 0,5 мл пентана. Фракцию сложного эфира и спирты, полученные гидролизом, анализировали с помощью ГХ / МС.

Синтез стандартов монотерпенилового эфира.

Монотерпениловые эфиры были синтезированы этерификацией Стеглиха (48) для идентификации женских специфических сложных эфиров. Количества 35 ммоль жирной кислоты и 105 ммоль монотерпенола объединяли в 1 мл CH ₂ Cl ₂ и помещали на лед и 0,2 мл охлажденного льдом раствора CH ₂ Cl ₂ , содержащего 39 ммоль DCC и 3.Добавляли 5 ммоль DMAP. Янтарные флаконы для ГХ (Agilent), содержащие реакционную смесь, кратковременно встряхивали, а затем выдерживали на льду в течение 10 минут, а затем помещали на шейкер при комнатной температуре на 2 часа. Последующая обработка включала промывание 1 М ацетатом натрия (pH 5,2), промывание насыщенным NaCl и затем сушку над безводным MgSO ₄ . Раствор CH ₂ Cl ₂ упаривали в потоке газообразного азота, и продукт повторно растворяли в 0,5 мл гексана. Продукт очищали на колонке с диоксидом кремния 300 мг, сначала пропуская через колонку 4 мл гексана, а затем элюируя сложноэфирный продукт 6 мл 1% (об. / Об.) МТВЕ в гексане.Монотерпениловые эфиры анализировали с помощью ГХ / МС. Однако вербенилолеат был термически нестабильным в условиях высоких температур на входе ГХ (250 ° C), что приводило к обнаружению нескольких продуктов распада с множественными пиками на хроматограмме стандартов. Кроме того, ментатриены, цимены и вербены (продукты разложения вербенола) были обнаружены с помощью ГХ / МС экстрактов жуков всякий раз, когда присутствовали сложные эфиры, даже когда углеводороды были удалены хроматографией на силикагеле ( SI Приложение , рис.S1). Холодная (30 ° C) инъекция в колонку стандартов сложных эфиров и фракций эфиров жуков предотвращала разложение сложных эфиров (рис. 1).

Анализ ГХ / МС.

Монотерпениловые эфиры были разделены и проанализированы с использованием колонки Agilent VF-5 (5% фенилметилсилоксан, длина 27,4 м, внутренний диаметр 250 мкм, толщина пленки 0,25 мкм) при 0,9 мл⋅мин ^-1 He на Agilent 7890A системный ГХ, пробоотборник Agilent серии 7683B и трехквадрупольный МС-детектор 7000A GC / MS при 70 эВ. Температурная программа ГХ была следующей: 40 ° C в течение 2 минут, повышение при 18 ° C минимум ^-1 до 300 ° C, выдержка в течение 7 минут с использованием импульсного инжектора без деления потока, поддерживаемого при 250 ° C.Перед анализом жирные кислоты были дериватизированы с помощью BSTFA.

Из-за их термической нестабильности стандарты монотерпенилового эфира также были проанализированы с использованием инжектора охлаждающей колонки на колонке Agilent HP-5 (5% фенилметилсилоксан, длина 30 м, внутренний диаметр 250 мкм, толщина пленки 0,25 мкм) при 0,9 мл⋅мин ^-1 He на системе ГХ Agilent 6890A, пробоотборнике для ГХ Agilent серии 7683 и масс-селективном детекторе Agilent 5973 при 70 эВ. Температурная программа ГХ была следующей: 30 ° C в течение 1 мин, повышение при 20 ° C мин. ^-1 до 300 ° C и выдержка в течение 7 мин.Температура охлаждающего инжектора на колонке увеличилась на 20 ° C мин. ^-1 , отслеживая температуру колонки.

Энантиомерная чистота транс, — и цис -вербенола, экстрагированного из жуков, была проанализирована на колонке Agilent CyclodexB (10,5% β-циклодекстрин, длина 25,7 м, внутренний диаметр 250 мкм, толщина пленки 0,25 мкм) при 0,9 мл⋅ min ^-1 He на системе ГХ Agilent 7890A, Agilent GC Sampler 80 и трехквадрупольном МСД M5975C с тройным квадратом M5975C с трехосевым детектором при 70 эВ.Температурная программа ГХ была следующей: 40 ° C в течение 2 минут, повышение при 10 ° C минимум ^-1 до 100 ° C, 20 ° C минимум ^-1 до 230 ° C, выдержка в течение 7 минут с импульсным без разделения инжектор выдерживается при 250 ° C.

Статистический анализ.

Количества соединений были проанализированы с использованием непараметрических тестов, поскольку они не прошли тесты на нормальность и однородные дисперсии (тест нормальности Шапиро – Уилка и тест однородности дисперсий Барлетта). Мы использовали тест суммы рангов Крускала – Уоллиса, а затем тест Коновера для парных сравнений со значениями P , скорректированными методом коррекции Бенджамини, Хохберга и Йекутиели для множественных сравнений.

Благодарности

Мы благодарим г-на Стирлинга Ангуса (JCH Forestry Ltd.), г-на Питера Акхерста (Cheakamus Community Forest), г-на Дэвида Эрхардта (Wedgewoods Estates), доктора Джастина Г.А. Уайтхилла [Университет Британской Колумбии (UBC) ] и г-же Джудит К. Бут (UBC) за техническую и логистическую помощь, включая доступ и помощь с коллекциями жуков и биопробами; Г-жа Лина Мадилао (UBC) за экспертный анализ ГХ / МС; и д-р Эрика Плеттнер (Университет Саймона Фрейзера), д-р Мюррей Исман (UBC) и д-р.Аллану Кэрроллу (UBC) за совет и обсуждение. Исследование было поддержано Канадским советом по естественным наукам и инженерным исследованиям (J.B.) через проект TRIA Net и грант Discovery. J.B. — заслуженный ученый университета.

Сноски

• Вклад авторов: C.C.C., C.I.K. и J.B. проведено исследование; C.C.C. проведенное исследование; C.I.K. внесены новые реагенты / аналитические инструменты; C.C.C., C.I.K. и J.B. проанализировали данные; и C.C.C., C.I.K. и J.Б. написал статью.

• Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

• Эта статья представляет собой прямое представление PNAS.

• Эта статья содержит вспомогательную информацию на сайте www.pnas.org/lookup/suppl/doi:10.1073/pnas.1722380115/-/DCSupplemental.

• Copyright © 2018 Автор (ы). Опубликовано PNAS.

Препарат для обезвоживания ногтей, праймер и масло для кутикулы

Из-за глобальной вспышки нового вируса короны (COVID-19) сократилось время логистики и транспортировки.Пожалуйста, проявите терпение.

На официальном сайте BEETLES GEL POLISH ваше удовлетворение — наша гарантия.

Если по какой-либо причине вы не полностью удовлетворены продуктами, приобретенными на сайте www.beetlesgel.com, вы можете вернуть неиспользованную часть для обмена или возврата денег. Для заказов на нашем сайте у вас есть 30-дневная гарантия возврата.

Если возврат вызван потребителем, он должен нести ответственность за стоимость доставки. Конкретная плата должна зависеть от выбранной вами курьерской компании.

Если по нашим причинам полученный товар поврежден или не соответствует требованиям, по этой причине с потребителя не взимается плата за доставку.

Плата за возврат товара не взимается с потребителей.

Пожалуйста, свяжитесь с нами по электронной почте [email protected].
Наша онлайн-служба поддержки клиентов будет рада помочь вам с правом возврата, предоставив инструкции по возврату и адрес обратной доставки.
* Возврату подлежат только продукты, приобретенные на сайте www.beetlesgel.com.

Вопросы и ответы по возврату / обмену

• ♡ Сколько времени потребуется, чтобы получить кредит на возвращенные товары?

После получения возврат обрабатывается в течение 7–10 рабочих дней. Время зачисления кредита на ваш счет может варьироваться и определяется банком-эмитентом.Пожалуйста, свяжитесь с банком-эмитентом / оригинальным способом оплаты для получения подробной информации.

• ♡ Я совершил покупку через PayPal. Могу ли я обменять свой заказ?

Да. Если вы хотите произвести обмен по заказу, изначально оплаченному через PayPal, свяжитесь с нами по электронной почте [email protected]. с идентификатором вашего заказа. Наша сервисная команда будет рада помочь вам в обработке обмена или отмены ваших заказов.

• ♡ Я заказал / получил не тот товар. Могу я его вернуть?

Если ваш онлайн-заказ не соответствует ожиданиям, обратитесь в службу поддержки клиентов @ beetlesgel.com за помощью. Наша сервисная команда будет рада помочь вам в оформлении возврата, для товаров на складе мы отправим правильный адрес на ваш адрес.

• ♡ Мой товар прибыл поврежденным. Что я должен делать?

Если вы получили поврежденный товар, сохраните коробку, упаковку и все содержимое и как можно скорее свяжитесь с нами по адресу [email protected] для получения помощи.

Когда ваш заказ будет доставлен, пожалуйста, осмотрите картонную коробку на предмет повреждений, которые могли возникнуть во время транспортировки.Картонная упаковка имеет некоторый износ, однако, если товар (-ы) в вашем отправлении был поврежден, пожалуйста, сохраните коробку, упаковочные материалы и предметы внутри, сделайте несколько четких фотографий и свяжитесь с нами, как только возможный.

Пятно блокирующий грунт (Покрытие любого окрашенного дерева, стен и т. Д.)

Если вы нанесете любую среднюю грунтовку на мореное дерево, на стены с пятнами от воды или на дерево с «сучками»… а затем покрасите его… пятна растекутся по всем краскам , и вам придется начинать заново — квадрат один.Праймеры, блокирующие пятна, очень важны.

бывают разной огневой мощи, и если у вас есть пятна, вам понадобится грунтовка, блокирующая пятно, с и мощностью . Ежедневно мой выбор, чтобы убедиться, что я запечатал пятно, — это Prime Lock от Бена Мура. Это грунтовка для внутренних работ на масляной основе. Другие, которые я использую, такие как латексные праймеры, праймеры для шеллака и некоторые внешние праймеры, показаны ниже с тем, что они делают для вас.

Какой самый лучший праймер, блокирующий пятна? Это зависит от вашей проблемы.Если у вас была протечка воды и вы красите стены или потолок пятнами, вам нужно заблокировать пятно грунтовкой, содержащей пятновыводители. Эти пятна растекутся через все краски, если их не остановить грунтовкой , блокирующей пятна.

Можно использовать любую грунтовку? Не для пятен и деревянных «сучков». Грунтовки без компонентов, блокирующих пятно, просто делают разные поверхности одинаковыми пористостью: они не блокируют дубильные вещества и смолы. Это слишком упрощенно, но на самом деле вам нужны праймеры, блокирующие окрашивание.

Если вы хотите, чтобы шорт-лист был здесь вверху,

Для удаления сильных пятен используйте:

1. Лучший блокиратор Бенджамина Мура: (внутренний) Prime Lock Plus для внутреннего использования и Block Out для внешнего вида — см. Грунтовки для наружных работ, прыгайте ниже. У меня никогда не было древесного сока, танина, пятен от воды или сучков деревьев, которые просачивались через эту первоклассную грунтовку. Эти пятна могут долго просачиваться на верхние покрытия, что делает нас непрофессиональными. Поскольку PrimeLock — это грунтовка на масляной основе, имейте под рукой уайт-спирит (разбавитель для краски), а также одноразовые тряпки.Чтобы нанести, я люблю налить немного в литровую банку и отрезать ручку старой кисти, которую я оставлю в банке на следующий раз. Это грязно, вам понадобятся перчатки, но зачем выбрасывать кисть за кистью? Просто совет для вас.
2. Если вы не хотите связываться с блокираторами на масляной основе, используйте Aqua Lock Plus. Это лучшая грунтовка Бена Мура на водной основе, и я использую ее в качестве грунтовки, когда на стенах или потолке возникают проблемы с окрашиванием. Если после высыхания грунтовки появятся стойкие пятна, я нанесу на них пятно PrimeLock, показанное выше.Мое время — деньги. Я не получаю «перезвон» по поводу оставленных мною пятен.
3. Какая грунтовка для блокирования пятен лучше всего? Наилучшим ядерным вариантом, самым лучшим праймером, блокирующим пятна, является BIN, праймер на основе шеллака с белым пигментом. Эта ссылка предназначена для кварты, а изображение ниже — для галлона. Он очень токсичен, но очень эффективен. Очищает медицинским спиртом и поставляется в виде спрея (ссылка ниже). Это грунтовка №1 на рынке, блокирующая пятна, и она очень быстро сохнет. Как и в случае с Prime Lock выше, я держу одноразовую щетку прямо в банке, потому что при использовании BIN нет никакой разумной очистки кисти.Я не могу видеть, используя кисть один раз, а затем выбросив ее! БИН нужно перемешивать или взбалтывать каждые несколько часов. Посмотрите видео ниже, как я выставляю себя дураком, показывая, как встряхивать баллончик с краской, не принося ее в магазин красок.

Праймеры действительно получаются очень сложными, но ниже я делаю их легко усваиваемыми. Вы будете судить об этом!

Предотвратите кошмар: сделайте правильный!

• Грунтовки без блокаторов: Как и в случае с новым гипсокартоном, разные поверхности имеют разную плотность пор, и грунтовка равномерно заполняет и герметизирует их все и создает ровную поверхность, поэтому ваша краска будет не будь здесь блестящим, а там льсти.Мы называем это «миганием».
• Пятновыводители входят в состав более дорогих грунтовок — это останавливающие смолы, дубильные вещества и другие вредные вещества, такие как древесный сок, которые просачиваются в верхние слои краски.

Всегда ли нужна грунтовка с пятновыводителями?

Нет, если вы не видите пятен или красите никогда ранее не окрашенное дерево.

Иногда некоторые деревянные сучки просачиваются через год, поэтому вам нужно убедиться в этом прямо сейчас.

Вы хотите удалить все пятна за один прием.На самом деле вам никогда не понадобится 2 слоя любой грунтовки. (Наружные грунтовки внизу.)

Как всегда, использование плохо разработанных грунтовок (и красок) в конечном итоге дороже. Если вы потратите больше вперед, вы сэкономите деньги в долгосрочной перспективе.

Выбор №1: Просто лучшее

Независимо от того, осталось ли у вас несколько пятен или даже если вы переделываете деревянную отделку или шкафы под покраску: Слегка отшлифуйте каждый квадратный дюйм (ровно столько, чтобы поцарапать его для лучшего склеивания — мы используем наждачную бумагу с зернистостью 150 — тогда…

Лучшим и первым выбором должна быть грунтовка на масляной основе (да, ее можно покрыть латексной краской).Для повседневного использования я использую Prime Lock Plus от Benjamin Moore, и у меня никогда не было проблем с появлением пятен. Важно: носить респиратор (здесь мы упростили сложный мир фильтров) и открывать окна или как-то проветривать помещение. Он быстро уходит, поэтому через несколько часов вы можете находиться рядом с ним без респиратора.

Prime Lock блокирует цветные карандаши, повреждения от дыма, запахи и все другие уже упомянутые пятна. (См. Спецификацию Бена Мура).

Переделывать деревянную отделку или шкафы под покраску? Перейти к этой информации.

Выбор №2: Отличная пятно-блокирующая грунтовка на водной основе

Если вам не нравятся масляные краски (а кто их любит?), Используйте Aqua Lock Plus, грунтовку на водной основе, почти такую ​​же мощную, как Prime Block. Эта ссылка предназначена для кварты, а изображение ниже — для галлона. Эта грунтовка имеет значительную мощность, но не похожа на грунтовку на масляной основе, описанную выше. Вот один способ: загрунтовать поверхность, запомнив, где находятся пятна (фотография может оказаться полезной). После высыхания AquaLock проверьте, не вышли ли эти пятна.Это может занять ночь или больше.

Если есть какие-либо пятна, просачивающиеся сквозь них, ударьте по ним либо указанным выше PrimeLock, либо нанесите ядерный удар с помощью BIN, грунтовки на основе шеллака (эта ссылка относится к жидкости, спрей — чуть ниже). Шеллак очищает медицинским спиртом или денатурированным спиртом.

Аэрозольный баллончик BIN подходит для любых мелких добавок, которые вы не получили в первый раз, но будьте осторожны с излишками распыления: они не соскальзывают!

ВАЖНО: нужен респиратор для грунтовки шеллак! Во-первых, вы выбираете маску (я использую и рекомендую ее), которая идет без фильтров… и этот комплект фильтров имеет отличный фильтр для паров плюс бумажные накладки, чтобы пыль не попадала внутрь.Читайте о масках, фильтрах и т. Д. В моем сообщении о респираторе. Примечание: маска, связанная чуть выше, представляет собой маску среднего размера 6200 для лиц среднего размера. 6100 — маленький, а 6300 — большой.

Выбор # 3: Пятно-блокирующая грунтовка на масляной основе без запаха

Kilz без запаха на масляной основе (эта ссылка для кварты, изображение для галлона), дает вам большую часть ингредиентов, блокирующих пятно, которые нельзя смешивать с растворами на водной основе, но без запаха. Я использовал это для очень чувствительного покупателя, который только что купил старую квартиру для курильщика.Но это сработало. Попкорн на потолке и все такое. Не совсем без запаха, но близко.

Для людей с аллергией и / или повышенной чувствительностью это отличный выбор.

Выбор № 4: Рисковать чем угодно

Если у вас есть какой-то случайный праймер, оставшийся от какого-то проекта, или если вы хотите избежать уровня токсичности больших мальчиков, описанного выше (Aqua Lock не так уж и плох), продолжайте и используйте свой праймер. Через короткое время вы можете увидеть, как сквозь него потекли пятна. Помните, что некоторым пятнам может потребоваться год или больше, чтобы вытечь через верхнее покрытие.

В этот момент просто отметьте штрих с помощью BIN (ссылка выше) и подправьте. НИЧТО не проходит через эту грунтовку, и точка.

Особые проблемы

Для защиты от ржавчины и других металлов закройте его Rust Scat, быстросохнущей грунтовкой для металла на масляной основе. Удивила, как быстро сохнет в теплый день (на улице).

Преобразователь ржавчины от 3M также действует как грунтовка после химического воздействия на ржавчину. Я бы порекомендовал вам прогрунтовать Rust Scat (чуть выше) после его использования, а также перед покраской.

Что будет, если закрасить плесень?

Для плесени, сначала, конечно, вам нужно убить ее , используя мощный убийца плесени (также поставляется в аэрозольных баллончиках), а затем, когда он высохнет, нанесите грунтовку для уничтожения плесени в любом месте, где может вырасти плесень. Наконец, добавьте Paint-Guard добавку, препятствующую образованию плесени, в верхние слои краски.

Большой совет: Не используйте отбеливатель. Отбеливатель не убивает все споры, а те, которые выживают, быстрее размножаются. Кроме того, отбеливатель — смертельный яд!

Грунтовка для блокировки наружных пятен

Грунтовки на масляной основе предпочитают большинство маляров, но если вы предпочитаете водную основу, выберите Ben Moore’s Block Out, латексный блокатор пятен, которым вы можете загрунтовать весь дом и получить отличную защиту и сцепление.

Грунтовка на масляной основе и блокатор пятен — мое предпочтение, и я использую старый стандарт: масляную грунтовку Rustoleum’s Cover Stain при окраске на открытом воздухе. Я израсходовал галлон или тысячу.

Для собственно работы я советую использовать старую кисть для грунтовки и сохранить новые кисти для финишных покрытий.

Теперь, как преобразовать деревянную отделку и шкафы в покраску… у нас есть все для вас, не буквально!

Грунтовка для распыления? Конечно.Действуй. Все про опрыскиватели мы написали здесь. Graco — это бренд, которому доверяет большинство профессиональных художников.

Краска и грунтовка в одном?

Большинство художников их не любят. Вначале они не работали. Но в настоящее время они лучше блокируют пятна. Я подробно рассказывал об этом в этом посте, посвященном краске и грунтовке. В настоящее время технология заключается в том, что крошечные частицы объединяются, образуя уплотнение и действуя как герметик / грунтовка, но не обязательно блокатор пятен.Если они потерпят неудачу, плохо будут выглядеть мы, а не производители красок. Даже если покупатель этого не видит, мы делаем и должны корректировать. Но это более быстрый и менее дорогой способ, и он используется во многих объектах аренды.

Вот наш взгляд на то, как блокировать пятна с помощью грунтовки. Есть комментарии? Сообщите нам об этом ниже.

Похожие сообщения:

Здесь нам просто нужно запечатать пятно от деревянного сучка, которое просочилось через грунтовку и верхний слой краски: